・ ５８６ ・ 国际检验医学杂志２０１２年３月第３３卷第５期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．５ ［２］曾棉林，刘诗君，陈玉风，等．体外震波碎石采用尿液分析指导临 床治疗及预防术后复发［Ｊ］．中国现代医生，２０１０，２８（２）：１５卜１５２． 显微镜检用于病理管型检查的价值［Ｊ］．中国医疗前沿，２０１０，５ （２１）：６９－７０． ［３１齐杰，潘健，韩江，等．尿流式有形成分及干化学分析在尿路感染 诊断中的应用评价［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００９，３２（６）：６３０—６３４． ［９］姜傥，张式鸿，胡伟，等．一种新型尿液检测模式的探讨及其软件 研究［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００６，２９（７）：６０８—６ｌ１． ［ｉｏ３马骏龙，丛玉隆，陆玉静，等．尿干化学与流式细胞术联合用于尿 液有形成分镜检筛选的研究与应用［Ｊ］．中华检验医学杂志， ２０１１，３４（６）：４９４—５００． ［４］叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程［Ｍ］．３版．南京： 东南大学出版社，２００６：２７５—２７６． Ｅ５］张娟安，王昌富，彭长华，等．尿液整体化分析中镜检复查规则的 建立与评估［Ｊ］．国际检验医学杂志，２Ｏｌ１，３２（３）：３２４－３２６． ［６］于海涛。李伟，杨丽华，等．全自动尿沉渣分析仪检测结果的比较 分析［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１１，３２（１０）：１１ｉ３－１１１４． ｒ１１］Ｍａｎｏｎｉ Ｆ，Ｆｏｒｎａｓｉｅｒｏ Ｌ，Ｅｒｃｏｌｉｎ Ｍ。ｅｔ ａ１．Ｃｕｔｏｆｆ ｖａｌｕｅｓ ｆｏｒ ｂａｃｔｅ— ｒｉａ ａｎｄ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ ｆｏｒ ｕｒｉｎｅ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ Ｓｙｓｍｅｘ ＵＦ １０００ｉ ｉｎ ｕｒｉｎａｒｙ ｔｒａｃｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｄｉａｇｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，２００９，６５ （１）：１０３—１０７． ［７］顾文刚，陈激扬．尿干化学法与沉渣镜检联合检测尿红细胞及白 细胞的临床意义［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１１，３２（１０）：１１２７ １１２８． （收稿日期：２０１１－１２－Ｏ１） ［８］邵永珍，孙雅娴，邹艳玲．ＵＦ一１０００ｉ尿沉渣分析仪、尿干化学法和 ・检验技术与方法・ 两种方法检测肺炎支原体感染的比较 樊 茂，张倩 ６５００３４） （云南省昆明市儿童医院检验科摘 要：目的 比较间接免疫荧光法（ＩＦＡ）与实时荧光聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）诊断肺炎支原体（ＭＰ）感染的阳性率。方法 选取呼吸道感染患儿１ ８４６例，根据年龄将患儿分为（０～１）、（＜１～３）、（＜３～６）及大于６岁组，采用ＩＦＡ检测血清标本ＭＰ ＩｇＭ，ＲＴ—ＰＣＲ检测呼吸道分泌物ＭＰ ＤＮＡ，比较２种检测方法诊断ＭＰ感染阳性率的差异。结果 ＩＦＡ检测ＭＰ ＩｇＭ阳性率为 １２．６２ ，各年龄组阳性率分别为７．８ 、１４．４ 、１６．７ 、３２．１ ，部分组间阳性率差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＲＴ—ＰＣＲ检测 ＭＰ ＤＮＡ总阳性率为１３．４ ，各年龄组阳性率为１Ｏ．２ 、９．１ 、１９．０ 、４１．０ ，部分组问阳性率差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 结论ＩＦＡ和ＲＴ—ＰＣＲ联合应用可提高ＭＰ早期检出率，指导临床合理治疗。 关键词：间接免疫荧光法； 聚合酶链反应； 支原体，肺炎 ＤｏＩ：ｌＯ．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３Ｏ．２Ｏ１２．Ｏ５．