*CN101858892A*
(10)申请公布号 CN 101858892 A(43)申请公布日 2010.10.13
(12)发明专利申请
(21)申请号 200910029421.6(22)申请日 2009.04.13
(71)申请人南京海辰药业有限公司
地址210046 江苏省南京市南京经济技术开
发区恒发路1号(72)发明人冒宜兰 姚晓敏 冯明声 倪桃
郑文艳 张璐 曹于平(51)Int.Cl.
G01N 30/02(2006.01)C07D 317/24(2006.01)
权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 1 页
(54)发明名称
通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔光学异构体的方法(57)摘要
本发明提供了通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔光学异构体的方法，具体如下：(1)色谱条件：色谱柱采用硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺；检测波长为200nm～240m。(2)采用有机溶剂将样品配制为含盐酸兰
记录地洛尔0.5～5.0mg/m1的溶液。(3)测定，
色谱图。本发明测定方法达到的盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A、B、C异构体分离度可达1.5～3.9，符合中国药典要求。本发明提供方法同时可用于盐酸兰地洛尔光学异构体的定量。
CN 101858892 ACN 101858892 ACN 101858893 A
权 利 要 求 书
1/1页
1.通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔光学异构体的方法，具体如下：
1)色谱条件：色谱柱采用硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺，比例为70～90∶10～30∶0.02～0.5；检测波长为200nm～240nm；柱温为20～40℃；流动相流速为0.5～2.0ml/min；
2)样品溶液的配制：采用有机溶剂将样品配制成为含盐酸兰地洛尔0.5～5.0mg/ml的溶液，所述有机溶剂选自正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇；
3)测定：将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相正己烷-异丙醇-二乙胺比例为75～85∶15～25∶0.05～0.2。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述流动相正己烷-异丙醇-二乙胺比例为80∶20∶0.1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于检测波长为210nm～230nm。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于检测波长为220nm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于柱温为30～40℃。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于柱温为35℃。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于流动相流速为0.8～1.2ml/min。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于流动相流速为1.0ml/min。10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于样品溶液的配制中采用的有机溶剂为异丙醇-甲醇(50∶50)。
11.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于将样品溶液配制为含盐酸兰地洛尔1～3mg/ml的溶液。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于将样品溶液配制为含盐酸兰地洛尔2mg/ml的溶液。
2
CN 101858892 ACN 101858893 A
说 明 书
1/3页
通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔光学异构体的方法
技术领域
本发明涉及通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔(Landiolol Hydrochloride)光学异构体的方法，更具体的说是检测盐酸兰地洛尔生产过程中或者是盐酸兰地洛尔产品中盐酸兰地洛尔A异构体(Isomer A)、盐酸兰地洛尔B异构体(Isomer B)及盐酸兰地洛尔C异构体(Isomer C)的方法。
[0001] [0002]
背景技术
[0003]
盐酸兰地洛尔是在盐酸艾司洛尔基础上进行结构改进而获得的新化合物，其化
学名为4-[(2S)-2-羟基-3-[[2-[(4-吗啉甲酰)氨基]乙基]氨基]丙氧基]苯丙酸4-[(4S)-2，2-二甲基-1，3-二氧五环]甲酯盐酸盐，分子式：C25H39N308·HCl，分子量：
546.05，具有选择性β1受体阻断作用，不具有内在拟交感活性和膜稳定作用。盐酸兰地洛尔作用机制是主要作用于心脏β1受体，并抑制交感神经末梢及肾上腺髓质释放的去甲肾上腺素和肾上腺素引起的心率增加。很多异构体通过高效液相色谱法分离的方法是已知的，但流动相、溶剂、柱温、色谱柱等因素对于检测结果有很大影响或不适用于目标检测物。发明内容
[0004] 本发明的目的是提供通过高效液相色谱法检测在盐酸兰地洛尔手性合成中所得盐酸兰地洛尔A、B、C异构体的方法，以控制合成样品的纯度。
3
CN 101858892 ACN 101858893 A[0005]
说 明 书
2/3页
本发明采用硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)为固定相的手性柱进行检测，纤维素酯类结构中的空穴和通道与异构体选择性的形成了异构体包合物，从而达到分离。
