血清心肌肌钙蛋白T及抗心肌抗体在病毒性心肌炎诊断和病程监测中的意义

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血清心肌肌钙蛋白T及抗心肌抗体在病毒性

心肌炎诊断和病程监测中的意义

景宏美1　张克智1

　　摘要　目的:探讨血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、抗心肌抗体(AHA)对病毒性心肌炎(VM)的诊断价值和临床意义。方法:采用酶联免疫测定法和酶染色免疫组化法对58例不同病程的VM患者及30例健康者(对照组)检测cTnT和AHA。结果:VM患者cTnT和AHA的阳性率分别为34.5%和37.9%,随着病程的延长,cTnT的阳性率降低,AHA的阳性率增高。对照组全部阴性。结论:cTnT是心肌细胞急性损伤的指标,对拟诊VM患者联合检测cTnT和AHA,有助于提高诊断的敏感性,为VM的治疗转归和预后提供重要线索。

关键词　病毒性心肌炎　肌钙蛋白T　抗心肌抗体

CardiactroponinTwithantiheartantibodyinthediagnosis

andfollowupofviralmyocarditis

JINGHong-mei　ZHANGKe-zhi

(DepartmentofCardiology,theAffiliatedHospitalofNantong

MedicalCollege,Nantong226001)

　　Abstract　Objective:ToinvestigatethediagnosticvalueandclinicalsignificanceofcardiactroponinT(cTnT)andantiheartantibody(AHA).Method:Serafrom58patientswithviralmyocarditis(VM)ofdifferentclinicaldurationand30healthycontrolswereexaminedforcTnTbyenzymeimmunosorbantassayandAHAbyenzymeimmnohistochemicalmethod.Result:ThepositiveratesofcTnTandAHAinVMgroupwere34.5%and37.9%,andhadadirectcorrelationwiththeclinicalstage.Controlgroupwereallnegative.Conclusion:cTnTwasamarkerofmyocyteacuteinjury.UnitedmeasureofcTnTandAHAcouldincreasesensitivityofdiagnosisforthepatientswithclinicallysuspectedmyocarditisandprovideimportantcluefortreatmentandprognosisofthedisease.

　　Keywords　Viralmyocarditis　TroponinT　Antiheartantibody

　　病毒性心肌炎(VM)是临床常见的心血管疾病,由于临床缺乏特异性表现,常造成诊断困难。其发病机制目前主要认为与心肌细胞的病毒感染及

〔1～3〕

受损心肌引起的免疫病理损伤有关。反映心肌损伤的指标较多,特异性和敏感性各异。我们通过对不同临床病程的VM患者血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、抗心肌抗体(AHA)的检测,来探讨其诊断价值和临床意义。1　对象与方法

1.1病例选择

VM组58例,按1995年全国心肌炎、心肌病会议制定的成人VM诊断参考标准入选,男31例,女27例,年龄16～50(平均35.2)岁,其中病程在6个月以内的38例,>6个月的20例。正常组44例,男30例,女14例,年龄18～48(平均35.2)岁。1.2　方法

1.2.1　cTnT检测:采用BochringerMannhclim公

1南通医学院附属医院心内科(江苏南通,226001)司一步双抗体夹心法酶联免疫吸附试验cTnT测定试剂盒,检测血清中的cTnT浓度(0.2󰀁g/L为正常值上限,>0.2󰀁g/L为阳性。其测定步骤如下:将所有用品预温至25°C,向链霉亲和素包被聚苯乙酰管中加入样品(待测血清/标准血清/质控血清),30min内加入由生物素标记的cTnT特异性俘获单抗溶液(POD10󰀁g/L)按比例100∶1配成的孵育液700󰀁l,25℃孵育30min,洗涤液冲洗2次后,加入底色原液700󰀁l,25℃孵育15min,立即充分混匀后用Biotron815型半自动生化分析仪读取反应产物在405nm的吸光度值。

1.2.2　AHA检测:采用酶染色免疫组化法检测。步骤如下:取正常人心肌(取自暴卒的健康成年男性心脏)超薄冰冻切片,用0.3%H2O2-甲醇封闭内源性过氧化酶活性,1%小牛血清及0.1%羊血清封闭非特异性抗原结合位点。加1∶5被检血清(同时设阳性对照、阴性对照及替代对照),置湿盒在室温下过夜14～18h,加1∶100羊抗人IgG-HRP(中国科学院上海细胞所提供),湿盒37℃2h,在0.04%・114・JClinCardiol(China),Mar2000,Vol16,No3

二氨基联苯胺(DAB)、-0.3%H2O2中显色5～10min。以上各步骤间均以0.01mol/LPBS充分洗涤,最后逐级乙醇脱水、二甲苯洁片、中性树脂封固,镜检。切片中细胞膜或肌原纤维、胞核、胞浆呈棕色者为AHA阳性。1.3　统计学处理

