２０１３年１０月第１０期 参考文献 中国民族医药杂志 ６５ ［６］程立方，田樱．干酪素法测定侧柏叶中鞣质含量［Ｊ］． 时珍国药研究，２００９，６（３）：３３—３５ ［１］中华人民共和国卫生部药典委员会．卫生部药品标准 蒙药分册［Ｍ］．１９９８，２０３ ［２］徐勤．鞣质的研究进展［Ｊ］．华夏医学，２００４，１７（１）： ｌ１３． ［７］杜瑞莲，杨中林．五倍子中鞣质提取工艺研究［Ｊ］．中 草药，２００８；３０（６）：８９—９０ ［８］高建萍，那顺朝克图，包顺茹．正交实验优选锁阳中总 鞣质的提取工艺研究［Ｊ］．内蒙古医学院学报，２０１１；３３ （１）：３４—３６ ［３］罗文毓，章育中．大黄中鞣质测定方法的研究Ｉ．干酪素 法［Ｊ］．药物分析杂志，１９８６；６（１）：１５～１７ ［４］戴万生，赵荣华，陈红波．干酪素法测定大黄鞣质成分 的研究［Ｊ］．时珍国医国药杂志，２００３；１４（６）：３２４～３２５ ［９］冯卫生，臧新钰，郑晓珂．鞣质的研究进展［Ｊ］．中国新 药杂志，２００９；１８（１４）：１３１１ ［５］孔琪．五倍子鞣质的提取及抑制亚消化反应的初步研 究［Ｊ］．应用科技，２００５，３２（９）：６２—６４ ２０１３年８月２日收稿 Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔａｎｎｉｎｓ ｉｎ Ａｃｅｒ ｍｏｎｏ Ｍａｘｉｍ ｂｙ Ｃａｓｅｉｎ Ｍｅｔｈｏｄ ＢＡＯ ｚｈｉ—ｈｕａ ＧＡＯ Ｊｉａｎ—ｐｉｎｇ ＧＡＯｊｉｕｎ—ｈｕａ （ＩｎｎｅｒＭｍｌｇｏｆｉａ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｏｈｈｏｔ ０１００５９，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｓｔａｂｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏ ｏｆ Ｔａｎｎｉｎｓ ｉｎ Ａｅｅｒ ｍｏｎｏ Ｍａｘｉｍ ｂｙ Ｃａｓｅｉｎ Ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｃａｓｅｉｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔａｎｎｉｎｓ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｕｓｉｎｇ ３０％ｍｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｓｏｌｖｅｎｔ，ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ ３０ ｍｉｎ，ａｄｏｐｔｉｎｇ ３００ ｍｇ ｃａｓｅｉｎｓ，ａｄｄｉｎｇ １．５％Ｎａ２ ＣＯ３ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉ— ｎｉｎｇ ａｆｔｅｒ １５ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔａｎｎｉｃ ａｃｉｄ ｗａｓ ９８．９２％． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｔ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔａｎｎｉｎｓ ｉｎ Ａｃｅｒ ｍｏｎｏ Ｍａｘｉｍ． ｛Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｌ Ａｃｅｒ ｍｏｎｏ Ｍａｘｉｍ；Ｔａｎｎｉｎｓ；Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ＨＰＬＣ法测定蒙药蓍草中绿原酸含量 蔡芳 周雪梅 白音夫 （１．内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特０１００２０； ２．内蒙古自治区食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特０１００２０） 摘要：目的：建立蒙药蓍草中绿原酸含量测定方法。方法：采用ＨＰＬＣ法测定，流动相：乙腈一０．３％磷酸溶液（１２：８８）；流 速：１ｍＬ・ｍｉｎ－。；温度：３０℃；检测波长：３２８ｎｍ；进样量１０ｔｘＬ。结果：绿原酸在０．７～１４．Ｏｐ．ｇ・ｍＬＩ１浓度范围内线性关系良 好，回归方程为：Ａ＝５４５２．５＋７００８．４ Ｃ，ｒ＝０．９９９。平均回收率＝９９．８５％，ＲＳＤ：２．３６％。结论：ＨＰＬＣ法测定蓍草中绿原 酸，方法简单，回收率稳定，重现性好，可作为该药材含量测定和质量评价方法。 关键词：蓍草；绿原酸；含量测定 中图分类号：Ｒ２９１．２文献标识码：Ａ文章编号：１００６—６８１０（２０１２）ｌ０—００６５—０２ 蓍草（Ａｃｈｉｌｌｅａ ｓｉｂｉｉｆｃａ Ｌｅｄｅｂ）别名一枝蒿、千锯草、锯 草、蜈蚣草等。