种子标准发芽试验

种子标准发芽试验

实验二 种子标准发芽试验

种子发芽率是种子质量的四项必检指标之一。正确及时测定种子发芽率对种子分级、种子收购调运、种子贮藏加工、防止发芽力低的种子下田、确定合理的播种量等具有重要意义。本实验的目的是熟悉种子的发芽条件，掌握标准发芽试验的操作技术，以及单子叶幼苗和双子叶幼苗的主要构造、幼苗鉴定标准和结果计算方法，并将实验结果与种子质量标准中发芽率或规定值进行比较，判定种子批质量的优劣。

一、依据

种子发芽需要足够的水分、适宜的温度和充足的氧气，某些植物的种子还需要光照或黑暗。在实验室内，根据不同作物种子萌发所需的外界条件控制发芽所需条件，即根据作物种子种类选择合适的发芽床、适宜的发芽温度及光照（见附录5），保持发芽床适宜的水分，以获得准确、可靠的种子发芽试验结果。

二、试材与设备 1．材料

水稻、小麦、玉米和洋葱等单子叶植物种子，大豆、油菜、辣椒、西瓜等双子叶植物种子。单、

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双子叶植物种子可分别任选1～2种。

2．设备

种子发芽室或光照发芽箱、真空数种器或电子自动数粒仪、恒温干燥箱、发芽盒、吸水纸、消毒砂、镊子、温度计（0～100℃）、烧杯（200mL）、标签纸、滴瓶等。

3．试剂 0.2 % KNO3。 三、方法步骤 1．制备发芽床

大粒种子选砂床或纸间，中、小粒种子选用纸床、砂床均可。鉴定感病样品以及为特定研究目的可采用土壤床。

（1）作为纸床用的发芽纸、滤纸或吸水纸等，应具有一定的强度、质地好、吸水性强、保水性好、无毒无菌、清洁干净，不含可溶性色素或其他化学物质，pH值为6.0～7.5。

（2）砂床一般用无化学污染的细砂或清水砂为材料，使用前过筛（0.80mm和0.05mm孔径的土壤筛），洗涤后放入搪瓷盘内，摊薄，在120～140℃高温下烘3h以上。

2．数取试验样品

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从经过充分混合的净种子中，用数种设备或手工随机数取400粒。通常以100粒为1次重复，大粒种子或带有病原菌的种子，可以再分为50粒、甚至25粒为一副重复。

3．置床

在种子置床前要检查各重复间发芽床的含水量是否适宜、一致，以保证发芽整齐。种子置床时，各粒种子之间留有一定的距离，以保证幼苗的生长空间和减少霉菌的传染。不同作物种子的置床方法如下：

（1）玉米种子：纸间（BP）

（2）小麦种子：纸上（TP）、纸间（BP）。

4．贴（写）标签

在发芽盒底盒的侧面贴上标签（纸卷可直接用铅笔写在发芽纸的上端中间位置），写明样品号码、品种名称、置床日期、重复次数等，并登记在发芽试验记载簿上。

5．入箱培养

根据作物要求把发芽箱调至所需温度，将置床的发芽盒（皿）放在箱内支架上。发芽盒（皿）盖好盖子。幼苗培养室内湿度保持在70%～

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80%。

将小麦、玉米、大豆、甘蓝型油菜和洋葱种子放入发芽箱，在20℃ 恒温、光照条件下培养；水稻、西瓜和辣椒种子放入发芽箱，在30℃ 恒温、光照条件下进行发芽。

6．检查管理

在发芽试验期间，每天检查发芽箱内的温度和发芽床的水分。其要求是：温度保持在规定温度上下不超过1℃ 之间；对发芽床水分不足的，应遵循一致性原则，用滴管或喷壶适量补水，若种粒四周（纸床）出现水膜，则表示水分过多。同时，注意通气和种子发霉情况。使用玻璃培养皿作发芽容器的，注意加盖后的通气情况，特别是大粒种子发芽应当经常揭开盖子充分换气。在检查中发现表面生霉的种子，应取出洗涤后放回原处，发现腐烂种子应取出并记载。严重发霉（超过5%）的应更换发芽床。

