・３０２６・ 检验医学与临床２Ｏ１５年１Ｏ月第１２卷第２０期Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１５，Ｖｏ１．１２，Ｎｏ．２０ ・论 著・ 两种方法联合检测梅毒螺旋体抗体的应用价值 刘 静，于静波，王玉红，赵汐浮，齐志丹，张明磊△（沈阳军区总医院检验科 １１Ｏ０１６） 【摘要】 目的探讨化学发光（ＣＬＩＡ）法与梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（ＴＰＰＡ）对梅毒螺旋体抗体检测 的应用价值。方法 采用ＣＬＩＡ法对患者血清进行梅毒螺旋体抗体检测，收集阳性血清标本４２５例，阴性血清标本 ９Ｏ例，用ＴＰＰＡ进行确认；根据测定Ｓ／ＣＯ值将标本分为４组，统计各组ＣＬＩＡ法与ＴＰＰＡ的符合率。结果 根据 ＣＬＩＡ法检测结果，将标本分为４组：Ａ组（Ｓ／ＣＯ＜１．２０， 一９０）；Ｂ组（ｓ／ｃｏ为ｌ＿２Ｏ～１Ｏ．ｏｏ， ＝１３９）；Ｃ组（Ｓ／ Ｃ０＞１Ｏ．。０～２Ｏ．８８，ｎ一１２４）；Ｄ组（ｓ／ｃＯ＞２０．８８， 一１６２）。Ａ～Ｄ组ＣＬＩＡ法与ＴＰＰＡ的检测符合率分别为 １００．０ 、６８．３ 、９２．７ 、１００．０ ，Ｂ组的检测符合率最低，与其他３组比较差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论 ＣＬＩＡ法检测梅毒具有敏感性高，自动化程度高，适合大批量标本常规筛查，ＣＬＩＡ法检测阳性结果需进一步做ＴＰ— ＰＡ进行确证。 【关键词】梅毒螺旋体抗体； 化学发光法； 梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—９４５５．２０１５．２０．０２１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—９４５５（２Ｏ１５）２０ ３０２６－０２ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｉｌｉｄｕｍ ａｎｔｉｂｏｄｙ ＬＩＵＪｉｎｇ，ｙＵ Ｊｉｎｇ—ｂｏ，ＷＡＮＧ Ｙｕ—ｈｏｎｇ，ＺＨＡＯ Ｘｉ—ｔｉｎｇ，Ｑ Ｚｈｉ—ｄａｎ，ＺＨＡＮＧ Ｍｉｎｇ—ｌｅｉ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｒｅｇｉｏｎ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ １１００１６，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ ｏｆ Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ ＣＬＩＡ ａｎｄ ＴＰＰＡ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＣＬＩＡ，ａｎｄ ａ ｔｏｔａ１ ｏｆ ４２５ ｐｏｓｉ— ｔｉｖｅ ｓａｍｐｌｅｓ ａｎｄ ９０ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ：ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｂｙ ＴＰＰＡ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｓ／ｃｏ ｖａｌｕｅｓ．ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＣＬＩＡ ａｎｄ ＴＰＰＡ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ＣＬＩＡ ｒｅｓｕｌｔｓ，ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ４ ｇｒｏｕｐｓ：ｇｒｏｕｐ Ａ（Ｓ／ ＣＯｄ１．２Ｏ， 一９０），ｇｒｏｕｐ Ｂ（ｓ／ｃｏ １．２Ｏ一１Ｏ．