中国临床医学２０１０年２月 第１７卷第１期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１０．Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．１ １３９ 论著 高胆 固醇血症患者血浆对氧磷酯酶１活性变化的研究 蒋兴亮 刘素兰 张 均 王光华 （川北医学院附属医院检验科，四川南充 ６３７０００） 摘要 目的：观察高胆固醇血症（ＨＣ）患者血浆对氧磷酯酶１（ＰＯＮ１）活性的变化及其与高胆固醇血症之间的关系。方法：测 定１０９例高胆固醇血症组患者和６６例对照组患者血浆ＰＯＮ１活性、血脂、氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）水平及丙二醛 （ＭＤＡ）含量，并进行对比分析。结果：高胆固醇血症患者血浆ＰＯＮ１活性（１３８．１±６２．４ｋＵ・Ｌ ）较对照组（１７１．４ ４－６６．２ ｋＵ ・Ｌ ）显著降低（Ｐ＜０．０１）；而ＭＤＡ及ｏｘ－Ｉ ＤＩ 含量（１２．８±３．８／，ｍｏｌ・Ｌ～，５８９．１ ４－１９８．２ ｇ・Ｌ ）均较对照组（９．７±２．３ ｐｍｏｌ・Ｉ ，４５５．１±１７８．２ Ｐｇ・Ｌ。 ）显著升高（Ｐ＜０．０１）。相关分析显示，ＰＯＮ１活性与ＭＤＡ及ｏｘ－ＬＤＬ含量呈显著负相关 （ｒ：一０．４４１，Ｐ＜Ｏ．０１；ｒ＝一０．４０２，Ｐ＜０．０１）。结论：高胆固醇血症患者存在的氧化应激可能导致血浆ＰＯＮ１活性降低。 关键词 高胆固醇血症； 对氧磷酯酶１； 丙二醛； 氧化修饰低密度脂蛋白 中图分类号Ｒ５８９．２ 文献标识码Ａ Ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ Ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ Ｊ ＩＡＮＧ Ｘｉｎｇｌｉａｎｇ ＬＩＵ Ｓｕ— ｌａｎ ＺＨＡＮＧ Ｊｕｎ Ｗ＿ＡＮＧ Ｇｕａｎｇｈｕａ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｔ Ｐ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｎｏｒｔｈ Ｓｉｃｈｕａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ ６３７０００，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ １（ＰＯＮ１）ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｆａｓｔｉｎｇ ｐｌａｓｍａ ＰＯＮ１ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ｏｘ－Ｉ ＤＩ ）ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｌｉｐｉｄｓ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ６６ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ａｎｄ １０９ ｈｙ— ｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ＰＯＮ１ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ（１３８．１±６２．４ ｋＵ・Ｌ。 ）ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌｓ（１７１．４±６６．２ ｋＵ・Ｌ ）（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ＭＤＡ ｌｅｖｅｌ ｉｎ ｈｙｐｅｒｅｈｏｌｅｓ— ｔｅｒｏｌｅｍｉａ（１２．８±３．８／￣ｍｏｌ・Ｌ。 ）ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌｓ（９．７±２．３／￣ｍｏｌ・Ｌ。 ）（Ｐ＜ ０．Ｏ１），ａｎｄ ｓｏ ｄｉｄ ｔｈｅ ｏＸ－Ｉ ＤＩ ｌｅｖｅｌ（５８９．１±１９８．２／＊ｇ・Ｌ ）ｖｓ（４５５．１ ４－１７８．２／＊ｇ・Ｌ ）．Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＭＤＡ（ｒ＝一０．４４１，Ｐ＜０．Ｏ１），ｏｘ－ＬＤＬ（ｒ＝一０．