第８卷第４期 ２ ０ １ ６年７月 雨 阳 理 工 厂手 阮 手广枨 Ｖ ｏ１．ｏ ｌ ｏ．叶 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＮＡＮＹＡＮＧ ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＯＦ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ｊｕ１．２０１６ 鱼腥草中鱼腥草素提取工艺优化 李瑞玲 （黄淮学院化学化工系 河南驻马店摘４６３０００） 要：以鱼腥草素的含量为指标，采用正交设计和气相色谱法，探究了鱼腥草挥发油中鱼腥草素的最佳提取工 艺，并在最佳提取工艺条件下，对不同产地不同部位鱼腥草挥发油中鱼腥草素的含量进行测定。结果表明：鱼腥草 中鱼腥草素的最佳提取条件为：４０℃下对２Ｏ．００００ｇ鱼腥草加水３００ ｍＬ，浸泡９０ ｍｉｎ，提取５ ｈ。不同产地的干品鱼 腥草，鱼腥草素的含量不同，河南鱼腥草叶中鱼腥草素含量最高，贵州茎中含量最高，而湖北鱼腥草的茎和叶中含 量均是最低；对于同一产地的鱼腥草，叶中的鱼腥草素含量是根茎中的１．５—５倍。 关键词：鱼腥草；鱼腥草素；正交设计；气相色谱法 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４—５１３２（２０１６）０４—０１２３—０３ 鱼腥草，因有一般鱼腥味而得名，又名蕺菜、佛 耳草等，为三白草科多年生草本植物，是常用中草药 的一员…。它辛、凉、气腥，具有清热、解毒、利尿、 鱼腥草Ｈｏｕｔｔｕｙ ｃｏｒｄａｔａ Ｔｈｕｎｂ．（三百草科），药 材购于驻马店同仁堂药店，经河南省天方药业有限 公司王世兵博士鉴定。鱼腥草素钠购自于中国药品 消肿、止血、驱咳、镇痛等功能，还可改善毛细管脆 性，促进组织再生。现代研究表明鱼腥草是一种历 生物制品鉴定所（生产批号：１００２４７），其余试剂为 分析纯。 史悠久的集营养、保健、药用功能于一体的传统药食 两用植物，已被国家卫生部正式确定为“药食两用” ２方法与结果 ２．１色谱条件 的品种。在药品、食品、保健用品、保健食品和化妆 品等诸多领域有应用价值 。虽然有文献对鱼腥 草中槲皮素 Ｊ、绿原酸 、甲基正壬酮等含量进行 报道，但对鱼腥草中鱼腥草素的含量分析报道的比 采用ＧｓＢｐ一５（３０ ｎｌ ０．３２ ｍｍ ２５ ｍ）毛细 管色谱柱和ＦＩＤ检测器。程序升温：初温６０℃，停 留１ ｒａｉｎ，以５℃・ｒａｉｎ 升至１１０ ｑＣ，停留２ ｍｉｎ。 较少，据我们的现有文献，仅见两篇文献报道了鱼腥 草中鱼腥草素的含量 。对国内不同区域的鱼腥 草中鱼腥草素含量的分析比较未见报道。 以１℃・ｍｉｎ 升至１３０℃，停留５ ｍｉｎ，以 ４Ｏ℃・ｍｉｎ 升至２４０℃，停留５ ｍｉｎ，进样口温度 本文主要对鱼腥草素提取条件进行优化，建立 测定鱼腥草中鱼腥草素含量测定的方法，并通过此 方法，对国内不同产地鱼腥草不同部位的鱼腥草素 含量进行分析，探讨鱼腥草不同产地和不同部位鱼 腥草素的含量变化关系，以期为更好地利用和开发 鱼腥草提供理论和实验依据。 ２５０℃，检测器温度２８０℃，载气为氮气，进样量 １ Ｌ，不分流。 ２．２对照品溶液制备 取鱼腥草素钠粉末适量，放人９０℃恒温干燥 箱内干燥３ ｈ，后精确称取０．０４９９ ｇ，加入 ０．０１ ｔｏｏｌ・Ｌ 的新配制碳酸钠试液２０ ｍＬ，置冰水 中振摇３０ ｍｉｎ，加乙酸乙酯４ ｍＬ，萃取分层，分取 １仪器与试剂 ＴＲＡＣＥ ＧＣ ＵＬＴＲＡ气相色谱仪（Ｔｈｅｒｍｏ ＳＣＩ． ＥＮＴＩＦＩＣ）；挥发油提取器（郑州市金水区中天化玻 璃仪器厂）；ＤＪ一１２０Ａ电子天平（福州闵衡电子仪 器有限公司）。 基金项目：安徽省省级质量工程项目（２０１４ｚｊｊｈ０６８，２０１５ｔｓｚｙＯ７３） 乙酸乙酯层，经无水硫酸钠干燥后，氮气吹干，残 留物用０．２ ｍＬ甲醇溶解 ，放人冰箱内冷藏， 备用。 ２．３供试品溶液制备 取一定量的鱼腥草茎（或叶）粉碎，过４０目筛， 称取鱼腥草的茎／叶干品细粉２０．００００ ｇ，加煮沸过 作者简介：李瑞玲（１９７９一），女，硕士，讲师，主要研究方向：分析化学及天然产物分离分析。Ｅ・ｍａｉｌ：ｌｉｍｉｌｉｎｇ１２３＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｉｎ 南阳理工学院学报 第８卷 ２ ｈ的蒸馏水Ｃ ｍＬ，４０℃下浸泡Ａ ｍｉｎ，照挥发油 测定法 ，自测定器上端加水使充满刻度部分，再 加乙酸乙酯４ ｍＬ，连接回流冷凝管，缓缓加热至 沸，蒸馏提取挥发油，并保持微沸Ｂ ｈ后，冷却至 室温，静置３０ ｍｉｎ，取乙酸乙酯层，经无水硫酸钠干 燥，用氮气吹干，残留物用０．２ ｍＬ甲醇溶解，放人冰 箱内冷藏，备用（Ａ代表浸泡时间，Ｂ代表提取时间， Ｃ代表加水量，如表１所示）。 ２．４鱼腥草中鱼腥草素的定性分析 用气相色谱仪分别对标准溶液和鱼腥草的茎／ 叶的样品溶液进行采样分析，得到标准溶液与样品 溶液的气相谱图，并对其进行色谱图重叠，发现鱼 腥草中存在鱼腥草素。 ２．５鱼腥草素提取条件的确定 本论文中首先以产自河南的干品鱼腥草的根茎 为研究对象，采取三因素三水平的正交设计实验以 确定鱼腥草中鱼腥草素的提取条件。经标准正交表 优化后如下表所示，在不同的条件下对提取效果进 行测定，比较其效果。 表１正交实验结果 由表１可知，实验８得到的鱼腥草素含量最高， 其峰面积为５５６１０８３。 图１效应曲线图 由图１可知：在４０℃下鱼腥草中鱼腥草素的含 量随浸泡时间的增加而增加，在浸泡时间为９０ ｍｉｎ 时含量最大。当提取时间增加时，鱼腥草素的提取 量出现了先增加后降低的现象，在提取时间为５ ｈ 时，鱼腥草素提取量达到最高，由于鱼腥草素不稳 定，在受热时易被氧化脱羧转化为甲基正壬酮，提取 时间为６ ｈ时，其含量并没有增加，反而出现了下降 趋势，但仍高于提取时间为４ ｈ时的提取量。加水 量增加时，鱼腥草素的提取量并无明显变化，考虑到 节约问题，将加水量定为３００ ｍＬ。综合表１和图１ 确定鱼腥草素的最佳提取条件为：４０℃下浸泡 ９０ ｍｉｎ，提取时间５ ｈ，加水量３００ ｍＬ。 ２．６方法学考察 ２．６．１仪器精密度试验 取鱼腥草素对照品溶液，在２．１节的色谱条件 下，一天内，进样４次，记录保留时间和峰面积，求得 鱼腥草素保留时间的相对标准偏差ＲＳＤ％为 ０．４５％，小于２％；峰面积的相对标准偏差ＲＳＤ％为 ３．０１％，小于５％，说明仪器的精密度较好。 ２．６．２稳定性试验 取鱼腥草素对照品溶液，在２．１节的气相色谱 条件下，每隔１０天用气相色谱仪测一次鱼腥草素的 峰面积，连续测定３次，求得鱼腥草素保留时间的相 对标准偏差ＲＳＤ％为０．２４％，小于２％；峰面积的相 对标准偏差ＲＳＤ％为３．２１％，小于５％，说明对照 品溶液的稳定性较好。 ２．７鱼腥草素的定量分析 表２样品含量测定结果 由表２可知：在鱼腥草的叶子中，产自河南的鱼 腥草中鱼腥草素含量最高，湖北的最低；而在鱼腥草 的茎中，产自贵州的含量最高，湖北的最低；同时由 表２可知，在相同产地不同部位鱼腥草的比较中，发 现叶子中的鱼腥草素的含量均高于茎中鱼腥草素的 含量。 ３ 讨论 合理的选择中草药的提取工艺是保持其疗效的 关键。鱼腥草中所含化合物种类繁多，挥发油的成 分更是高达几十种，提取和分析的难度很大，提取条 件的选择是关键。本文通过不同提取方案的对比得 到一种较好提取条件，即４Ｏ℃下对鱼腥草浸泡 ９０ ｍｉｎ，提取５ ｈ，加水３００ ｍＬ。 本论文对３个不同产地，即湖北、贵州和河南的 鱼腥草中鱼腥草素的含量进行测定对比，为鱼腥草 第４期 李瑞玲：鱼腥草中鱼腥草素提取工艺优化 ・１２５・ 素的合理开发提供依据，并为鱼腥草药材的高效利 ２００８，２６（３）：９６—９９． 用提供了可借鉴性的依据。 ［５］张婷婷，宋敏，杭太俊，等．鱼腥草药材挥发油及其注 射剂中癸酰乙醛的研究考证［Ｊ］．