某二级综合医院临床感染病原菌分布及耐药性分析

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某二级综合医院临床感染病原菌分布及耐药性分析

付改芝，张智州

湖北省襄阳市襄州区人民医院（湖北襄阳441000)

〔摘要〕目的了解某二级综合医院临床常见病原菌的耐药性及其变化趋势，为临床合理应用抗菌药物

提供参考。方法对2012—2014年某院临床分离的病原菌进行回顾性分析，以Kirby-Bauer■法进行药敏试验， 结果按CLSI标准判断，所有数据用WHONET5.4软件分析处理。结果共分离病原菌1158株，其中革兰阴性杆 菌657株，革兰阳性菌439株，真菌62株。革兰阳性菌主要是金黄色葡萄球菌，未发现对万古霉素和利奈唑胺 耐药的菌株，对其他类型的抗生素都有不同程度的耐药。革兰阴性菌主要是肠杆菌科细菌，大肠埃希菌、肺炎克 雷伯菌及铜绿假单胞菌均对头孢呋辛和头孢噻肟耐药，耐药率约85%,耐药率最高的是氨苄西林，大于90%; 耐药率最低的是亚胺培南，其次是哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星，均小于30%。结论本院细菌耐药情况相当 严重，为了防止细菌耐药性的产生，建议临床根据药敏试验结果选药，并且足量、足疗程使用抗菌药物。

〔关键词〕病原菌；抗菌药物；耐药性监测〔中图分类号〕R446. 1 〔文献标识码〕B 〔文章编号〕1002 -2376 (2017) 12 -0061 -02近年来，随着抗菌药物在临床上的广泛应用，细菌耐药 性日趋严重。为了解我院临床病原菌的分布情况及其耐药性 变化趋势，对我院2012—2014年临床分离的病原菌及其对抗 菌药物的耐药情况进行回顾性分析，以期为临床经验用药提 供参考。

科生物工程有限公司。药敏纸片均为英国OXOLD公司产品。 主要仪器有BACTE9120血培养仪（BD公司），二氧化碳培 养箱（长沙华曦公司）。1.2方法

菌株鉴定按《全国临床检验操作规程》（第3版）进行 鉴定。药敏试验采用纸片扩散法（Klrby-Bauer法）进行， 结果按CLSI 2012 -2014版标准判断，质控菌株大肠埃希菌 ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌 ATCC27853由武汉同济医院惠赠。1.3统计学处理

所有数据用WHONET5. 4软件分析处理，计数资料以率表 示，率的比较采用^检验，以^ <〇.〇5为差异有统计学意义。用乙醇消毒，严禁反复穿刺；抽血器和容器必须干燥洁净。 (2)正确处理和保存血样。采集后的血样要尽快分离，不宜超 过2 h;离心机转速控制在1000 ~ 2000 r/min,离心5 ~ 10 min; 血样不能直接放人冷冻室。（3)如有溶血样本出现，应及时 联系临床医师重新采集血样，并对患者及其家属做耐心解释， 以得到理解和支持。

综上所述，溶血现象对临床生化检验结果的影响较大， 严重影响临床医师的临床诊断和评估，应引起足够的重视。 临床医护人员应严格遵循检验标本的采集、运送及检验前、 中、后的操作规程，避免因标本溶血而影响部分生化检验结 果，提高检验结果的可信度，为临床诊断治疗提供可靠依据。

1材料和方法

1.1

材料

选择2012年1月至2014年12月我院临床各科送检的各 类检验标本共11 975份，检出病原菌（含真菌，下同）1158 株。剔除同一患者重复分离菌株。培养液均购自郑州安图绿

收稿日期：

2017 -02-12

3讨论

医院临床血液生化检测中，溶血是比较常见的问题之一, 也是最常见的干扰因素。溶血可分为体内溶血和体外溶血:(1)体内溶血：某些疾病大手术后应激反应、代谢因素、遗 传病、药物的毒素反应或疾病本身存在红细胞破坏现象[2]。 ⑵体外溶血：体外溶血弓丨起的因素有很多，抽血时负压过大、 水浴温度过高、冷冻、剧烈振荡、血液接触表面活性剂等均可造 成标本溶血。此外，采血技术不熟练、采血部位不恰当、止血带 结?La紧、真空采血管负压过大导致血液注人速度过快、血液放 置时间过长、离心转速过快等也可造成体外溶血[3]。