４０２，Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｏｘ— ｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ｐｒｅｓｅｎｔ ｉｎ ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ ｍａｙ ｌｅａｄ ｔｏ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ＰＯＮ１ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ；Ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ １； Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ； Ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ 高胆固醇血症是导致动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏ— 例健康体检者，其中男性４３例，女性２３例，年龄３４ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ａｓ）的危险因素之一。高胆固醇导致体 ～６５岁，平均５５．１±７．７岁。所有受检者均无影响 内自由基代谢平衡失调，脂蛋白极易被自由基及脂 脂肪代谢的疾病（如糖尿病、甲状腺功能减低或肝肾 质过氧化物氧化修饰，其结构和功能发生改变有 功能不全等）；近２个月无急性心肌梗死、心绞痛和 关ｌ１］。对氧磷酯酶１（ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅｌ，ＰｏＮ１）是肝脏 脑血管意外，血压稳定在正常水平；至少１个月内未 合成和分泌的一种能够水解脂质过氧化物的抗氧化 用过降脂药、抗血小板药及钙离子拮抗剂。 酶＿２］，本研究测定高胆固醇血症患者ＰＯＮ１活性及 １．２ 方法 血脂、氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘ—Ｉ ＤＬ）和丙二醛 １．２．１标本收集所有受检者禁食１２ ｈ，于清晨 （ＭＤＡ）水平，了解Ｐ０Ｎ１活性在高胆固醇血症患者 采集静脉血液，肝素抗凝，分离血浆，置一２０℃保存 中的变化及与高胆固醇血症之问的关系。 备检。 １资料与方法 １．２．２ 血浆ＰＯＮ１活性测定 以对氧磷为底物， １．１ 研究对象２００７年１０月一２（）０８年１０月在我 通过测定对氧磷的水解产物对硝基苯酚的产生速率 院门诊就诊的高胆固醇（ＴＣ）［血浆ＴＣ≥６．２２ 来计算ＰＯＮ１活性 ］。 ｍｍｏｌ・Ｌ，三酰甘油（ＴＧ）＜１．７０ ｍｍｏｌ・Ｌ ）］ １．２．３血浆ＭＤＡ测定 用硫代巴比妥酸法。试 患者１０９例。其中男性７１例，女性３８例，年龄３５ 剂盒由南京建成生物工程公司提供。 ￣６９５７．８±８．１岁。正常胆固醇［血浆ＴＣ＜５．１８ １．２．４血浆ｏｘ—ＬＤＬ的测定 用单抗ＥＬＩＳＡ法。 ｍｍｏｌ・Ｉ ，且低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ—Ｃ）＜ 试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供。 ３．３７ ｍｍｏｌ・Ｌ～，ＴＧ＜１．７０ ｍｍｏｌ・Ｌ ｆ组为６６ １．２．５ 血脂测定 采用酶法测定ＴＧ、ＴＣ，用一步酶 １４０ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１０．Ｖｏ１．１７，Ｎｏ．１ 中国临床医学２０１０年２月 第１７卷第１期 法分别测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤ ｃ）及低密度 脂蛋白胆固醇（Ｉ ＤＬ—Ｃ），透射免疫浊度法分别测定载 自由基（ＯＦＲ）生成增加，通过损伤血管内皮细胞结 构及功能，诱导血管内皮细胞粘附分子基因表达，促 进局部炎性反应和细胞增殖，增强白细胞与内皮细 胞的粘附，灭活一氧化氮（ＮＯ）生物活性，从多方面 作用参与Ａｓ的发生发展。本研究采用ＭＤＡ及 脂蛋白Ａ（ａｐｏＡ）、载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）和脂蛋白（ａ）［ＬＰ （ａ）］。试剂盒由浙江东瓯生物工程公司提供。所有 生化项目均在日立７１７０Ｓ生化分析仪上完成。 １．３ 统计学处理 数据以均值±标准差（ ±ｓ）表 示。两样本均数的比较采用独立样本ｔ检验，采用直 Ｏｘ—ＬＤＬ作为评价高胆固醇血症氧化应激的指标， 检测ＭＤＡ及ＯＸ ＬＤＬ水平可间接反映体内过氧化 物的水平及受氧化损伤的程度。结果显示，高胆固 线相关分析法进行相关分析。应用ＳＰＳＳ １０．０软件 包进行统计学分析。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２ 结 果 ２．１ 高胆固醇血症组和对照组血脂水平的比较 高胆固醇血症组ＴＣ、ＬＤＬ—Ｃ浓度显著高于对照组（ Ｐ＜０．０１），Ｉ Ｐ（ａ）、ａｐｏＢ高于对照组（Ｐ＜０．０５）， 其他血脂指标差异无统计学意义（表１）。 表ｌ高胆固醇血症组与对照组血脂水平的比较 ±ｓ） 注：与对照组比较， Ｐ＜Ｏ．