药物分析杂志， 参考文献 ２００８，２８（９）：１４２２—１４２７． ［１］李玲．鱼腥草［Ｊ］．快乐养生，２０１０（２中）：１３． ［６］薛青松．水蒸气蒸馏条件下鱼腥草中癸酰乙醛的高效 ［２］胡凤莲，倪细炉，刘文哲．鱼腥草中总黄酮和槲皮素含 提取及质谱定性［Ｊ］．分析科学报，２０１２，２８（１）：２８ —量的动态变化［Ｊ］．陕西师范大学学报，２００７（ｓ２）：９１ ３１． —９４． ［７］国家药典委员会．中国药典［Ｍ］．４版．北京：中国医 ［３］杨占南，罗世琼，彭全材．贵州不同产地鱼腥草不同部 药科技出版社，２０１５． 位绿原酸的高效液相色谱测定［Ｊ］．时珍国医国药， ２０１０，２１（５）：１０７５—１０７７． ［４］罗世琼，彭全材，柳丹丹．高效液相色谱法测定鱼腥草 （责任编辑：丁雪） 中槲皮素的含量［Ｊ］．江西师范大学学报：自然科学版， ＯＰＴＩＭＩＺＡＴＩＯＮ ｏＦ ＥＸＴＲＡＣＴＩＮＧ ＴＥＣＨＹＮｏＬｏＧ ｏＦ ＨＯＵＴＴＵＹＦｏＮＡＴＥ ＬＩ Ｒｕｉ・ｌｉｎｇ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｕａｎｇｈｕａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｕｍａｄｉａｎ ４６３０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｈｏｕｔｔｕｙｆｏｎａｔｅ ａｓ ｉｎｄｅｘ，ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｔｅｓｔ ａｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｈｏｕｔｔｙｆｏｎａｔｅ ｗｉｔｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ，ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ｓｏａｋｉｎｇ ｔｉｍｅ ａｓ ｆａｃｔｏｒｓ．Ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｈｏｕｔｔｕｙｆｏｎａｔｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ ｏｆ Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｈｏｕｔｔｕｙ— ｆｏｎａｔｅ ｆｒｏｍ Ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ ｗａｓ，ｓｏａｋｉｎｇ ｔｉｍｅ ９０ ｒａｉｎ；ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｉｍｅ，５ ｈ；ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ。３００ｍ１．ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｈｏｕｔｔｕｙｆｏｎａｔｃ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆｒｏｍ ｖａｒｉｏｕｓ ａｒｅａｓ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｇａｎｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｈｏｕｔｔｕｙｎｉａ；ｈｏｕｔｔｕｙｆｏｎａｔｅ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ；ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
