FcRn 受体在不同日龄ICR 小鼠主要脏器中的表达研究

·基础研究·FcRn受体在不同日龄ICR小鼠主要脏器中的表达研究

杨萌萌1，杨文1，李梦婷1，卢豆豆2，王志昇1（通讯作者）

（1.宁夏医科大学实验动物中心，宁夏 银川 750004；2.宁夏医科大学中医学院，宁夏 银川 750004）

摘要：新生儿Fc受体是识别免疫球蛋白IgG Fc片段的唯一受体。本研究通过western blot，检测了FcRn受体

在不同日龄的ICR小鼠主要脏器的表达。结果表明FcRn在新生小鼠和成年小鼠的肾脏、脾脏、心脏和肌肉中均有表达，且表达量依次递减，差异显著。关键词：FcRn受体；IgG；蛋白免疫印迹

中图分类号：R977.6　　　　文献标识码：B　　　　DOI：10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.17.079

本文引用格式：杨萌萌,杨文,李梦婷,等.FcRn受体在不同日龄ICR小鼠主要脏器中的表达研究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(17):112-113.

0　引言

新生儿Fc受体，它是由两个大小亚基α和β组成的异源二聚体。它是抗体工程领域干预IgG的药用靶标[1]。FcRn与Fc片段的相互作用，可延长蛋白质类药物的作用时间。通过修饰IgG的Fc片段，与FcRn的结合来实现FcRn胞转IgG的作用，并保护循环中的IgG免受降解，延长其半衰期[2]，以达到治疗疾病的作用。本试验通过检测FcRn受体在不同日龄的ICR小鼠主要脏器的表达，进一步构建新型融合蛋白，为后期FcRn介导外源融合蛋白的胞转作用研究提供理论依据。

3　结果

3.1　Western blot检测不同日龄ICR小鼠组织中FcRn的表达情况（见图1-4）。

1　材料

1.1　试验材料

1.1.1　实验动物。5、10、15、25、50、365日龄ICR小鼠，各3只。购自宁夏医科大学实验动物中心。

1.1.2　主要试剂。10% TGX Stain-free Fastcast Acrylamide Kit（美国BIORAD）；Trans-blot Turbo 5×Transfer buffer（美国BIORAD）；FcRn（H-4）抗体（Santa Cruz）；Mouse Anti-GAPDH mAb （中杉金桥）。HRP Goat Anti-Mouse IgG（ABclonal公司）。1.1.3　主要仪器。蛋白垂直电泳系统、半干转、 凝胶成像仪（美国BIORAD）；电子天平（奥豪斯公司）；Tissuelyser-24多样品组织研磨仪（上海净信限公司）。

图1　FcRn在不同日龄的ICR小鼠脾脏中的相对表达量

2　试验方法

2.1　脏器取材。取5、10、15、25、50、365日龄ICR小鼠，称重后麻醉并固定。取肾脏、脾脏、心脏、和肌肉。分装于冻存管中放入液氮罐中保存，用于提取总蛋白。

2.2　脏器的总蛋白提取和检测。取适量采集的组织置于离心管中，加入适量裂解液，混匀，用Tissuelyser-24组织研磨仪进行组织匀浆，12000rpm，4℃离心15min，取上清，分装保存于-80℃。随后蛋白定量并制备蛋白样品。进行Western blot检测。

采用ipwin32软件分析，以GAPDH作为对照，计算目的蛋白条带的灰度值，数据以±s表示，经SPSS 11.5软件进行非参数秩和检验统计分析，P<0.05为差异显著有统计学意义。

基金项目：本󰀁文系国家自然科学基金（31460242）；教育部

“春晖计划”项目（Z2016051）；宁夏医科大学校级项目（XM2016020）

作者简介：杨萌萌󰀁（19-），女，助理实验师；王志昇（1982-），

男，博士，副教授，主要从事寄生虫分子免疫与疫苗研究工作。

投稿邮箱：zuixinyixue@126.com

图2　FcRn在不同日龄的ICR小鼠肾脏中的相对表达量

图3　FcRn在不同日龄的ICR小鼠心脏中的相对表达量

通过western blot试验 ，检测了FcRn受体在不同日龄的ICR小鼠主要脏器的表达，结果如图所示，在46kDa处均出现特异性条带，与预期蛋白大小一致，内参鼠抗GAPDH在39kDa处均出现条带，与预期蛋白大小一致。结果表明FcRn在新生小鼠和成年小鼠的肾脏、脾脏、心脏、和肌肉中

