强迫症药物疗效与六个功能基因的分子遗传药理学研究(2004)

・临床遗传学研究・强迫症药物疗效与六个功能基因的分子遗传药理学研究

张岚

刘协和

李涛

杨彦春

胡迅DavidCollier

【摘要】目的

探讨与5羟色胺系统和多巴胺系统有关的6个基因（羟色胺2羟色-5-A受体基因、5-收集了1对强迫症患者给予513个强迫症核心家系，-

胺转运体基因、多巴胺D多巴胺D儿茶酚胺氧位甲基转移酶基因、单胺氧化酶A2受体基因、4受体基因、基因）与强迫症药物疗效之间是否存在关联。方法

羟色胺回吸收抑制剂治疗，采用Y按Yale-Brown强迫量表在治疗8周前后进行评定，ale-Brown强迫量表评分分为有效组和无效组。采用性片段长度多态性和可变数串联重复序列多态性技术对有效组和无效组的强迫症家系在6个基因的7个位点上进行传递不平衡检测。结果

未发现6个基因与不同药效的

强迫症家系之间存在关联，但发现有效组和无效组在5羟色胺2／-A受体基因-1438GA位点基因型频率

2存在差异，无效组有更多的纯合子（x，）。结论5羟色胺2E4.69PE0.03-A受体基因可能和强迫症药物治疗效果有关。

【关键词】强迫症；药物疗效；功能基因；传递不平衡检验

*

MolecularpharLacoeneticstudiesofdruresonsestoobsessive-coLulsivedisorderandsixfunctionalenesggppg

，1，1，12，1，2，2（ZHANGLanLIUXie-heLITaoYANGYan-chunHUXunDavidCollier.1InstituteofMentalHealth，WestChinaHosital，SichuanUniversitChendu，Sichuan，610041P.R.China.E-py，g；2（Mzhanlan@mail.sc.cnino.net）olecularGeneticLaboratorInstituteoschiatrLondonmail：gfy，fPyy，UniversitLondonSE58AF，London，UK）y，

Corresondinuthor：LIUXie-hepga【A】ObstractbectiveToinvestiatetheassociationsbetweenthedruresonsestoobsessive-comulsiveggppj

（OdisorderCD）andsixfunctionalenesrelatedwithserotoninanddoamine.MethodsOnehundredandthir-gpteenOCDnuclearfamilieswerecollected.TheOCDpatientsweretreatedwithserotoninreutakeinhibitorsp

（）（YSRIsfor8weeksandthedruesonseswereassessedusintheYale-Brownobsessive-comulsivescale-grpgp）BOCS.Theatientsweredividedintodruresondersrouandnon-resondersrouaccordintothereduc-pgpgppgpginrateofY-BOCSscore.ThegenotesofsixgenesweredeterminedwiththeAm-FLPandAm-RFLPgyppp

（T（techniuesandanalzedbtransmissiondiseuilibriumtestDT）.Thesixgenesareserotonin2Arecetor5-qyyqp，（，（D，（D，HT2A）serotonintransortor5-HTT）doamineD2recetorRD2）doamineD4recetorRD4）ppppp

（C（Mcatechol-O-methtransferaseOMT）andmonoamineoxidaseAAOA）.ResultsNoassociationwasy，foundbetweenthesixgenesanddifferentdruresonsesrous.Howevertherewassinificantdifferencebe-gpgpg

2／（x，tweenthedruresondersandnon-resondersinhomozositatthe5-HT2A-1438GAlocusE4.69Pgppygy）E0.03.ConclusionTheresultssuestedthatthe5-HT2Amalasomerolesintheeffectsofdrutreat-ggypygmentonOCD.

【K】o；d；f；teordsbsessive-comulsivedisorderruresonseunctionaleneransmissiondiseuilib-pgpgqywriumtest

，*Proect.No.39770276suortedbtheNationalNaturalScienceFoundationofChinajppy

强迫症（，是一组以反复obsessive-comulsivedisorderOCD）p出现的强迫思维或强迫行为为主要临床表现的一组精神障碍。强迫症发病年龄早，治疗困难。有20%~30%的强迫症患者

基金项目：国家自然科学基金（）39770276

作者单位：（张610041成都，四川大学华西医院心理卫生研究所岚、刘协和、李涛、杨彦春）；M，olecularGeneticLaboratorInstituteofy，，，（李涛、胡迅、）PschiatrLondonUniversitLondonUKDavidCollieryyy