ｏ０，ｎ一１３９），ｇｒｏｕｐ Ｃ（Ｓ／ＣＯ＞１０．００—２Ｏ．８８， 一１２４），ｇｒｏｕｐ Ｄ（Ｓ／ ＣＯ：＞２０．８８， 一１６２）．Ｔｈｅ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ＣＬＩＡ ａｎｄ ＴＰＰＡ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ，Ｂ，Ｃ，ａｎｄ Ｄ ｗｅｒｅ １００．０ ，６８．３ ， ９２．７ ，ａｎｄ １００．０ ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＣＬＩＡ ｉｓ ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｍｅｔｈｏｄ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｏｕｔｉｎｅ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ａ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＣＬＩＡ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｂｙ ＴＰＰＡ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ａｎｔｉｂｏｄｙ； ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ；ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ ｇｅｌａｔｉｎ ｐａｒｔｉｃｌｅ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ 梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性传染性疾 病¨ｌ ］，具有较强的传染性，病程长，主要经过性传播和母婴传 播。近年来，梅毒的发病率呈上升的趋势＿２］，给社会造成一定 影响，给人们的生活带来极大的危害。因此，对梅毒的早期诊 术有限公司）；ＴＰＰＡ试剂盒为日本富士瑞必欧株式会社产品。 １．３方法ｃＩ ＩＡ法和ＴＰＰＡ均严格按照检测标准和试剂使 用说明书进行操作。ＣｕＡ法结果判断以ｓ／ｃｏ＜１．２Ｏ为阴 性，Ｓ／ＣＯ＞１．２０为阳性。根据ｃＩ ＩＡ法Ｓ／ＣＯ值将患者标本 分为４组，比较各组ＣＬＩＡ法和ＴＰＰＡ检测符合率。 １．４统计学处理２ 结 果 断与治疗至关重要。国内外的研究显示 。 ，临床上常用的特 。异性梅毒螺旋体抗体检测方法主要有ＥＬＩＳＡ法、梅毒螺旋体 抗体明胶颗粒凝集试验（ＴＰＰＡ）、化学发光（ＣＬＩＡ）法。ＣＬＩＡ 法精密度好，无携带污染，自动化程度高，敏感性高，但存在假 阳性，特别是低ｓ／ｃｏ值标本给临床医生带来很大困扰。有研 采用ＳＰＳＳ１８．０进行数据分析，符合率的 比较采用Ｙ。检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 根据ＣＬＩＡ法检测结果，将患者标本分为４组：Ａ组（Ｓ／ Ｃ０＜１．２０，ｎ一９０）；Ｂ组（Ｓ／ＣＯ为１．２０～１０．００，ｎ一１３９）；Ｃ组 （ｓ／ｃＯ＞１０．００～２Ｏ．８８， 一１２４）；Ｄ组（Ｓ／ＣＯ＞２０．８８， 一 究显示，ＴＰＰＡ是诊断梅毒的确证试验，尤其是在低值标本中 表现尤为突出，由于敏感性不同，两种方法结果会有差异，本文 拟探讨两种方法联合检测梅毒螺旋体抗体的应用价值，为临床 早期诊断梅毒提供帮助。 １资料与方法 １６２）。Ｂ组ＣＬＩＡ法与ＴＰＰＡ检测符合率最低，与其他３组比 较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），见表１。 表Ｉ ＣＬＩＡ法与ＴＰＰＡ检测梅毒螺旋体抗体的结果比较 １．１一般资料选取２０１５年１～５月沈阳军区总医院门诊皮 肤科就诊患者５１５例为研究对象，年龄１９～９２岁，平均３５．