血细胞分析仪用无氰溶血剂[发明专利]

*CN101907621A*

(10)申请公布号 CN 101907621 A(43)申请公布日 2010.12.08

(12)发明专利申请

(21)申请号 201010174421.8(22)申请日 2008.06.04(62)分案原申请数据

2008101063.2 2008.06.04

(71)申请人南昌百特生物高新技术股份有限公

司

地址330012 江西省南昌市昌东工业区东升

大道699号(72)发明人袁水斌 刘郁林 文玲梅(74)专利代理机构南昌新天下专利商标代理有

限公司 36115

代理人施秀瑾(51)Int.Cl.

G01N 33/49(2006.01)

权利要求书 1 页 说明书 7 页

()发明名称

血细胞分析仪用无氰溶血剂(57)摘要

一种血细胞分析仪用无氰溶血剂，其特征是在1升溶血剂中：氯化钾0.8～5.0g、十二烷基三甲基氯化铵0～60.0g、十八烷基三甲基溴化铵14.0～0g、异丙醇6.0～10.0ml、用碳酸盐或盐酸缓冲液调pH3.2～5.8、余为水，其中十二烷基

十八烷基三甲基溴化铵的加入量三甲基氯化铵、

为互补，但两者的加入量之和≤60g。本发明能形成稳定的血红蛋白衍生物，且在λ＝0nm，λ＝504nm时，吸收光谱曲线相似，可满足临床检验的需要；同时，试剂中不含氰化物，不含叠氮物，无毒性，能有效改善操作人员的工作环境，降低毒物对人身健康的伤害。CN 101907621 ACN 101907621 ACN 101907625 A

权 利 要 求 书

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1.一种血细胞分析仪用无氰溶血剂，其特征是在1升溶血剂中：

氯化钾 0.8～5.0g十二烷基三甲基氯化铵 0～60.0g十八烷基三甲基溴化铵 14.0～0g异丙醇 6.0～10.0ml碳酸盐或盐酸缓冲液 调PH3.2～5.8余为水

其中十二烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基溴化铵的加入量为互补，但两者的加入量之和≤60g。

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CN 101907621 ACN 101907625 A

说 明 书

血细胞分析仪用无氰溶血剂

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技术领域

[0001]

本发明属于医疗诊断仪器用试剂领域，特别涉及血细胞分析仪用试剂。

背景技术

溶血剂是医学检验中血液分析仪最常用的试剂，是测定血红蛋白(Hb)和白细胞(WBC)计数或分类的关键试剂。溶血剂在稀释液的配合作用下，一方面使红细胞(RBC)迅速溶解，释放出血红蛋白衍生物与溶血剂结合形成稳定的血红蛋，以供定量测定Hb，另一方面白细胞维持原有形态，并保持一定的体积，供WBC计数用，并且根据白细胞的大小来对白细胞进行三分群(淋巴细胞、中性粒细胞、中间型细胞)。1996年，国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法作为国际Hb测定标准方法，其主要物理指标为：在波峰λ＝0nm，波谷λ＝504nm时，具有明显的波峰、波谷。该法虽然能较精确地测量Hb；但不能同时测定WBC和根据白细胞的大小来对白细胞进行分类(淋巴细胞、中性粒细胞、中间型细胞)，因而，无法应用于临床。[0003] 目前，国内外临床医学检验学上常用的溶血剂是以有机季胺盐加(KCN)组成的混合物。一方面其吸收光谱与HiCN较为接近，另一方面，有机季胺盐破坏RBC后，Hb与KCN迅速生成稳定的CNHb，达到测定Hb的目的，同时又不破坏WBC。但这种配伍的溶血剂的最大缺点是KCN有剧毒，不仅严重危害实验室工作人员的身体健康，同时给生产单位操作上也带来很多不便，对环境污染也极为严重。虽然临床上制定了极为严格、繁琐的降低氰污染措施，但其对人身、环境的污染还是无法避免。

[0004] 中国专利CN99115572.6中公开了一种无氰溶血剂，但是其只能在CD系列、F系列血细胞分析仪器中使用，不能在其它系列仪器中使用。而且没相配的稀释液(Dil)。配制中所用的水必须是重蒸馏水，在实际生产中操作困难，成本高。而且十六烷基三甲基溴化铵比重轻，配制时有悬浮粉末在空气中漂浮。该产品吸入人体有害，要推广到实际应用中存在一些问题，其应用范围也受到。没从根本上解决血液检验人员包括生产人员身体受到毒素侵害的难题，比如氰化物污染，配制中十六烷基粉末对操作者的污染。

[0002]

