维普资讯 http://www.cqvip.com ・１Ｏ・ 湖北中医杂志 ２００７年第２９卷第７期 肝脉柔合剂对大鼠慢性肝损伤的影响 刘志芬 ，王广丽 ， ，胡锡元 （１．武汉市第七医院，湖北武汉摘４３００７１；２．武汉市中医院，湖北武汉４３００１４） 要：目的：研究肝脉柔合剂对慢性化学性肝损伤的防护作用，探讨作用机理。方法：采用ＣＣｌ 复合因素致 大鼠慢性肝损伤模型，观察试验药物对模型动物血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＰ、ＡＬＢ及ＨＡ、ＰＣ－Ⅲ、ＬＮ、ｌｖ＿Ｃ值的影响。结 果：肝脉柔合剂能显著抑制ＣＣｌ４所致的大鼠慢性肝损伤，抑制肝纤维化形成，降低血清ＡＬＴ、ＡＳＴ值，降低血清 ＨＡ、Ｃ－Ⅲ、ＬＮ、ＩＰｖ＿Ｃ值（Ｐ＜０．０５）。结论：肝脉柔合荆具有抗慢性肝损伤，抗肝纤维化，保肝降酶的作用。 关键词：肝脉柔合剂；ＣＣ１，；慢性肝损伤；肝纤维化；实验研究 中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－－０７０４（２００７）０７－－００１０－－０２ 肝脉柔合剂是我院数十年临床实践总结的临床经验方， 采用现代中药制备工艺研制，用于治疗慢性病毒性肝炎肝纤 购自北京市海淀区微生物培养基制品厂）；丙氨酸氨基转移 酶（ＡＬＴ），天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ），总蛋白（１１）），自 维化疗效较好。为了进一步研究其作用机理，我们进行了该 药对大鼠慢性肝损伤影响的实验研究，现将结果报告如下。 １材料与方法 １．１动物 蛋白（ ６ ）（均购自广州标佳科技有限公司）；透明质酸定 量酶联检测试剂盒（ＨＡ），Ⅲ型前胶原定量酶联检测试剂 盒（ＰＣ－Ⅲ），层粘蛋白定量酶联检测试剂盒（ＬＮ），Ⅳ型胶原 定量酶联检测试剂盒（ＩＶ－Ｃ）（均购自上海森雄科技实业有 ＳＤ大鼠７０只（武汉大学医学院实验动物学部提供），体 重１８０￣２２０ｇ，雌雄各半。 １．２药物 限公司）；其余试剂均为ＡＲ级国产或进口试剂。 １．４造模及给药方法 ］ 取大鼠１０只（雌雄各半），常规喂养，作为正常对照组， 肝脉柔合剂（由黄芪、当归、白芍、丹参、莪术、浙贝母、牡 其余６０只造模，并给药。造模方法：皮下注射４０ ｃｃｈ植 物油溶液０．４５ｍｌ／１００ｇ体重，以后间隔３～４ｄ，续以０．４０ｍｌ／ １００ｇ体重，２次；然后为０．３５ｍｌ／１００ｇ体重，３次；再以 ０．３０ｍｌ／１００ｇ体重，３次。总共注射９次。造模同时饮以 １０ 乙醇水，饲以含０．５ 胆固醇的纯玉米饲料。分组给药 方法：大鼠随机分为４组，每组１５只，分别灌胃给药（２ｎ￣／ 蛎、鳖甲、白花蛇舌草等药物组成，药物浓度：２ｇ／ｍｌ，武汉市 第七医院制剂室制备，批号；２００３０６０１）；秋水仙碱（购自云南 植物药业有限公司，批号：２００３０９０１）。 １．３试剂 四氯化碳（ＣＣ１，，购自广东西陇化工厂）；胆固醇（ＢＲ， 素的作用，且持续时间长。牛膝对子宫的兴奋作用有实验研 究提示可能是通过牛膝总甙促进前列腺素释放实现的，有明 与结缔组织细胞中ＩＧＦ－Ｉ，ＩＧＦ－ＩｍＲＮＡ均呈阳性表达。说 明其具有促宫颈成熟的作用，达到催生下胎的治疗效果，与 西药催产素作用相当。 