采用󰀂2检验。2　结果2.1　cTnT

正常对照血清cTnT均值为(0.0±0.057)󰀁g/L,血清cTnT水平与年龄无关,男女测值无差异。58例VM患者中cTnT升高20例〔均值(0.49±1.02)󰀁g/L〕,阳性率34.5%,其中病程在6个月以内的38例中16例cTnT升高(42.1%),>6个月的20例中4例cTnT升高(20.0%)。2.2　AHA

正常对照组中无一例阳性,VM组中阳性者22例(37.9%),其中病程在6个月以内的9例(23.7%),>6个月的13例(65.0%)。3　讨论

VM的发病机制至今尚未完全阐明,一般认为在VM病程中,早期病毒感染对心肌的直接损伤和稍后免疫异常引起的心肌损伤是其主要病理过程,临床拟诊心肌炎患者因心肌坏死量少,肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)等常规检验的敏感

性不高,需介入性心内膜活检发现心肌细胞溶解和细胞浸润确定诊断,因此临床希望有非介入性检查帮助确诊。cTnT是存在于心肌肌原纤维细丝上的收缩调节蛋白,是由结构和功能不相同的3种亚单位(cTnT,cTnC,cTnI)组成的蛋白复合物。近年来临床cTnT的研究和应用越来越多,发现其对心肌

4～6〕

细胞损伤的敏感性和特异性均优于CK-MB〔。不仅具有诊断价值,而且可以对临床评定疗效指导

7〕

治疗有意义〔,也可以作为心肌损伤预后的标志之8,9〕一〔。Bachmaier等观察了感染自身免疫性心肌炎大鼠血清cTnT和CK-MB的动态变化,结果提示cTnT的敏感性高于CK-MB,cTnT的阳性率具有明显时间依赖的特点。指出cTnT是反映急性心肌细胞损伤的标志。临床的研究资料表明,对拟诊心肌炎患者测定血清cTnT水平可提供心肌细胞损伤的证据,它优于常规心肌酶谱测定,对无心肌炎组织学证据的病例可以存在心肌细胞损伤,对这些患者通过结合心肌活检标本的免疫组织学分析,常可发现淋巴细胞浸润,表明存在心肌炎,并且随着

〔6〕

心肌炎病程的延长cTnT的敏感性降低。

〔10〕

Rose认为既然在心肌炎晚期和心肌病中很难证实感染性病毒存在,因而自身免疫可能为首要的致病机制。我们也曾作探讨,随着VM病程的延〔1～3〕

长,AHA的阳性率增高,表明病毒感染不仅可以

引起直接的心肌损伤,还可以激活机体免疫系统,诱导机体产生AHA,引起免疫性心肌损伤。本组VM患者病程在6个月以内cTnT的阳性率较AHA高,提示病毒感染对心肌细胞的直接损伤占主导作用,随着病程的延长病毒感染可激发免疫病理过程呈慢性持久的进展,AHA的阳性率较cTnT显著性增高。表明cTnT是心肌细胞急性损伤的指标,AHA也是心肌受累的标志,在一定程度上反映心肌炎的预后,故对临床拟诊VM患者联合检测cTnT和AHA有助于提高诊断的敏感性,为VM的治疗转归和预后提供重要线索。参考文献

1

BachmaierK,MairJ,OffnerF,etal.SerumcardiactroponinTandcreativekinase-MBelevationsinmurine

autoimmunemyocarditis.Circulation,1995,92:1927～1932

KandolfR,

KlingelK,

ZellR,

etal.

Molecular

〔11〕

2

mechanisimsinpathogenesisofenteroviralheart

disease:Acuteandpersistentinfections.ClinImmunol3

Immunopathol,1993,68:153～158

刘颖,廖玉华,董继华,等.肠病毒感染及抗ADP/ATP载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义.临床心血管病杂志,1999,15:106～109

LauerB,NiederauC,KuhiU,etal.CardiactroponinTinpatientswithclinicallysuspectedmyocarditis.JAmCollCardiol,1997,30:13～135956

PerrySV.TroponinT:Genetics,propertiesandfunction.JMuscleResCellMotil,1998,19:575～602LauerB,NiederauC,KuhiU,etal.CardiactroponinTinthediagnosisandfollowupofsuspectedmyocarditis.DtschMedWochenschr,1998,123:409～4177

KhrerK,

EckerM.Experiencewith

cardiactroponinTindifficultcases.EurHeartJ,1998,19(Suppl):38～41

GerhardtW,LjungdahlL.TroponinT:Asensitiveandspecificdiagnosticandprognosticmarkerofmyocardialdamage.ClinChimActa,1998,272:47～579

LindahlB,

P,WallentinL.TheFRISC

experiencewithtroponinT.Useasdecisiontoolandcomparisonwithotherprognosticmarkers.EurHeartJ,1998,19(Suppl):51～58

VengeLangHR,

4

8

10RoseNR.Autoimmunemyocarditis:Conceptsand

questions.ImmunologyToday,1991,12:253～25511景宏美,张克智.血清抗心肌抗体检测在病毒性心肌炎

及扩张型心肌病中的临床意义.南通医学院学报,

1997,17:521～522

(收稿1999-12-23)

(编辑马芳莲)