[0006] 流动相对实验结果中盐酸兰地洛尔A异构体、盐酸兰地洛尔B异构体及盐酸兰地洛尔C异构体分离度及峰形均有很大影响，经发明人实验摸索，确定以正己烷-异丙醇-二乙胺(70～90∶10～30∶0.02～0.5，优选为75～85∶15～25∶0.05～0.2，更优选为80∶20∶0.1)为流动相效果很好。其中加入二乙胺可以改善峰形。[0007] 溶剂的选择与盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A、B、C异构体分离度有关。经实验确定采用正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇作为溶解用溶剂，优选以异丙醇∶甲醇(50∶50)为溶剂。
[0008] 本发明提供的通过高效液相色谱法检测盐酸兰地洛尔A、B、C异构体的方法的具体条件如下：
[0009] 1.色谱条件：色谱柱采用硅胶表面涂敷有纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺(70～90∶10～30∶0.02～0.5，优选为75～85∶15～25∶0.05～0.2，更优选为80∶20∶0.1)；检测波长为200nm～240nm(优选为210nm～230nm，更优选为约220nm)；柱温为20～40℃(优选为30～40℃，更优选为35℃)；流动相流速为0.5～2.0ml/min(优选为0.8～1.2ml/min，更优选为约1.0ml/min)。
[0010] 2.样品溶液的配置：采用有机溶剂(优选选自正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇，更优选为异丙醇∶甲醇(50∶50))，将样品配制为含盐酸兰地洛尔0.5～5.0mg/ml的溶液(优选1～3mg/ml，更优选为2mg/ml)的溶液。[0011] 3.测定：将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，并进行分析。[0012] 采用此色谱条件测定盐酸兰地洛尔中盐酸兰地洛尔A异构体、盐酸兰地洛尔B异构体及盐酸兰地洛尔C异构体分离度可达1.5～3.9，符合中国药典要求。此色谱条件同时可用于盐酸兰地洛尔光学异构体的定量。附图说明
图1：按照实施例1的条件分离盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A异构体、盐酸兰地
洛尔B异构体及盐酸兰地洛尔C异构体的高效液相色谱图。(1)号峰为盐酸兰地洛尔B异构体，(2)号峰为盐酸兰地洛尔A异构体，(3)号峰为盐酸兰地洛尔C异构体，(4)号峰为盐酸兰地洛尔
[0014] 图2：按照实施例2的条件分离盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A异构体、盐酸兰地洛尔B异构体及盐酸兰地洛尔C异构体的高效液相色谱图。(1)号峰为盐酸兰地洛尔B异构体，(2)号峰为盐酸兰地洛尔A异构体，(3)号峰为盐酸兰地洛尔C异构体，(4)号峰为盐酸兰地洛尔
[0013]
具体实施方式
[0015] 实施例1.[0016] 仪器：SHIMADZU LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，OV-100柱温
4
CN 101858892 ACN 101858893 A
说 明 书
3/3页
箱；
色谱柱：Daicel Chralcel OJ-H色谱柱(0.46×25cm，5μm)；[0018] 流动相：正己烷-异丙醇-二乙胺(80∶20∶0.1)[0019] 柱温：35℃[0020] 流速：1.0ml/min
[0017]
检测波长：220nm。[0022] 定位溶液1的配制：精密称取盐酸兰地尔A异构体适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0023] 定位溶液2的配制：精密称取盐酸兰地尔B异构体适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0024] 定位溶液3的配制：精密称取盐酸兰地尔C异构体适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0025] 样品溶液的配制：精密称取盐酸兰地尔适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0026] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、定位溶液3和样品溶液各20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，谱图见图1。盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A、B、C异构体分离度为1.5-2.9。
[0027] 实施例2.[0028] 仪器：SHIMADZU LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，OV-100柱温箱；
[0029] 色谱柱：AE.Lichrom OJ-H色谱柱(0.46×25cm，5μm)；[0030] 流动相：正己烷-异丙醇-二乙胺(82∶18∶0.1)[0031] 柱温：35℃[0032] 流速：1.0ml/min[0033] 检测波长：220nm。[0034] 定位溶液1的配制：精密称取盐酸兰地尔A异构体适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0035] 定位溶液2的配制：精密称取盐酸兰地尔B异构体适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；
[0021]
定位溶液3的配制：精密称取盐酸兰地尔C异构体适量，用异丙醇-甲醇
(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0037] 样品溶液的配制：精密称取盐酸兰地尔适量，用异丙醇-甲醇(50∶50)溶解并稀释成2mg/ml；[0038] 测定：各取定位溶液1、定位溶液2、定位溶液3和样品溶液各20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，谱图见图2。盐酸兰地洛尔、盐酸兰地洛尔A、B、C异构体分离度为1.5-3.9。
[0036]
5
CN 101858892 ACN 101858893 A
说 明 书 附 图
1/1页
图1
图2
6
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容