发明内容

[0005] 本发明的目的在于克服现有技术之不足而提供一种既能迅速破坏RBC，又不破坏白细胞的型态，且其吸收光谱接近HiCN，物理化学性质稳定的无氰溶血剂，无毒又便于操作。

[0006] 本发明所述的溶血剂中各物质及组分如下：[0007] 在1升溶血剂中：

[0008] 氯化钾 0.8～5.0g[0009] 十二烷基三甲基氯化铵 0～60.0g[0010] 十八烷基三甲基溴化铵 14.0～0g[0011] 异丙醇 6.0～10.0ml

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CN 101907621 ACN 101907625 A[0012]

说 明 书

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碳酸盐或盐酸缓冲液 调PH3.2～5.8[0013] 余为水

[0014] 其中十二烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基溴化铵的加入量为互补，但两者的加入量之和≤60g。

[0015] 本发明所述的碳酸盐或盐酸缓冲液调溶血剂的PH3.2～5.8，是指当前述所加入的各类物质使得溶血剂的PH大于5.8时，用盐酸缓冲液调PH至3.2～5.8；当前述所加入的各类物质使得溶血剂的PH小于3.2时，用碳酸盐缓冲液调PH至3.2～5.8。[0016] 本发明所述的溶血剂适用于HL-系列血细胞分析仪，也可用于其它血细胞分析仪。

[0017] 本发明由于采用上述方案，利用氯化钾与金属离子掩蔽剂的铜铵盐代替，使其与血液反应后，形成稳定的血红蛋白衍生物，且在λ＝0nm，λ＝504nm时，吸收光谱曲线相似，可满足临床检验的需要；同时，试剂中不含氰化物，不含叠氮物，无毒性，能有效改善操作人员的工作环境，降低毒物对人身健康的伤害。具体实施方式

[0018] 本发明将通过以下实施例作进一步说明。[0019] 实施例1。

[0020] 在纯水中分别加入氯化钾3.0g，十二烷基三甲基氯化铵50g，十八烷基三甲基溴化铵8g，异丙醇10ml，溶解，用碳酸盐0.34g调PH在5.3，用纯水定量到一升，过滤。[0021] 实施例2。

[0022] 在纯水中分别加入氯化钾0.9g，十二烷基三甲基氯化铵60g，异丙醇6ml，溶解，用碳酸氢钠调PH在4.5，同时用纯水定量到一升，过滤。[0023] 实施例3。

[0024] 在纯水中分别加入氯化钾2g，十二烷基三甲基氯化铵40g，十八烷基三甲基溴化铵4g，异丙醇9ml，溶解，用碳酸盐调PH为4.0，同时用纯水定量到一升，过滤。[0025] 在纯水中分别加入氯化钾5g，十八烷基三甲基溴化铵14g，异丙醇10ml，溶解，用碳酸盐调PH为5.2，同时用纯水定量到一升，过滤。[0026] 实施例5。

[0027] 本实施例为本发明的应用实施例及与含叠氮物稀释液和含氰化物溶血剂对比。本实施例所用的溶血剂为按实施例1的配比配制的溶血剂。对比组为常规的含叠氮物稀释液和含氰化物溶血剂。

[0028] 本实施例所用的稀释液为：在纯水中分别加入氯化钠6.0g，硫酸钠5.8g，一三二甲基脲0.8g，亚硫酸铜0.2g，乙二胺四乙酸二钠3g，派拉西林钠0.2g，溶解，加入硼酸钠缓冲液调PH为7.3，用纯水定量一升，过滤。[0029] 本实施例所用仪器：HL-系列血细胞分析仪，722型分光光度计；取二十分正常人抗凝血样，两组试剂分别检测二十分标本所得(白细胞.红细胞.血红蛋白.血小板.淋巴细胞.粒细胞)结果进行统计学处理，用t值查P值大于0.5，两者结论无显著差异。[0030] 附表1为含叠氮物稀释液和含氰化物溶血剂应用于血常规检验的检验结果。[0031] 附表2为应用于附表1所用血标本的血常规检验的检验结果。

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CN 101907621 ACN 101907625 A[0032]

说 明 书

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附表3有氰化物和迭氮化物试剂与本发明试剂吸收峰检测对比表。其中A1为有氰化物试剂，A2为本发明试剂，组别为所用的标本号。[0033] 表1

[0034]

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CN 101907621 ACN 101907625 A

说 明 书

4/7页

[0035] [0036]

表2

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CN 101907621 ACN 101907625 A

说 明 书

5/7页

[0037] [0038]

表3

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CN 101907621 ACN 101907625 A

说 明 书

6/7页

[0039] [0040]

续表3

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CN 101907621 ACN 101907625 A

说 明 书

7/7页

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