7．观察记载

在发芽试验过程中，按计算发芽势（初次计数）、发芽率（末次计数）的规定日期各观察记载一次。如果发芽率的规定日期在7d以上的，应增加记载次数。记载应根据正常幼苗和不正常

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幼苗的鉴定标准，结合该种作物幼苗的形态特征逐一进行观察。在初次和中间记载时，将符合标准的正常幼苗、腐烂种子取出并记录，未达到正常幼苗标准的小苗、畸形苗和未发芽的种子继续留在发芽床上入箱发芽。末次记载时，要把每株幼苗分别取出，对其根系、幼苗中轴、子叶、芽鞘等构造仔细观察鉴定，将正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽的种子、腐烂霉变等死种子分别计数。

初次、末次计数的时间，水稻种子为第5d和第14d，玉米为第4d和第7d，小麦为第4d和第8d，洋葱为第6d和第12d，大豆为第5d和第8d，辣椒为第7d和第14d，油菜为第5d和第7d，西瓜为第5d和第14d。其中，所述天数以置床后24h为1d推算，且不包括种子预处理的时间。如果确认某样品已经达到最高发芽率，也可在规定的时间提前结束试验，而到规定的结束时间仍有较多的种粒未萌发（如包衣种子），也可酌情延长试验时间。发芽试验所用的实际天数应在检验结果报告中写明。

8．结果计算与核对容许差距

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试验结果以粒数的百分率表示。当一个试验的四次重复（每个重复以100粒计，相邻的副重复合并成100粒的重复）正常幼苗百分率都在最大容许差距内（表1），则认为结果是可靠的，以其平均数表示发芽百分率。不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率按四次重复平均数计算。如4次重复间最低和最高发芽率之差超过容许差距（或出现新鲜不发芽种子较多等规定情况），则需做第二次试验。第一次试验结果与第二次试验结果之差未超过容许差距（表2），则填写二次试验结果的平均值；如两者之差超过容许差距，则以同样方法进行第三次试验，填报未超过容许差距的两次结果的平均值。 表1 同一发芽试验四次重复间的最大容许差距

（2.5%显著水平的两尾测定）

平 均 发 芽 率 50% 以上 99 98 97 96 95 93～94 91～92 ～90 87～88 84～86 81～83 78～80 50% 以下 2 3 4 5 6 7～8 9～10 11～12 13～14 15～17 18～20 21～23 最大容许差距 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 7

73～77 67～72 56～66 51～55 24～28 29～34 35～45 46～50 17 18 19 20 （引自农作物种子检验规程GB/T 33.4—1995表3）

表2 同一或不同实验室来自相同或不同送验样

品间发芽试验的容许差距 （2.5%显著水平的两尾测定）

平均发芽率 50% 以上 98～99 95～97 91～94 85～90 77～84 60～76 51～59 50% 以下 2～3 4～6 7～10 11～16 17～24 25～41 42～50 （引自农作物种子检验规程GB/T 33.4—1995表4）

9．结果报告

填写发芽试验结果时，须填报正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率，各百分率修约至最接近的整数，0.5修约进入最大值，其总和应为100%。若其中某项结果为零，则需填入“–0–”。同时还要填报采用的发芽床、温度、试验持续时间以及发芽前的处理方法。

表3 种子发芽试验记载表

样品编号 作物名称 发芽前处理

置床日期 品种名称 发芽床 发芽温度 年 月 日 每重复置床种子数 持续时间 8

记载日记载天 正 不 Ⅰ 重 复 Ⅱ 期 数

小计 表3 种子发芽试验记载表

样品编号 作物名称 发芽前处理 记载日记载天正 硬 新 不 死 正 硬 新 不 死 正 硬 新 不 死 正 硬 新 不 死 9

Ⅰ Ⅱ 置床日期 品种名称 发芽床 发芽温度 年 月 日 每重复置床种子数 持续时间 重 复 Ⅲ Ⅳ 期 数

小 计 正常幼苗 ﹪ 硬实种子 ﹪ 试验结果 新鲜不发芽种子 ﹪ 不正常幼苗 ﹪ 死 种 子 ﹪ 合 计 ﹪ 附加说明： 试验人：

注：

“正”代表正常幼苗；“硬”代表硬实种子； “新”代表新鲜不发芽种子；“不”代表不正常幼苗； “死”代表死 种 子。

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