通信作者：刘协和，：Emailxieheliu@hotmail.com

用，在对强迫症的强化治疗中则可使用多巴胺受体阻滞剂。因此，我们选取了与5羟色胺系统和多巴胺系统代谢有关的6个-基因对强迫症的核心家系进行了药理遗传学研究，旨在从分子遗传学的角度，解释药物疗效的差异，找出能预测药物疗效的基因，为将来个体化的用药模式提供依据。1对象与方法

1.1对象

（强迫症患者及其生物学父母）1.1.1强迫症核心家系113个，强迫症患者均来源于1997~2001年华西医院心理卫生中心的门诊和住院患者。强迫症患者按以下标准纳入：（）汉族；1

治疗非常困难、预后差。目前公认对强迫症治疗有效的药物，如氯丙咪嗪、氟西汀、帕罗西汀等均有5羟色胺回吸收抑制作-

・480・

中华医学遗传学杂志2，，，004年10月第21卷第5期ChinJMedGenetOctober2004Vol.21No.5（）符合美国精神障碍诊断与统计手册第3版修订版（D2SM-强迫症的诊断标准；（3）病程不少于3个月；（4）Ⅲ-R）Yale-［］

（）可获得生物学双亲以Brown强迫症状量表评分>16分1；5

及一、二、三级亲属的资料；（）未使用任何精神药物或停药26

发2.4比较有效组和无效组患者的基因型和等位基因频率，

现在5羟色胺2／无效组患者比有效组患者-A-1438GA位点，带有更多的纯合子，结果见表3。3讨论

类药物是目前公认治疗强迫症有效的药物。我们在用SRI

表1不同药物疗效患者的各临床变量的比较

无效者有效者

）（nE）（nE7827

患者年龄（岁）23.73+7.3222.31+6.18发病年龄（岁）项目

周以上；（）愿意参加本研究者。排除标准：（）有严重躯体或71

）有严重精神发育迟滞的患者；（）诊断脑器质性疾病患者；（23不明确者及资料不全者。

1.1.2研究人员采用DSM-Ⅲ-R定式检查提纲以及本研究专

用调查表对患者及其父母进行面检。对符合研究标准且愿意参加药物治疗的先证者，治疗前后采用Yale-Brown强迫量表P值0.37

*

Yale-Brownobsessive-compulsivescale，Y-BOCS）、Hamilton抑郁量表（Hamiltonratingscalefordepression，HAMD）、Hamilton焦虑量表（Hamiltonanxietyscale，HAMA）等量表评定药物治疗效果。研究规定患者只能采用一种5-羟色胺回吸收抑制剂serotoninreup

takeinhibitors，SRI）治疗。药物有效的定义是：患者用上述药物之一治疗8周后，Y-BOCS减分率大于35%［1］。药物治疗无效的定义是：经

8周治疗

（氯丙咪嗪用至250mg／天以上，或氟西汀60mg／天，或帕罗西汀60mg／天或舍曲林200mg

／天），Y-BOCS减分率小于35%。治疗期间不得同时服用抗精神病药、锂盐等可能增强抗强迫效果的药物。1.2方法

1.2.1DNA提取抽取强迫症患者及双亲静脉血各5ml，依地酸二钠抗凝，常规酚氯仿法提取DNA。1.2.2基因型检测对以下6个基因的7个位点进行PCR扩增和多态性分析：5-羟色胺2A受体（serotonin2Areceptor，5-T2A）基因、5-羟色胺转运体（serotonintransportor，5-HTT）基因、多巴胺D2受体（dopamineD2receptor，DRD2）基因、多巴胺D4受体（dopamineD4receptor，DRD4）基因、儿茶酚胺氧位甲基转移酶（catechol-O-methytransferase，COMT）基因、单胺氧化酶A（monoamineoxidaseA，MAO-A）基因。其中5-HT2A-1438G／A位点按Sp

urlock等［2］

的方法，5-HTTLPR位点按Collier等［3］的方法，DRD2-141CDel／Ins位点按Arinami等［4］

的

方法，DRD4-521C／T位点按Okuyama等［5］

的方法，DRD448bp

VNTR位点按Shaikh等［6］

的方法、COMTVal／Met位点按Ho-da等［7］的方法、MAO-AVNTR位点按Kunugi等［8］

方法进行多态性分析，结果输入SPSS10.0

。1.3统计学方法临床部分的计量资料比较采用Studentt检验或非参数检验，计数资料的比较采用x2检验和Fisher精确概率检验。分子遗传学研究资料采用ETDT软件行传递不平衡检验（transmissiondisequilibriumtest，TDT）［9］。