溶血时红细胞遭到破坏，红细胞内的一些物质会释放人 血清，对生化指标造成影响。其影响主要有以下几个方面：(1)有些生化指标在红细胞内外的浓度相差很大，如ALT, AST等在红细胞内的浓度明显高于血清，溶血后上述物质释 放人血清中，导致测定结果偏高；（2)血红蛋白对于蛋白质 分析产生正干扰[4]; (3)血红素对比色分析法的干扰，血红 素中的正铁离子，可被试剂中的氧化剂氧化为黄色的高铁血 红素，对两点比色法造成干扰；（4)在红细胞中存在的非糖 还原物质、有机磷酸酯会随着溶血进人到血清中，从而对检 验结果造成影响[5]。

由于溶血对临床生化指标会产生较大的影响，那么在检 验过程中应尽量避免溶血，根据溶血原因采取相应的对策：(1)规范采血。止血带不能扎的过紧过久；抽血的针头不可

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医疗装备 2017 年 6 月第 30 卷第 12 期 Medical Equipment，Jime. 2017，V〇1. 30，N〇. 12

2 结果

2.1细菌检出情况

2012—2014年共收到各类标本11 975份，共检出各种病 原菌1158株。其中，革兰阳性菌439株，占37.9 %，革兰 阴性菌657株，占56.7%，各类真菌62株，占5. 4%。革兰 阳性菌主要是金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS) 和肠球菌属细菌；革兰阴性菌主要是大肠埃希菌，克雷伯菌 属，铜绿假单胞菌等，主要病原菌分布及构成比见表1。表1 2012—2014年我院主要病原菌分布及构成比[株数（％)](续表)

药物头孢唑啉头孢他啶头孢吡肟头孢呋辛头孢噻肟庆大霉素氨曲南大肠埃希菌

20122013201469.975.281.144.458.353.467.743.333.372.777.888.281.0.476.373.066.747.439.338.141.7肺炎克雷伯菌20122013201468.670.479.258.377.841.243.324.441.270.574.375.6.465.872.266.773.126.838.170.016.7铜绿假单胞菌20122013201481.183.379.153.122.233.333.316.933.388.280.481.276.371.488.943.421.140.1.742.4.7菌种2012 年

2013 年2014 年合计革兰阳性菌179 (46.7)177 (38.9)83 (25.9)439 (37.9)金黄色葡萄球菌55 (14.4)60 (13.2)46 (14.4)161 (13.9)凝固酶阴性葡萄球菌90 (23.5)79 (17.4)11 (3.4)180 (15.5)肠球菌属23 (6.0)25 (5.5)16 (5.0) (5.5)其他细菌阳性菌11 (2.9)13 (2.9)10 (3.1)34 (2.9)革兰阴性菌184 (48.0)257 (56.5)216 (67.5)657 (56.7)大肠埃希菌102 (26.6)139 (30.5)103 (32.2)344 (29.7)肺炎克雷伯菌23 (6.0)46 (10.1)41 (12.8)110 (9.5)铜绿假单胞菌20 (5.2)34 (7.5)26 (8.1)80 (6.9)变形杆菌属8 (2.1)11 (2.4)20 (6.3)39 (3.4)

鲍曼不动杆菌7 (1.8)8 (1.8)6 (1.9)

21 (1.8)其他阴性细菌24 (6.3)19 (4.2)20 (6.3)63 (5.4)真菌20 (5.2)21 (4.6)21 (6.6)62 (5.4)合计

383 (100.0)

455 (100.0)

320 (100.0)1158 (100.0)

2.2主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性

对于金黄色葡萄球菌，耐药率最高的是青霉素，耐药率 最低的是万古霉素和利奈唑胺；对于屎肠球菌，红霉素、左 旋氧氟沙星、利福平和青霉素均耐药，接近80%，耐药率最 低的是万古霉素和利奈唑胺。见表2。

表2 2012—2014年主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性（％)

