维生素 C检验操作规程

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SOP-QC-2005-01 维生素C检验操作规程 质量部 制定日期 批准日期 执行日期 审 核 颁发部门 取 代 GMP办公室 审核日期 颁发日期 共 印 共 5 页 4份 质量部、生产部、物流部 1 感官要求

取10g被测样品，置于洁净的白瓷盘中，用肉眼在自然光线下观察其色泽、组织形态、杂质，品尝其滋味，嗅其气味。 2一般规定

本标准所用试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和 GB/T 6682—2008中规定的三级水。

试验方法中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按 GB/T 601、GB/T 603之规定制备。 3 鉴别试验 3 鉴别 3.1 试剂和材料 3.1.1 活性炭。 3.1.2 吡咯。

3.1.3 银溶液：17.5 g/L。 3.1.4 三氯乙酸溶液：50 g/L。 3.2 鉴别试验

3.2.1 银反应试验 3.2.1.1 方法原理

维生素 C分子中有二烯醇基，具强还原性，可被银氧化为去氢抗坏血酸，同时产生黑色银沉淀。

3.2.1.2 分析步骤

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称取约0.1 g实验室样品，精确至 0.01 g，溶于 5 mL水中，加 0.5 mL银溶液，即生成银的黑色沉淀。 3.2.2 糖类性质反应试验 3.2.2.1 方法原理

维生素 C具有糖类性质的反应，可在三氯乙酸或盐酸存在下水解、脱羧、生成戊糖，再失水，转变为糖醛，加入吡咯，加热至 50℃即发生蓝色。 3.2.2.2 分析步骤

称取约0.015 g实验室样品，溶于 15 mL三氯乙酸溶液中，加 200 mg活性炭，猛烈振摇 1min，反复过滤至澄清，在5 mL滤液中加 1 mL吡咯，振摇使溶解后，加热至50℃即发生蓝色。 3.2.2.3 红外光吸收谱鉴别

采用溴化钾压片法，按照 GB/T 6040进行试验，实验室样品的红外光谱应与对照的图谱一致（对GB 147—2010照图谱见附录B）。 4 维生素C的测定 4.1 方法提要

维生素 C具有较强的还原性，可被碘定量氧化。以淀粉为指示剂，用碘标准滴定液滴定样品水溶液，根据碘标准滴定液的用量，计算以 C6H8O6计的维生素 C含量。 4.2 试剂和材料

4.2.1 硫酸溶液： 57→1000。

4.2.2 碘标准滴定溶液：c(I2)＝ 0.05 mol/L。 4.2.3 淀粉指示液：10 g/L。 4.3 分析步骤

称取约 0.2 g实验室样品，精确至 0.000 2 g，置于 250 mL碘容量瓶中，加 20 mL无二氧化碳的水及 25 mL硫酸溶液使溶解，立即用碘标准滴定溶液滴定，近终点时，加 1 mL淀粉指示液，滴至溶液显蓝色，保持 30s不褪色为终点。 同时做空白试验，除不加试样外，其他步骤与样品测定相同。 4.4 结果计算

维生素C（以C6H8O6计）的质量分数 w1，数值以%表示，按式计算：

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W1式中：

V——实验室样品消耗碘标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)； V0——空白试验消耗碘标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫升（ mL）； c——碘标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L）； M——维生素 C摩尔质量的数值，单位为克每摩尔（g/mol）（M=176.12）； m——实验室样品质量的数值，单位为克（g）；

取平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于0.3%。

5 比旋光度的测定 5.1 分析步骤

称取约 5 g实验室样品，精确至 0.000 2 g，置于 50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。其他按 GB/T 613-2007规定的方法进行。 5.2 结果计算

比旋光度аm(20℃,D)按式(A.2)计算： αm(20℃,D)= 式中： 式中：

α—— 测得的旋光角,单位为度(°)； l —— 旋光管的长度,单位为分米(dm)；

ρα—— 溶液中有效组分的质量浓度,单位为克每毫升(g/mL)。 6 灼烧残渣的测定 6.1 试剂和材料 硫酸。 6.2 分析步骤

称取约 1 g实验室样品，精确至 0.000 2 g，置于已在 700℃～800℃灼烧至恒重的坩埚中，先用小火缓缓加热至完全碳化，冷却至室温后,加硫酸 0.5 mL～1 mL使其湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后移入高温炉中,在 700℃～800℃

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(VV0)cM100%

m1000  中灼烧至恒重。 6.3 结果计算

灼烧残渣的质量分数w2，数值以%表示，按式计算

W2m1m2100% m式中：

M1—残渣和空坩埚质量的数值，单位为克（g ）； M2—空坩埚质量的数值，单位为克（g ）； m—实验室样品质量的数值，单位为克（g ）。

取平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于0.02%。 7 砷的测定

称取1.0 g±0.01 g实验室样品，加 10 mL水溶解作为试样液；量取 3 mL±0.025 mL（含砷3.0μg）砷（As）标准溶液制备限量标准。其他按GB/T 5009.76—2003砷斑法的规定进行。 8 重金属的测定 8.1 试剂和材料 8.1.1 。 8.1.2 甘油。 8.1.3 乙酸铵。 8.1.4 铅。 8.1.5 硫代乙酰胺。

8.1.6 盐酸溶液：c（HCl）=2 mol/L。 8.1.7 氨水溶液：c（NH3·H2O）=5 mol/L。 8.1.8 氢氧化钠溶液：c（NaOH）=1 mol/L。 8.1.9 盐酸溶液：c（HCl）=7 mol/L 8.1.10 乙酸盐缓冲液（pH3.5）：

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称取25 g乙酸铵，精确至0.01 g，加25 mL水溶解后，加38 mL 7 mol/L盐酸溶液，用2 mol/L盐酸溶液或5 mol/L氨水溶液准确调节pH至3.5（pH计），用水稀释至100 mL。 8.1.11 铅标准溶液：

称取0.160 g铅，精确至0.000 2g,置于1000 mL容量瓶中，加5 mL与50 mL水溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，移取 10 mL±0.02 mL贮备液，置于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每 1 mL相当于10 μg的Pb）。配置与贮存用的玻璃仪器均不得含铅。 8.1.12 硫代乙酰胺试液：

称取4 g硫代乙酰胺，精确至0.01 g，加水使溶解成100 mL，置冰箱中保存。临用前取5.0 mL混合液（由1 mol/L 15 mL氢氧化钠溶液、5.0 mL水及20 mL甘油组成），加上述1.0 mL硫代乙酰胺溶液，置水浴上加热20s，冷却，立即使用。 8.2 分析步骤

按《中华人民共和国药典》2005年版二部附录Ⅷ H 重金属检查法第一法进行。具体方法如下：

取25 mL纳氏比色管两支，甲管中加入1 mL±0.01 mL（含铅10.0μg）铅（ Pb）标准溶液与2 mL乙酸盐缓冲液后，加水稀释成25 mL；另称取1 g±0.01 g实验室样品，置于纳氏比色管乙管中，加15 mL水溶解，加2 mL乙酸盐缓冲液（ pH3.5），用水稀释成25 mL，若该溶液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2 mL，摇匀，放置2min，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。

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