河北农业大学

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专科毕业实习总结

植物激素与转基因技术

学 院：生命科学学院

专业班级：生物制药技术 学 号：2009043040507 学生姓名：董大光 指导教师：王凤茹

二O 一二 年 六 月 三 日

植物激素与转基因技术

董大光

河北农业大学 生物制药技术 0905班 河北保定 071001

通过本实验的学习，了解和掌握植物激素调节和pcr技术的原理和方法。在模式植物拟南芥中实现基因过表达。

1、 植物激素

1.1 传统五大激素

植物激素有六大类，即生长素（auxin）、赤霉素（GA）、细胞素（CTK）、脱落酸（abscisic acid，ABA）、乙烯（ethyne，ETH）。它们都是些简单的小分子有机化合物，但它们的生理效应却非常复杂、多样。例如从影响细胞的、伸长、分化到影响植物发芽、生根、开花、结实、性别的决定、休眠和脱落等。所以，植物激素对植物的生长发育有重要的调节控制作用。

1.2第六类植物激素油菜素甾醇类

此类激素具有四个环的5-α-胆甾烷的基本结构，是植物体内一类与昆虫的蜕皮激素以及哺乳动物中的甾体类激素结构相似的植物生长调节物。

2、 pcr技术

2.1pcr技术

聚合酶链式反应（英文全称：Polymerase Chain Reaction）， 聚合酶链式反应

简称PCR。聚合酶链式反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 2.2pcr技术的原理

PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃

左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

3、 基因的过表达

本来基因表达是受到各种内外信号的精确的，一旦这种机制的任何一个环节出现问题

就会失控。基因的表达过程就可能进入失控状态，就有可能表现为表达过度，即该基因被过度的转录、翻译，最终基因表达产物超过正常水平。

拟南芥作为一种比较经典的“模式植物”，在研究相关的其他植物的生命活动规律中，因其结构简单，相似性高，而表现出其他植物无法比拟的优越性，成为了科学家们最理想的研究对象。

以转基因技术和pcr技术基因，实现拟南芥中的植物激素过表达，就可以研究植物激素调节规律了。

指导教师评语：

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