2结果

2.1共有113例强迫症患者参加了药物疗效的评定。在治疗

过程中，有4例因副反应退出，4例因合并使用了抗精神病药未纳入最后的统计。共105例患者完成了治疗，其中有效者78例，无效27例，药物总有效率为74.3%（78／105）。2.2比较有效组和无效组两组的临床变量，提示无效组的发病年龄明显早于有效组（PE0.002，表1）。2.3分别对有效组和无效组的核心家系进行传递不平衡检验，未发现7个位点与两组之间存在关联（表2）。

18.41+6.1115.+3.00病程（月）0.00236.0048.00

0.24Y-BOCS

评分26.34+9.2326.50+7.870.94HAMD评分

17.2+11.7716.0+10.850.65HAMA评分20.38+9.8019.3+11.320.67合并抽动障碍（例）合并精神病性症状（例）740.79家族史阳性（例）760.233590.24表2不同药物疗效组家系TDT结果

等位基因位点药物治疗有效组家系药物治疗无效组家系TNT

x2

PTNTx2

P5-HT2A-1438G／A

-1438A26267

4

-1438G26260.001.004

70.830.36

5-HTTLPRS2023511L2120105LJ

530.580.75212.330.31DRD2-141CDel

／Ins-141CIns101749-141CDel

17101.840.141.970.16DRD4-521C／T

-521C273167-521T31270.270.607

60.080.78

DRD4VNTR2-fold48bp21241053-fold48bp31014-fold48bp272910115-fold48bp21046-fold48bp22117-fold48bp

204.340.50109.470.09COMTVal／Met

Met312196Val21311.940.16690.600.44MAO-AVNTR<2-fold30bp10002-fold30bp11003-fold30bp2218684-fold30bp1723865-fold30bp103.400.49000.290.59T：表示等位基因从杂合子父母向子代传递的次数；NT：表示等位基因未从杂合子父母向子代传递的次数

表3有效组和无效组5-羟色胺2A-1438G／A位点基因型频

率比较

组别例数基因型频率（%）GG+AA

GA

x2

值

P值有效组7841.059.04.69

0.03

无效组

2765.434.6SRI治疗前后采用Y-BOCS进行评定，药物有效率为74.3%，

与国外报道相似［1］。5-羟色胺转运体在5-羟色胺神经递质代谢中起着重要的作用，它也是5-

羟色胺回吸收抑制剂药物结合的靶位点。近几（（H中华医学遗传学杂志2，，，004年10月第21卷第5期ChinJMedGenetOctober2004Vol.21No.5・481・

年来认为5-HTTLPR多态性在强迫症病因学和遗传药理学研

［0］究中有着重要作用，并有一些阳性报道。M对3cDoule等15g

，2SurlockG，HeilsA，HolmansPetal.Afamilasedassociationpyb

studfT102Cpolmorhismin5HT2Aandschizohrenialusiden-yoyppp

，tificationofnewpolmorhismsinthepromoter.MolPschiatrypyy，19983:42-49.

3CollierDA，StoberG，LiT，etal.Anovelfunctionalolmorhismpyp

：ossibleroleinwithinthepromoteroftheserotonintransortereneppg

，，suscetibilittoaffectivedisorders.MolPschiatr19961:453-pyyy460.

4ArinamiT，GaoM，HamauchiH，etal.Afunctionalpolmor-gy

hisminthepromoterreionofthedoamineD2recetoreneisas-pgppg

，，19976:577-582.sociatedwithschizohrenia.HumMolGenetp5OkuamaY，IshiuroH，NankaiM，etal.Identificationofapol-ygy

morhismintheromoterreionofDRD4associatedwiththehumanppg

，，20005:-69.noveltseekinersonalittrait.MolPschiatrygpyyy，CollierD，KerwinRW，etal.DoamineD4recetorsub-6ShaikhSpp

，，tesandresonsetoclozaine.Lancet1993341:116.yppp，N，eichollD，BennettPtal.Noassociationbetween7HodaF

