微生物工程---2--生产菌种的来源

微生物工程---2--生产菌种的来源

• 微生物工程的工业生产三个要素：生产菌种的性能 发酵及提纯工艺条件

生产设备 其中优良的菌种是最重要的

• 一般菌种分离纯化和筛选步骤如下：

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标本采集 标本材料的预处理 富集培养 菌种初筛 菌种复筛性能鉴

定 菌种保藏。

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标本的预处理 (提高分离效率)

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(1)采用热处理方法减少材料中的细菌数

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(2)采用膜过滤和离心的方法浓缩水中的细胞

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(3)采用化学方法

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(4)诱饵法：将固体基质（如蛇皮、花粉）等加到待检的土壤或水

中，待其菌落长出后再铺平板分离。

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(5)空气搅拌法 在空气中搅拌，收集孢子沉淀，

• 菌种分离方法

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施加选择性压力分离法 利用不同种类的微生物对环境和营养要求的不

同，人为控制这些条件，使之利于某类或某种微生物的生长，而不利于其他种类微生物的生存，以达到使目的菌种占优势，而得以快速分离纯化的目的。分离培养基的效率取决于其养分，p H和加入的选择性抑制剂等

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固体培养方法：固体培养基常用于分离某些酶产生菌，其选择培

养基中常含有所需酶的基质，以便促进酶产生菌的生长。如蛋白酶、脂肪酶、果胶酶等。

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液体培养方法：摇瓶培养（分批式富集培养）连续培养（恒化式

富集培养）

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富集培养：又称增殖培养，就是利用不同微生物生长对环境和培

养基的特殊要求，设计选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适环境中大量繁殖，由原来自然条件下的劣势种变为人工环境下的优势种，以利于分离。

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摇瓶培养（分批式富集培养）：是指将富集培养物转接到新的同

一种培养基中，重新建立选择性压力，如此反复转种几次后，再取此富集培养物接种到固体培养基上，以获得单菌落。转种的时间是关键，应在所需菌种占优势的情况下移种。

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连续培养（恒化式富集培养）：通过改变性基质的浓度来控

制两类不同菌株的比生长速率。

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随机分离方法 有些微生物的产物对产生菌的筛选没有任何选择性好

处，因此，常采用随机的方法分离所需菌种。