Ｏ３６ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ６７３—４１３Ｏ（２Ｏ１２）０５—０５８６—０２ 肺炎支原体（ＭＰ）是急性呼吸道感染常见病原体之一，也 是儿童肺炎的常见病原体。本资料采用间接荧光免疫法 两比较，差异均有统计学意义均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。 ２．２ ＭＰ ＩｇＭ和ＭＰ ＤＮＡ检测阳性率比较ＭＰ ＩｇＭ和ＭＰ （ＩＦＡ）和实时荧光聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）分别检测呼吸道感 染患儿ＭＰ—ＩｇＭ和ＤＮＡ，对二者在不同年龄段患儿中的检测 结果进行对比分析，探讨早期、有效的ＭＰ感染诊断方法。 １资料与方法 １．１ 一般资料本院２０１０年５月至２０１１年５月收治的呼吸 ＤＮＡ检测阳性率比较差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５），见表２。 表１ 不同年龄段患儿ＭＰ ＩｇＭ和 ＭＰ ＤＮＡ阳性率比较［ （ｎ／ｎ）］ 道感染患儿１ ８４６例，年龄１月至１４岁。 １．２ 仪器与试剂ＰＥ５７００型ＲＴ－ＰＣＲ仪购自美国ＡＢＩ公 司，ＭＰ ＤＮＡ检测试剂盒购自中山医科大学达安基因诊断中 心，ＢＸ６０型荧光显微镜购自日本０ＬＹＭＰｕｓ公司，血清ＭＰ— ＩｇＭ ＩＦＡ检测试剂购自西班牙ＶＩＣＥＬＬ公司。 １．３方法采集所有受试者静脉全血，常规分离血清后进行 表２ ＭＰ ＩｇＭ和ＭＰ ＤＮＡ检测阳性率比较 ＭＰ—ＩｇＭ检测；同时以灭菌棉签采集受试者咽部样本进行ＭＰ ＤＮＡ检测。 １．４统计学处理 采用ＳＰＳＳ１０．０软件进行统计学分析；计 数资料的比较采用ｘ 检验，统计学检验水准为ａ一０．０５。 ２结 果 ２．１ 不同年龄段患儿阳性率比较不同年龄段患儿阳性率比 ３讨 论 较见表１；其中，（＜１～３）岁组与大于６岁ＭＰ ＩｇＭ阳性率比 较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），其余各组两两比较，差异均 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。（ｏ～１）岁组与（＜１～３）岁组ＭＰ ＭＰ是呼吸道感染常见病原体，ＭＰ感染可占呼吸道感染 的２３．３ ，且呈逐年增多趋势 。ＭＰ主要通过呼吸道飞沫传 播，是小儿急性下呼吸道感染的常见病原体，学龄儿童及婴幼儿 ＤＮＡ阳性率比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。其余各组两 国际检验医学杂志２０１２年３月第３３卷第５期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．５ ・ ５８７ ・ 普遍易感 ］。由于ＭＰ无细胞壁，作用于细胞壁的抗菌药物对 其无杀伤作用，故ＭＰ感染的治疗与其他细菌和病毒感染的治 疗方案不同。因此，及时、有效的ＭＰ感染实验室诊断十分重 点ＥＪ］．实用儿科临床杂志，２００３，１８（８）：６１８－６１９． ［２］杨春．儿童肺炎支原体检测方法和感染状况的分析［Ｊ］．中外医学 研究，２０Ｉ１，９（２７）：５５ ５６． 要，可为临床早诊断、早治疗提供帮助，减少并发症的发生 ］。 ＭＰ感染实验室诊断方法大致分为ＭＰ分离培养、ＭＰ ＩｇＭ检测及ＭＰ ＤＮＡ检测等＿７ 。ＭＰ分离培养虽然是最可靠 ［３］廖春盛，戴小波，刘建军．呼吸道感染患者肺炎支原体检测的临床 意义［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１１，３２（１３）：１４７４—１４７５，１４７７． Ｅ４］庞艳，韩卫全．武汉地区儿童肺炎支原体感染流行病学调查ＥＪ］． 浙江临床医学，２０１１，１３（９）：１０５９—１０６０． 的确诊依据，但存在临床标本中病原体含量少、呼吸道污染的 杂菌较多、耗时及阳性率低等缺点，不能用于ｌ临床快速诊断。 本研究采用ＩＦＡ和ＲＴ ＰｃＲ检测１ ８４６例患儿痰液标本和血 清标本，并根据年龄进行比较，结果显示（＜１～３）岁组患儿 ［５］黄磕，郭柳薇，叶满．梧州市９１６例下呼吸道感染儿童肺炎支原体 感染临床分析［Ｊ］．重庆医学，２００９，３８（２０）：２６１５ ２６１６． Ｅ６］郭素华，罗先琼，王波，等．ＰＡ实验与实时ＰＣＲ检测肺炎支原体 感染的对比研究［Ｊ］．中山大学学报：医学科学版，２００８，２９（３）：８３— ８５． ＭＰ ＩｇＭ阳性率高于其他组，而部分组间ＭＰ ＤＮＡ阳性率差 异有统计学意义，说明不同年龄段患儿ＭＰ ＩｇＭ的产生可能不 ［７３孙炜，赵勇．四种抗肺炎支原体抗体检测方法应用比较［Ｊ］．