’sdiseaseandlow-activitallelesofcatecholO-methltrans-Parkinsonyy，，ferase.BiochemBiohsResCommun1996228:780-784.py

，8KunuiH，IshidaSKatoT，etal.Afunctionalolmorhismingpyp

theromoterreionofmonoamineoxidase-Ageneandmooddisor-pg

，，19994:393-395.ders.MolPschiatryy，C／9ShamPurtisD.Anextendedtransmissiondiseuilibriumtestq

（T，，DT）formultiallelemarkerloci.AnnHumGenet199559:323-336.10

，EersonCN，PriceLH，etal.EvidenceforlinkaeMcDouleCJppgg

（S）diseuilibriumbetweenserotonintransorterproteingeneLC6A4qp，，andobsessive-comulsivedisorder.MolPschiatr19983:270-pyy273.

11BenelD，GreenberD，Cora-LocatelliG，etal.AssociationoftheggB

serotonintransorterpromoterreulatoreionpolmorhismandpgyrgyp

，，19994:463-466.obsessive-comulsivedisorder.MolPschiatrpyy，12DiBellaD，ErzeovesiSCavalliniMC，etal.Obsessive-Comulsivegp

，5-HTTLPRpolmorhismandtreatmentresonse.Phar-Disorderypp

，，macoenomicsJ20022:176-181.g

（收稿日期：）2003-11-28

个欧美强迫症核心家系的研究结果提示5-HTTLPRL等位基

［1］

因与强迫症存在关联。B对7enle等15例患者的研究发现，g与对照相比，强迫症患者携带了更多的L／提示5L基因型，-

重复了以上核心家系研究HTTLPR与强迫症的易感性有关，

［2］

的结果。最近D的研究也未发现该位点与强迫症iBella等1存在关联。

我们对105个核心家系根据药物治疗效果在该位点进行传递不平衡检测，未发现该位点与强迫症存在关联。不同人群基因频率的差异或许可以解释部分原因。对欧洲人群的研究表明L等位基因的频率约6而本研究人群L等位基因的0%，频率仅为3除L和S两种等位基因外，本研究中约0%左右，2%的先证者父母还有LJ等位基因。另一种解释是，5-HTTL-PR可能不是中国人群强迫症患者的易感基因或与强迫症可能不存在关联。

此外，我们还对与5色胺系统代谢有关的C-OMT、MAO-A基因以及多巴胺系统的DRD2和DRD4基因的多态性与药物疗效进行了关联分析，没有发现以上位点与强迫症存在关联，提示这些位点可能与药物治疗强迫症效果没有直接的关系。

在对强迫症的药理学研究中，激活5羟色胺2-A受体能使强迫症状减轻，因此5羟色胺2-A受体可能是治疗强迫症药物发挥作用的重要部位。比较有效组和无效组患者的5羟色胺-／药物无效者含有更多的纯合子。2A-1438GA基因型频率发现，

提示了不同疗效的患者可能存在遗传上的差异，羟色胺25-A-／羟色胺1438GA可能是强迫症治疗效果不佳的预测因子，5-2A基因可能与强迫症药物治疗效果有关。

参

考

文

献

，1GoodmanWK，McDouleCJPriceLH.Pharmacotheraofobses-gpy

，，（）sivecomulsivedisorder.JClinPschiatr199253sul:29-37.pyypp

（本文编辑张谦）

・消息・《中华医学遗传学杂志》2005年征订启事

《中华医学遗传学杂志》是中华医学会主办、四川大学（原华西医科大学）编辑出版的医学学术刊物。本刊是国内医学卫生核心期刊之一，并被世界权威的检索系统美国《医学索引》（、《化学文摘》（C、《生物学文摘》（B、《工程索引》（E）、俄罗斯《文摘IM）A）A）I杂志》（A）及荷兰《医学文摘》（E收录，是我国唯一进入E人类遗传学、人类JM）I核心期刊的医学杂志。主要报道我国医学遗传学、

疾病基因组学及相关领域的基础理论、临床实践、技术方法等科研成果。以从事医学遗传学的各科临床医师、妇幼保健、计划生育工作者、医学院校师生和科研单位有关人员为主要读者。

本刊为双月刊，公开发行，大1全年96开本，2005年页码将增加至120页。每册国内定价15.00元，0.00元。国内邮发代号：，国外B。62-163M4298

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《中华医学遗传学杂志》编辑部