参考文献： ［１－Ｉ马宝璋．中医妇科学［Ｍ］．第六版．上海：上海科学技术出版社， ２０００．２９５． 显兴奋子宫平滑肌的作用Ｅ３３，有类雌激素作用。枳壳具有兴 奋子宫平滑肌及兴奋胃肠作用，增强胃肠蠕动，进而作用于 子宫，从而达到催生之目的。 ＩＧＦ－Ｉ是生长调节素的一种，它能刺激和调节血管平滑 肌细胞的增殖。实验表明［４］增殖的平滑肌细胞可能是 ＩＧＦ－ＩｍＲＮＡ表达的主要靶细胞，在各种转基因动物实验中 ［２］徐淑云．药理实验方法学［＾幻．北京：人民卫生出版社，１９８２．１６０． ［３３朱和，车端平．牛膝总皂甙对大鼠离体子宫兴奋作用机理研究 未观察到ＩＧＦ－Ｉ对整个机体生长作用。但在局部组织过量 表达ＩＧＦ－Ｉ的转基因动物中，ＩＧＦ－Ｉ特异性促进组织生长的 口］．中国药理通报，１９８８，４（４）：２４１—２４３． ［４３刘芳，俞茂华．ＩＧＦ－Ｉ的免疫调节作用［３３．国外医学・内分泌 学分册，１９８８，１８（１）：１０－１１． 作用却很明显，如ＩＧＦ＿Ｉ可能促进皮肤、阑尾、结肠、子宫、胸 腺、肾、脾、宰丸及肾上腺等多种组织的生长［５］。 现代研究表明［６］：结缔组织中性缴素的作用与生长因子 及生化组织之间可能的相互关系是ＩＧＦ－Ｉ对细胞增殖与凋 亡具有双相调节作用。近年来研究表明［７］：ＩＧＦ－Ｉ可通过调 ［５３陈照丽．ＩＧＦ系统的生物学功能及其肿瘤的关系［３３．国外医学 ・分子生物学分册，２００３，２５（１）：３４—３７． ［６］徐伟文，吴岚．ＩＧＦ－Ｉ的临床应用前景［３３．国外医学・内分泌 分册，１９９９，１９（６）：２７０－２７２． ［７］李尚为，潭字建，黄仲英，等．ＩＧＦ－Ｉ和ＩＧＦ－Ｉ受体在早孕期大鼠 节子宫内膜与蜕膜化及胚胎滋养层细胞增殖分化来促进宫 颈成熟。 子宫中表达及意义［３３．生殖与避孕，２００２，２２（３）：１４４—１４７． （收稿日期：２００７—０４—２６编辑：林飞） 本研究显示，应用丹枳助生汤的大鼠宫颈上皮组织细胞 维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年第２９卷第７期 湖北中医杂志 １．６统计学方法 ・ １１ ・ １００ｇ体重）。其中肝脉柔合剂高、低剂量组，分别给予４Ｏ、 ２０ｇ／ｋｇ，秋水仙碱组，给予混悬液３０ｍｇ／ｋｇ；模型组，给予等 体积生理盐水，均每天１次，连续４２ｄ。 １．５指标检测方法 组间比较采用ｔ检验。 ２结果 ２．１一般情况 末次给药后１ｈ，断头处死大鼠取全血，分离血清，自动 ＣＣｈ慢性染毒后，大鼠先后出现活动减少、精神萎靡、 皮毛松乱、进食减少，重者衰竭死亡。 ２．２各组大鼠生化指标的比较（见表１） 生化分析仪测定ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＰ、ＡＬＢ值，酶联免疫测定仪 测定ＨＡ、ＰＣ－ＩＩＸ、ＬＮ、ＩＶ４３值。 表１各组大鼠生化指标的比较（ 士 ） 正常对照组 １０ １３７．５３士２８．６３ １０５．９４士１９．５３ １０２，５１士１６．Ｏ６ ９８．７２士１５．３６ 模型组肝脉柔合剂低剂量组肝脉柔合剂高剂量组秋水仙碱组８ ８ ８ ８ ２８６．１７士５３．９１＃＃ ２１３．８５士６５．７８’ ２０２．４７士６１．３３— ２００．７４士５８．４９— ２１７．３５士３８．