医学 检验与临床，２００７，１ ８（５）：３４—３５． 同；血清学检测存在年龄阶段差异，而分子生物学方法检测则 受年龄的影响小ｌ８］。 本研究中，ＭＰ ＤＮＡ阳性率为１３．４３ ，高于ＭＰ ＩｇＭ阳 ［８］方红，杨雪香，陈冬莲．不同年龄段儿童呼吸道感染肺炎支原体 ＩＧＭ与ＤＮＡ的相关性研究口］．中华医院感染学杂志，２００７，１７ （８）：１０２４ １０２５． 性率（Ｐ＜ｏ．０５），与国内报道一致 。ＭＰ ＩｇＭ阳性率低可能 与ＭＰ感染者早期血清中ＩｇＭ水平较低，且存在时间较短，受 年龄、时间、Ｂ细胞功能及检测灵敏度等因素影响有关，而ＲＴ— Ｅｇ］钟天鹰．荧光定量ＰＣＲ法检测呼吸系统感染儿童肺炎支原体 ＤＮＡ的分析［Ｊ］．临床儿科杂志，２００２，２０（３）：１３７—１３９． ［１ｏ］Ｂｅｅｒｓｍａ ＭＦ，Ｄｉｒｖｅｎ Ｋ，ｖａｎ Ｄａｍ ＡＰ，ｅｔ ａ１．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ １２ ｃｏｒｎ— ｍｅｒｃｉａｌ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｆｉｘａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ（ＩＧＧ）ａｎｄ ＩＧＭ ａｎｔｉｂｏｄｉｓ， ＰＣＲ检测速度更快，且不受病程的影响，在疾病的早期即可检 出。因此，对高度怀疑ＭＰ早期感染的患者可选择ＲＴ ＰＣＲ 进行诊断筛选。Ｂｅｅｒｓｍａ等 也认为ＩＦＡ联合ＰＣＲ检测可 提高ＭＰ感染诊断阳性率，有效避免漏诊。 参考文献 ［１３徐桂芳，费德琼，李敏．儿童呼吸道支原体的发展趋势及其临床特 ・ｗｉｔｈ ＰＣＲ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ“ｇｏｌｄ ｓｔａｎｄａｒｄ”［刀．Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ。２００５， ４３（５）：２２７７—２２８５． （收稿日期：２０１卜１２—０９） 检验技术与方法・ 噬菌体生物扩增法在白带标本结核分枝杆菌检测中的应用价值 钟金成 （广东省增城市新塘医院检验科５１１３４０） 摘 要：目的 探讨噬菌体生物扩增法在检测白带标本结核分枝杆菌中的应用价值。方法 应用噬菌体生物扩增法检测３０ 例女性生殖器结核疑似患者白带标本，以改良罗氏培养法为对照，评价噬茵体生物扩增法检测白带标本中结核分枝杆菌的应用价 值。结果 ３Ｏ例白带标本中，噬茵体生物扩增法检测阳性率为２ｏ．ＯＯ （６／３０），改良罗氏培养法阳性率为１ ３．３３ （４／３０），２种方 法检测结果阳性符合率为７５．Ｏ０ （３／４），阴性符合率为８８．４６ （２３／２６）；总符合率为８６．６７ （２６／３０）。２种方法检测结果比较 差异无统计学意义（ｘ 一０．２５，Ｐ＞Ｏ．０５）。结论 噬菌体生物扩增法检测白带标本中的结核分枝杆菌具有较高的特异度和准确 度，适于临床推广应用。 关键词：噬菌体； 分枝杆菌，结核； 白带 ＤＯＩ：ｌ０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３ ４１３０．２０１２．０５．０３７ 文献标识码：Ａ 文章编号：ｌ６７３—４１３０（２０１２）０５—０５８７—０２ 近年来，随着肺结核发病率不断上升，女性生殖器结核发 病率也在逐渐升高 ｊ。由于多数女性生殖器结核患者缺乏明 显临床症状和阳性体征，因而辅助检查对于该病的诊断极为重 要，尤其是以白带标本检测查找病原体 ］。遗憾的是，目前常 １资料与方法 １．１ 一般资料 本院收治的女性生殖器结核疑似患者３ｏ例， 年龄２２￣４６岁，平均２７岁。由临床医生用棉拭子通过无菌操 作采集患者子宫颈内侧壁上１／３处分泌物，立即送检。 １．２方法 噬菌体生物扩增法检测采用上海金浩公司结核分 枝杆菌噬菌体裂解法检测试剂盒（ＦＡＳＴＰＩａｑｕｅＴＢＴＭ），严格 按试剂盒说明书进行操作。每次检测临床标本的同时设阴性 对照和阳性对照。结果判读标准：平板上菌斑数为Ｏ～１９个时 判为阴性；菌斑数超过１９个或更多，甚至全部融合时判为阳 用结核分枝杆菌检测方法都存在不足。传统的涂片和培养法 虽然特异性很好，但涂片法敏感性较低，培养法则耗时较长；分 子生物学方法有着较好的敏感性，但由于需要特殊的仪器和昂 贵的试剂也难以得到广泛应用 。噬菌体生物扩增法是一种 新的结核分枝杆菌快速检测方法，在痰标本的检测中显示了很 好的方法学特性Ｉ・ 。本研究拟将该方法用于白带标本的检 性。对照检测方法为改良罗氏法培养，质控菌株为Ｈ３７Ｒｖ标 准株（ＡＴＣＣ２７２９４）。 测，并对其应用价值进行初步评价。