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量达到峰值。其中断奶后期的结果与马永贺[4]报道的成年C57小鼠主要脏器中FcRn的表达情况几乎一致。由于他仅检测了成年C57小鼠一个时期主要脏器的表达情况，与本研究不同，本研究对不同日龄的ICR小鼠进行了检测。献报道[1]，FcRn是一种可以进行适当修饰的治疗性抗体的重要靶标。其在抗体药物领域起到变革性的作用。因此，本研究系统分析FcRn在小鼠不同日龄不同生长阶段体内的表达规律，能够更深入的探明FcRn在动物体内特定组织内的具体功能和运作机制。为进一步构建杆状病毒载体融合蛋白，以及FcRn介导的外源蛋白胞转作用研究奠定基础。

参考文献

图4　FcRn在不同日龄的ICR小鼠肌肉中的相对表达量

均有不同程度的表达。在断奶前期，心脏中FcRn的蛋白表达含量达到峰值。断奶后期，肾脏、肌肉和脾脏中FcRn的表达含量达到峰值。经统计分析10日龄ICR小鼠各主要脏器的FcRn的蛋白表达含量与其余日龄ICR小鼠各脏器的蛋白表达含量差异显著。

[1]　Yuan Wang,Zehua Tian,Diraviyam Thirumalai,and Xiaoying

Zhang.Neonatal Fc receptor (FcRn):a novel target for therapeutic antibodies and antibody engineering[J].Journal of Drug Target,2014;22(4): 269-278.

[2]　Monnet C,Jorieux S,Souyris N,Zaki O,Jacquet A,Fournier

N, Crozet F,de Romeuf C,Bouayadi K,Urbain R,Behrens CK,Mondon P,Fontayne A.Combined glyco- and protein-Fc engineering simultaneously enhance cytotoxicity and half-life of a therapeutic antibody.MAbs.2014;6(2):422-436.[3]　田泽华.FcRn受体在大鼠主要脏器的分布及其药学价值初步评价

[D].陕西:西北农林科技大学,2014.

[4]　马永贺.FcRn胞质尾区序列影响小鼠IgG代谢和转运的研究[D].

北京:中国农业大学,2017.

4　分析与讨论

近年来，在疾病的预防和治疗中，抗体药物的研究在临床的应用中得到了极大的关注。由于FcRn是唯一一种对IgG具有运输及保护作用的受体，因此研究FcRn在生物体内不同阶段的组织器官中的表达情况具有重要的临床意义[3]。

本研究发现在断奶前期，心脏中FcRn的蛋白表达含量达到峰值。断奶后期，肾脏、肌肉和脾脏中FcRn的表达含

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针治疗可对手外伤后期恢复中起到重要作用，可通过操作简便、患者易于接受以及价格低廉等优势，深受临床医生及患者选择上的青睐[4]。刀刃治疗技术，可对肌腱不产生伤害的条件下，对疤痕组织进行松解，同时剥离肌腱表面与黏连的瘢痕组织后，可有效恢复局部应用运输以及血液输送，进而促使肌腱接头变的较细，阻力较小。加上术后对患者进行屈伸训练，不仅减少了黏连的发生，同时对挛缩的肌腱组织长度得以恢复，最终达到复原手指功能的目的。

本次研究结果阐明：我院72例手外伤患者经术后第3个月后的MMDT、PPT、TAM的各个指标情况均显著优于术后第1个月的恢复情况，这与郭文龙在研究报告中相对于术后1个月时，患者术后3个月时的MMDT大幅度缩短，PPT及TAM改善情况更优；同时患者感觉优为56（77.78）%，良为13（18.05）%、差为3（4.17）%，总优良率为69（95.83）%，则显著改善于术后1个月的恢复情况，组间进行比较，差异

有可比性，P<0.05的结果一致。由此可以看出，对于手外伤患者采取刃针治疗方式，可对术后恢复期间，更有利于预防肌腱年龄和关节僵硬的现象，不仅可以改善患者的手部功能情况，同时还可提高患者的生活质量。

综上所述，结合患者的实际手外伤的损伤情况来给予相应的治疗方案，可有效提升外伤后期功能障碍的临床效果，值得临床广泛使用。

参考文献

[1]　张新颖,秦汉兴,赵国平,等.手外伤皮肤软组织缺损皮瓣修复的

效果观察[J].微创医学,2014,9(05):633-634.

[2]　郭文龙.手外伤术后住院患者早期综合康复治疗的疗效[J].临床

医药文献电子杂志,2015,2(07):1275.

[3]　傅国彦,郑盛鸿.刃针治疗手指外伤后期功能障碍临床疗效观察

[J].亚太传统医药,2014,10(07):-90.

[4]　张家娥.手外伤功能障碍的康复治疗[J].临床医药文献电子杂

志,2016,3(40):7943+7946.

投稿邮箱：zuixinyixue@126.com

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