８ 岁，其中男３３１例，女１８４例。所有研究对象早晨空腹采集静 脉血３ ｍＬ，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ｍｉｎ分离血清，４℃保存。 １．２仪器与试剂 ＣＨＥＭＣＬＩＮ１５００型全自动化学发光免疫 分析仪及配套的梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（北京科美生物技 作者简介：刘静，女，硕士，主管技师，主要从事临床检验工作。 通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ ｊｉｎｇｉｉｎｇ８３０４＠１６３．ｃｏｒｎ 检验医学与临床２０１５年１０月第１２卷第２ｏ期 ３讨 论 Ｉｎ！ ！！ ： ！： ！ ： （３）：２８４—２８５． 梅毒是由螺旋体引起的常见的慢性疾病，其主要传播途径 ［４］林炳柱，刘小燕．应用化学发光免疫测定法在梅毒螺旋体 抗体检测中的作用［Ｊ］．中外医疗，２０１４，３３（５）：１０—１１． ［５］邓红艳，赫兰辉．老年患者血清梅毒抗体酶联免疫吸附试 为性传播和母婴传播。随着人们生活水平的提高，社会的开 放，梅毒患者日益增多，梅毒患者的早期诊断和早期治疗至关 重要，梅毒检测的结果也是近年来社会关注的焦点，错误的检 测结果会引起纠纷，因此提供及时、准确的诊断方法与结果会 验假阳性结果分析＿Ｊ］．检验医学与临床，２０１１，８（２）：１５１— １５２． 给临床带来很大方便＿ １”］。 目前众多临床实验室采用ＣＬＩＡ法用于梅毒的初筛试验， ＣＬＩＡ法使用梅毒螺旋体抗原制备固相抗原，用辣根过氧化物 Ｃ６２魏从芳，汤巧．三种梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析 口］．国际检验医学杂志，２０１４，３５（４）：４５８—４５９． Ｅ７］郭跃文．４种梅毒检测的血清学方法比较口］．辽宁医学院 学报，２０１０，３１（５）：４５５—４５６． 酶（ＨＲＰ）标记梅毒螺旋体抗原，与标本中的梅毒螺旋体抗体 形成双抗原夹心，经洗涤后，加入化学发光底物，测定其发光强 度，根据Ｓ／ＣＯ值判断标本中是否含有梅毒螺旋体特异性抗 体￣１４－１ ６］。虽然ＣＬＩＡ法自动化程度高，无携带污染，可减少人 为误差，适合于大批量标本的筛查试验，但是由于ＣＬＩＡ法敏 ２８］杨永泉，石玉玲，徐少珊，等．化学发光法在梅毒实验诊断 中的应用价值［Ｊ］．生物技术通讯，２０１２，２３（２）：２５８—２５９． ［９］李凤中，黄永建，陈波．三种血清方法检测梅毒的比较分 析［Ｊ］．检验医学与临床，２０１２，９（４）：４４２—４４３． Ｅｌｏ］刘鹏．３种血清学检测方法在梅毒各期应用的特点分析 ［Ｊ］．中国医药指南，２０１４，１２（３６）：１６５—１６６． ［１１］袁柳．探讨三种梅毒血清学检验方法的临床应用［Ｊ］．中 国医药指南，２０１３，１Ｉ（２）：２４１—２４２． 感性高，对于低ｓ／ｃｏ值标本会存在假阳性，给临床诊断带来 很大麻烦。本研究结果显示，Ａ组（Ｓ／ＣＯ＜１．２）的９ｏ例标本 经ＴＰＰＡ检测均为阴性；Ｂ组（Ｓ／ＣＯ为１．２Ｏ～１Ｏ．００）的１３９ 例标本经ＴＰＰＡ检出９５例阳性，４４例ＴＰＰＡ确证为阴性的标 本均来自于孕妇，肿瘤、透析患者和老年患者。表明对于低Ｓ／ ＣＯ值的标本，须谨慎处理，必须用ＴＰＰＡ确证，并应进行随访 ［１２］秦凤英．酶联免疫吸附法与金免疫层析试验在检测梅毒 特异性抗体中的应用价值［Ｊ］．临床合理用药杂志，２０１４， ７（２２）：１３１—１３２． 并结合临床症状加以判断，以防存在假阳性。有研究显示，老 年人和孕妇的ＣＬＩＡ法敏感度高于ＴＰＰＡ，可能是由于梅毒螺 旋体隐性感染所致，也可能是由于药物干扰引起的，特别是孕 妇，有可能会进一步发展成为梅毒患者，应引起临床的重视，定 期进行随访Ｉ８＿１ｏ］。Ｃ组（Ｓ／ＣＯ＞１０．００～２０．８８）的１２４例标本 中，经ＴＰＰＡ确证为阳性的有１１５例，Ｄ组（ｓ／ｃｏ＞２０．８８）的 １６２例标本中，ＴＰＰＡ全部确证为阳性。