蓍草含多种挥发性成，主要成分Ｂ一蒎烯、 柠檬烯。蓍草蒙名图勒格其一乌布斯，为蒙医药特色药材， １仪器、试剂与药材 １．１高效液相色谱仪１１００型（美国安捷伦公司），ＮＣ一 ２０００型色谱工作站（大连中北科学技术公司），ＩＮ一１８０型 性味，苦、辛、性凉、锐。具有止痛消肿、活血祛瘀作用，可用 于关节肿胀、疖痈肿痛、风湿痹痛、肢体麻木、跌打损伤、肠 炎、头痛等症 。本文采用ＨＰＬＣ法测定蓍草中绿原酸 柱温箱（上海英泰科技研究所），ＳＨ６１５０Ｄ超生波清洗器 （上海昆山），电子天平（梅特勒）。 １．２试剂与药材：绿原酸由中国药品生物制品检定所提 成分，旨在建立药材质量标准。 供；乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。研究用蒙古 ６６ 中国民族医药杂志 ２０１３年１０月第１０期 山萝卜由呼和浩特药材站提供，批号２００８０６；测定样品于 ２００７—２０１１年９月中旬采集内蒙不同山区，采集的样品及 时干燥，避光保存。 ２方法与结果 ２．１色谱条件：Ｃ１８色谱柱（４．６×２０ｍｍ，５ ｍ）由中国科 学院兰州化学物理研究所色谱中心提供；流动相：乙腈一０． ３％磷酸溶液（１２：８８）；流速：ｌｍＬ・ｍｉｎ～；温度：３０℃；检测 波长：３２８ｎｍ；进样量１０ｐ￣Ｌ，在此条件下，样品中绿原酸与 其它组分有较好的分离，对照品与样品色谱图见图１。 ２．２标准曲线测定：精密称取干燥至恒重的绿原酸对照品 适量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成１ｍＬ含０．０２８ｍｇ绿 原酸溶液，作为对照品溶液。分别精密量取绿原酸对照品 溶液０．２５、０．５、１、２、３、４、５ｍＬ，置于１０ｍＬ量瓶内，用甲醇稀 释至刻度，按上述色谱条件进行测定。结果，绿原酸在０．７ —１４．０１－￣ｇ・ｍＬ‘。浓度范围内以峰面积（Ａ）与对照品浓度 （Ｃ）进行回归，其线性关系良好。回归方程为：Ａ＝５４５２＋ ７００８Ｃ，ｒ＝０．９９９。 ２．３供试品溶液制备：精密称取蓍草药材０．１ｇ，，置５０ｍＬ 具塞磨口瓶内，加甲醇ｌＯｍＬ，超声处理３０ｍｉｎ，放冷，滤过， 精密取续滤液１ｍＬ，转移至ｌＯｍＬ棕色量瓶内，加甲醇至刻 度，摇匀，即得。 ２．４方法的专属性：在拟定的色谱条件下，分别取对照品 溶液和供试品溶液进样测定，得到特征峰，与杂质分离良 好，无干扰。见图１ ～ｊ ＾＾一～ 图１样品ＨＰＬＣ图谱 Ａ一对照品图谱；Ｂ一供试品图谱；ａ一绿原酸 ２．５精密度试验：精密量取对照品溶液，连续测量６次，测 得对照品峰面积值，以峰面积计算绿原酸ＲＳＤ为０．４１％， 表明精密度良好。 ２．６稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于０、１、２、４、８、 １２ｈ进样，测得供试品绿原酸峰面积值，以峰面积值计算绿 原酸ＲＳＤ为０．８０％。结果表明，供试品溶液在１２ｈ内稳 定。 ２．７重现性试验：精密称取样品６份，每份约０．１ｇ，按“供 试品溶液制备”项下操作，进样，测定，并计算质量分数，样 品中绿原酸含量为３．１％，ＲＳＤ为１．１０％。 ２．８ 回收率试验：采用加样回收法。取已知质量分数的同 批样品６份，每份约０．１ｇ，置５０ｍＬ具塞磨口瓶内，加甲醇 １０ｍＬ，超声处理３０ｍｉｎ，放冷，滤过，精密取续滤液１ｍＬ，转 移至ｌＯｍＬ棕色量瓶内，加入标准品溶液１ｍＬ（０．０２８ｍｇ）， 加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定结果，平均回收率＝９９． ８５％．ＲＳＤ＝２．３６％。 表１回收率试验结果 ２．９样品测定：精密称取不同产地蓍草药材，按“供试品 溶液制备”项下操作，测定并计算含量。结果见表２ 表２样品测定结果ｎ＝３ ３讨论 蒙药蓍草成分已有报道，其绿原酸（ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ） 含量测定未见报道。绿原酸具有多种活性，是药品、保健品 原料。药材以绿原酸作为含量标准可基本确定药材品质和 疗效。 本文建立ＨＰＬＣ法测定药材中绿原酸含量。色谱条件 采用流动相乙腈一磷酸溶液、磷酸二氢钠缓冲液（ＰＨ２．７） 一甲醇（７０：３０），均可获得分离良好的色谱峰，由于后者含 有无机盐类，不利仪器使用，故采用前者流动相。 采用ＨＰＬＣ法建立蒙药蓍草绿原酸含量，该方法样品 预处理简单，回收率稳定，重现性好，可作为该药材含量测 定和质量评价方法，同时为建立蒙药材质量标准提供依据。 参考文献 ［１］内蒙古植物药志编辑委员会．内蒙古植物药志［Ｓ］．内 蒙古人民出版社１９８９，１５８—１６０ ［２］内蒙古卫生厅．内蒙古中草药［Ｍ］．内蒙古人民出版 社，１９７２，１５８—１５９ ［３］白音夫，齐明玉，李德良，等．蓍草不同部位镇痛、抗炎、 镇静、催眠作用研究［Ｊ］．中国药理通，２００８，２５（３）：５１ ２０１３年７月１２日收稿