2012金黄色葡萄球菌

20132012屎肠球菌

万古霉素苯唑西啉16.00.017.60.020140.00.020130.020140.0利福平

80.0左旋氧氟沙星12.86.513.330. 835.578.6复方新诺明34.216.314.271.480.078.0克林霉素71.222.79.4红霉素73.660.725.990.0青霉素92.368.465.683.375.0利奈唑胺0.090.869.465.278.60.00.073.30.0阿米卡星庆大霉素42.910.3四环素50.340.612.10.092.311. 80.057. 1环丙沙星

40.7

52.434.4.355.3.7

83.356.8

71.4

63.666.8

2.3主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感度

革兰阴性菌中肠杆菌科细菌占绝大部分，主要是大肠埃 希菌、肺炎克雷伯菌，非发酵菌中主要是铜绿假单胞菌。大 肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌均对头孢呋辛和头 孢噻肟耐药，耐药率约85%，耐药率最高的是氨苄西林，大 于90%;耐药率最低的是亚胺培南，其次是哌拉西林/他唑 巴坦和阿米卡星，均小于30%。见表3。

表3 2012—2014年主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率（％)咖药物

-------------大肠埃希菌

肺炎克雷伯菌

铜绿假单胞菌 2012 2013 2014

2012 2013 2014 2012 2013 2014 哌拉西林/他唑巴坦~16~11 ~lJ~\"T8~44~7T 2.5 10.6 29.2 阿莫西克拉维酸53.6 58.4 63.047.6 55.3 51.263.0 .8 66.7氨苄西林/舒巴坦 78.9 90.5 85.690.5 80.0 56.346.3 75.0 63.3 左旋氧氟沙星 70.1 62.8 59.762.8 41.4 42.359.7 16.8 52.9阿米卡星 7.1 10.9 17.410.9 34.7 11.417.4 20.3 19.2 环丙沙星________73.8 60.5 .7

60.5 27.8 46.2

.9 25.8 52.5

—62

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氨苄西林95.995.692.594.390.493.392.594.692.1亚胺培南0.00.00.00.00.00.04.65.86.5复方新诺明

77.371.763.6

71.775.968.5

63.680.270.1

3讨论

从本研究结果可以看出，三年来，本院细菌谱基本没有 发生变化，在革兰阴性杆菌中，排在前三位的是大肠埃希菌、 肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌；革兰阳性球菌中，主要是 CNS、金黄色葡萄球菌和肠球菌属细菌。CNS主要从血液中 分离，虽已证实它是真正的病原菌，但多数学者认为，从血 中分离的CNS多为污染菌[1_2]。鉴于此，我们应加强宣传, 严格执行消毒程序，减少污染。对比CHINET中国细菌耐药 性监测网同期数据[3_5],本院细菌谱与CHINET的报道有一 定的差异，这可能与CHINET数据多为大型医院有关。药敏资料显示，万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌有很好 的敏感度，未发现对其耐药的菌株，但对其他类型的抗菌药 物均有不同程度的耐药，特别是对青霉素，其耐药率在90% 以上，临床治疗基本无效。2012—2014年，耐甲氧西林金黄 色葡萄球菌（MRSA)的检出率分别16.0%、17.6%、 30.8%,虽然低于CHINET数据[3 4]，但也呈逐年上升趋势。 MRS菌株对目前所有(3 -内酰胺类抗菌药物临床治疗无效, 对氟喹酮类、氨基糖苷类、大环内酯类等抗菌药物的耐药率 也同时升高[6]。这已是一个非常严重的问题，必须引起临床 以及有关部门的足够重视。

在革兰阴性菌中，主要是大肠埃希菌、克雷伯菌属和假 单胞菌属。它们对亚胺培南保持相当高的敏感度，但是出现 了少数耐亚胺培南的铜绿假单胞菌，必须引起足够的重视。 本研究显示，革兰阴性菌对头孢类抗菌药物都有相当高的耐 药率，建议临床根据药敏试验结果选用抗生素，另外，含酶 抑制剂的药物耐药率也较低，特别是哌拉西林/他唑巴坦，耐 药率小于10%，临床可以考虑选用。

监测数据表明，本院细菌耐药情况已相当严重，为了防 止细菌耐药性的产生，建议临床根据药敏试验结果选药，并 且足量、足疗程使用抗菌药物，一次性杀灭病原微生物，避 免耐药菌株的产生。

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