３９＃＃ １７５．８４士４Ｏ．２６ １５８．６３士３９．４７～ １４５．１６士３９．５４～ ２１５．７７士３５．５８＃＃ １７６．３４士３７．２９。 １５９．８４士３９．１６— １５２．７８士３６．７５— ２０５．４１士３３．２８＃＃ １６８．１７士３１．３１ １５５．３９士３５．３６一 １４９．７４士３５．１５— ３讨论 ＣＣｋ是目前复制实验性肝损伤模型的常用化学药品， 其损伤机制为ＣＣｌ４进入机体，在肝内活化生成自由基（・ ＣＣｈ和・ＯＯＣ￣ｈ），后者可直接损伤质膜，并启动膜脂质过 能清除氧自由基，调节免疫功能［引。当归能促进微循环，保 护肝细胞，恢复肝功能［８３。提示肝脉柔合剂治疗慢性肝炎肝 纤维化的作用机理，可能与药物促进肝组织的微循环，控制 肝细胞炎症反应，改善肝功能，调节肝内代谢，清除氧自由 氧化，使膜稳定性降低，造成肝细胞变性、坏死，大量的肝细 胞坏死，组织结构破坏，从而导致肝纤维化，最终发展为肝硬 变［３ 。因此，加快肝脏微循环代谢，及时清除氧自由基，是 促进慢性肝损伤恢复，阻止病情发展的重要措施。 本研究应用ＣＣｌ４复合因素制成大鼠慢性肝损伤模型， 检测血清ＡＬＴ、ＡＳＴ值，血清ＨＡ、ＰＣ＿Ⅲ、ＩＶ－ｃ、ＬＮ含量均 基，调节免疫功能，减少细胞外基质的生成与沉积，促进已形 成的纤维再吸收及促进纤维蛋白降解等作用有关。其深入 的药理学作用，有待进一步的研究发现。 参考文献： ［１］陈奇．中药药理实验Ｉ－Ｍ］．北京：北京人民卫生出版社，１９９４． １９． 有不同程度的升高；血清ＴＰ、 ＬＢ、Ａ／Ｇ明显降低，反映动 物染毒后肝脏呈慢性严重损伤，肝纤维化病理改变形成。肝 脉柔合剂能显著降低模型动物血清ＡＬＴ、ＡＳＴ值（Ｐ＜ ［２］李仪奎．中药药理实验方法学［Ｍ］．上海：上海科学技术出版 社，１９９１．２２７． ［３］汤宁・四氯化碳的肝脏毒性机理综述［Ｊ］・卫生研究，１９８６，５ ０．０５），显著降低血清ＨＡ、Ｐｃ－ｌＵ、ＬＮ、ＩＶ４３值（Ｐ＜０．０５，Ｐ ＜０．０１）。表明对ＯＣｌ４复合因素致动物慢性肝损伤具有较 ，（３）： ２・ ［ ］徐萍・常用肝损伤动物模型［Ｊ］・中国病理生理杂志’ 。。 ，¨ ［５］ 中毒性 ，的吸收或排泄并能抑制肝纤维化形成，促进肝内代谢产物 。 ￣ － －ｒ－ 玉芳，盂宪明，等．抗氧化剂丹参对慢性肝病患者及 疗 察 ． 消 志 ， １９～一……９２，１７８７． （２）：肝脉柔合剂由黄芪、当归、白芍、丹参、莪术、浙贝母、牡 蛎、鳖甲、白花蛇舌草等药物制成，具有益气养血、消痰化瘀， 软坚散结之功效。药理研究证实，丹参可减轻肝细胞的变 性、坏死，抑制胶原纤维增生及假小叶形成，有效防止肝纤维 化的发生及发展［ ；能明显较少动物肝脏胶原蛋白含量，尿 羟脯氨酸排出量增多，促进已形成的纤维再吸收及促进纤维 蛋白的降解 ６ ；能改善肝脏微循环，清除氧自由基 。白芍［６］薛惠敏胡义杨，顾宏图，等．丹参抗ＣＣｌ 及ＤＭＮ诱导的大鼠 肝纤维化的研究［刀中西医结合肝病杂志，１９９９，９（４）：１６． ．［７］扬卫东，朱鸿良，赵宝路，等丹参的氧自由基清除作用［Ｊ］．中 国药理学通报，１９９０，６：ｌ１８．． ［８］王本祥．现代中药药理学［Ｍ］．天津：天津科学技术出版社， １９９７．５８８，１３１３． （Ｓｔ稿日期：２００７－－０１－－３１编辑：林飞）