可见，随着ｓ／ｃｏ的升 ［１３］王欣，关倩雅，姚建华．广东省某地区妇幼保健院２００８～ ２０１３年梅毒临床流行特征分析［Ｊ］．中国处方药，２０１４，１２ （７）：７９—８Ｏ． ［１４］Ｗａｎｇ ＬＮ，Ｌｉ ＪＭ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｍ ａｎｄ Ｇ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ｆｏｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ ｉｎ ｂｌｏｏｄ ｄｏｎｏｒｓ［Ｊ］．Ｓｅｘ Ｔｒａｎｓｍ Ｄｉｓ，２００９，３６（７）：４１３－４１６． 高，ＴＰＰＡ阳性率也相应地升高。因此，ＣＬＩＡ法和ＴＰＰＡ联 合检测梅毒螺旋体抗体能够减少假阳性。 ＴＰＰＡ是将梅毒Ｎｉｃｈｏｌｓ株的精制菌体包被在人工载体明 胶粒子上，这种致敏粒子和标本中的梅毒螺旋体抗体进行反应 发生凝集，产生粒子凝集反应，由此可以检测出血清和血浆中 的梅毒螺旋体抗体，并可用来测定抗体效价，有着很高的灵敏 ［１５］汪光蓉，李维丽，王强，等．化学发光法检测梅毒螺旋体特 异抗体Ｓ／ＣＯ低值标本的复检结果分析［Ｊ］．中国皮肤性 病学杂志，２０１４，２８（６）：６３７－６３９． ［１６］陈灵敏，李长如，周海星，等．梅毒血清学检测方法的分析 ［Ｊ］．检验医学与临床，２０１０，７（１８）：１９９６—１９９７． ［１７］高凯．梅毒检测的ＥＬＩＳＡ法，ＴＰＰＡ法，ＴＲＵＳＴ法比较 Ｉ－ｊ］．中国医药指南，２０１３，１１（３４）：１０８—１０９． 度和特异度，是目前公认的梅毒检测的确证方法＿１ 。但ＴＰ— ＰＡ存在标本操作繁琐、检测时间长、难以自动化等缺点，且在 观察结果时存在人为因素干扰，对于一些介于阴性和阳性之间 的标本，结果判定难免出错。由于各种检测方法都存在着一定 的假阳性和漏检比例，临床应根据实际工作条件和需要，对于 ［１８］袁艳军，吕炳山，郭秋延．化学发光微粒子免疫分析法检 测梅毒和丙型肝炎抗体的临床结果分析［Ｊ］．中国医药指 南，２０１５，１３（３）：１２８—１２９． ｓ／ｃｏ处于低值的标本，应进行ＴＰＰＡ确证，以提高诊断的灵 敏度和特异度，最大限度地减少漏诊和误诊，避免不必要的医 疗纠纷。 参考文献 ［１９］赵娟，谭延国．化学发光法检测梅毒抗体的实验评价［Ｊ］． 中国皮肤性病学杂志，２００８，２２（１０）：６２６—６２７． ［２Ｏ］Ｓａｒａｌ Ｙ，Ｄｉｌｅｋ ＡＲ，Ｄｉｌｅｋ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｓｙｐｈｉｌｉｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄｓ［Ｊ］． Ａｃｔａ Ｄｅｒｍａｔｏｖｅｎｅｒｏｌ Ｃｒｏａｔ，２０１１，２Ｏ（２）：８４—８８． ［１］魏方，张鹏．ＥＬＩＳＡ法与ＴＰＰＡ法检测梅毒螺旋体抗体 的相关性研究［Ｊ］．蚌埠医学院学报，２０１４，３９（５）：６５１— ６５２． ［２１］Ｌｏｅｆｆｅｌｈｏｌｚ ＭＪ，Ｂｉｎｎｉｃｋｅｒ ＭＪ．Ｉｔ ｉｓ ｔｉｍｅ ｔＯ ｕｓｅ ｔｒｅｐｏｎｅｍａ－ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｓｙｐｈｉｌｉｓ ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，５０（１）：２－６． ［２］丁正林，刘少华，李燕．梅毒感染人群中３种血清学检测 方法与结果分析＿Ｊ］．检验医学与临床，２０１１，８（１４）：１６８０— １６８１． ［２２］夏映凤．临床常见梅毒血清学检测方法的合理选择［Ｊ］． 检验医学与临床，２０１１，８（２４）：３０４２—３０４４． （收稿日期：２０１５一Ｏ６一Ｏ２ 修回日期：２０１５—０９—０５） ｒ３］熊继红，卢建强，赵立光，等．化学发光法与ＥＬＩＳＡ法检 测梅毒抗体的一致性比较［Ｊ］．检验医学与临床，２０１１，８