０５，～Ｐ＜Ｏ．０１ ２．２ 高胆固醇血症组与对照组血浆ＰＯＮ１、ＭＤＡ、 ＯＸ～Ｉ ＤＬ的水平 高胆固醇血症组患者血浆ＰＯＮ１ 活性显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），而血浆ＭＤＡ、ＯＸ— ＬＤＬ水平显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）（表２）。 表２ 高胆固醇血症患者血浆ＰＯＮ１、ｏｘ—ＬＤＬ、ＭＤＡ ±ｓ） 注：与对照组比较， Ｐ＜（）．０５ ２．３ 高胆固醇血症患者血浆ＰｏＮ１与ＯＸ—ＬＤＬ、 ＭＤＡ的关系ＰＯＮ１分别与血脂、ＯＸ～Ｉ…ＤＩ ＭＤＡ 进行直线相关分析，结果显示ＰＯＮ１活性与ＭＤＡ （ｒ 一０．４４１，Ｐ＜０．０１）及ＯＸ—ＬＤＬ（ｒ＝一０．４０２， Ｐ＜０．０１）呈显著负相关，与血脂无相关性。 ３讨 论 高胆固醇血症通过多种机制诱导心脑大血管和 微血管系统的致炎症和致血栓状态、氧化应激损伤、 损害血管内皮细胞代谢和功能，最终导致Ａｓ的发 生和发展 。高胆固醇血症时抗氧化能力下降，氧 醇血症患者血浆ＭＤＡ及ｏｘ－ＬＤＬ水平较正常对照 组显著升高（Ｐ＜０．ｏ１），提示在高胆固醇血症状态 时体内氧化与抗氧化的平衡被破坏，导致脂质过氧 化物的聚积。 本研究结果显示，高胆固醇血症组患者血浆 ＰＯＮ１活性较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１），且ＰＯＮ１ 活性与ＭＤＡ水平及ＯＸ—ＬＤＬ水平呈显著负相关（Ｐ ＜０．（）１）。ＰＯＮ１作为一种抗氧化酶，与体内其他抗 氧化酶或物质一样，在水解过氧化物的过程中活性 逐步下降，机体抗氧化能力降低，使其直接参与血中 脂质过氧化物的水解能力减弱，不能有效清除过氧 化物，特别是脂质过氧化物。过氧化物使ＬＤＬ、 ＨＤＩ 发生氧化修饰，其结构和功能发生改变，尤其 是低密度脂蛋白氧化后，通过多种机制可引发及促 进Ａｓ病变，这是Ａｓ的始动和关键环节－５］。因此， 在高胆固醇血症的治疗中，不仅要加强血脂的调节， 而且应重视提升包括Ｐ０Ｎ１在内的机体的抗氧化 能力。 总之，高胆固醇血症患者产生大量的过氧化物， 使包括ＰＯＮ１在内的抗氧化酶活性降低，导致机体 的抗氧化能力下降，氧化与抗氧化平衡被打破，最终 对机体造成不利影响。 参考文献 Ｉ Ｔａｎｉｙａｍａ Ｙ，Ｇｒｉｅｎｄｌｉｎｇ ＫＫ．Ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｖａｓ— ｃｕｌａｔｕｒｅ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ， ２００３，４２（６）：１０７５—１０８１． ２ Ｍａｃｋｎｅｓｓ Ｂ，Ｈｉｎｅ Ｄ，ＭｃＥｌｄｕｆｆ Ｐ，ａｔ ａ１．Ｈｉｇｈ Ｃ ｒｅａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｌｏｗ ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ １ ｉｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ ａｓ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｈｅａｒｔ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００６，１８６（２）：３９６—４０１． ３蒋兴亮，龚国忠，周京国，等．血浆对氧磷酯酶１活性在各类肝损 害病程中的变化及意义［Ｊ］．中国临床医学，２００６，１３（４）：５８４～ ５８６． ４ Ｋｉｔａｙａｍａ Ｊ，Ｆａｒａｃｉ ＭＲ，Ｌｅｎｔｚ ＳＲ，ｅｔ ａ１．Ｃｅｒｅｂｒａｌ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｙｓ～ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒ０１ｅｍｉａ［Ｊ］．Ｓｔｒｏｋｅ，２００７，３８（７）： ２１３６ ２１４１． ５ Ｓｈｉｍａｄａ Ｋ．Ｍｏｋｕｎｏ Ｈ．Ｍａｔｓｕｎａｇａ Ｅ．ｅｔ ａ１．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ——ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ａｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ ｆｏｒ ｃａｒｄｉａｃ ｅ’。 ｖｅｎｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｒｏｎａｒｙ ａｒｔｅｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏ～ ｓｉｓ．２００４．１ ７４（２）．３４３．３４７
