２０１２年３月第２卷第５期 ・药品鉴定・ 雷公藤提取物溶解性能的测定方法研究 吴金华 上海五洋药业健康产品有限公司，湖南株洲４１２０００ 【摘要】目的探讨中药雷公藤提取物溶解性能的测定方法。方法运用沉淀法、指标成分溶解量法及粒径法测定雷公藤 提取物的溶解性能。结果采用的３种方法可以达到趋势相同的药物溶解性能的变化。结论雷公藤提取物的３种测定 方法都可以达到符合要求的溶解性能。 ｆ关键词】中药；提取物；溶解性能；分析 【中图分类号】Ｒ２８４．２ 【文献标识码】Ｂ 【文章编号】２０９５—０６１６（２０１２）０５—１０３一Ｏ２ 中药标准化提取物是指采用现代科学技术对传统中药材 分析仪器有限公司）；流动相为乙腈一水（２３：７７）：流速 进行提取加工，而得到的一种具有相对明确药效物质基础以及 １．０ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温３Ｏ℃；检测波长２１８ ｎｍ。（２）对照品溶液的 严格质量标准的中药产品，可作为中药或其他制剂（如保健品、 制备：精密称取恒重的雷公藤甲素对照品９．６ ｍｇ，置１０ ｍＬ量瓶 功能性食品、化妆品等）的原料产品…。本研究采用沉淀法、指 中，用无水乙醇溶解并定容至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液 标成分溶解量法及粒径法对雷公藤提取物的溶解性能进行 １ ｍＬ置１０ ｍＬ量瓶中，用无水乙醇定容至刻度。精密吸取 测定。 １ ｍＬ置２ ｍＬ量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，作为对照品溶 １仪器与试药 液。（３）制备方法：准确量取雷公藤饮片水提液ｌ０ ｍＬ于蒸发 １．１仪器 皿中，水浴浓缩，拌入８ ｇ层析用中性氧化铝（Ａ１：０，），混合均匀， 电子天平（ＨＥ２５Ｄ，上海澳邦电子器材有限公司）；离心 水浴蒸干，装入含１０ ｇ中性Ａ１ ０，层析柱中，氯仿洗脱，洗脱速 机（ＨＫＬ一１００，北京创维电子科技有限公司）；数显鼓风干燥 度控制在２～３滴／ｓ。收集中段洗脱液，于７５～８５℃水浴 箱（志胜烘箱设备有限公司，ＺＳ８８１－６）；超声波清洗器（ＭＫＯ一 蒸干氯仿，残渣用２ｍＬ流动相溶解，超声处理５ ａｒｉｎ，用０．４５ ｍ ４００，吴江市长波科技有限公司）；激光粒度仪ｆ上海黄光医用 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。（４）线性关系考察： 仪器公司，ＬＳ—ＰＯＰ（６）］；高效液相色谱仪（深圳正大联创公司， 分别精密吸取对照品溶液２、４、８、１０、１２、１４Ｉ．ＬＬ，按上述色谱条 ＺＮ——Ｄ１３５Ｍ—－３Ｗ ｏ 件测定，以浓度ｃ为横坐标，峰面积Ａ为纵坐标，进行线性回 １．２试药 归，得标准曲线：Ａ＝４３．７０８Ｃ＋１２．７９６，ｒ＝Ｏ．９９９７（ 。线性范 异丙醇（上海汉光化学试剂有限公司，２００７０５２４）；无水乙 围为９．６～６７．２ ｇ／ｍＥ。 醇（上海慈太龙实业有限公司，８６１２０８３５０６）；肉豆蔻酸异丙酯 ２．１．３粒径测定法分次称取雷公藤提取物ｏ．２ ｇ，分别加入５ ｍＬ （ＩＰＭ，北京化学试剂有限公司，２０１４８６３６）；甘油（威海市孜稀 的水、无水乙醇、异丙醇、油酸、ＩＰＭ、甘油中，３０℃超声溶解 化工厂，０６１３０２２９）；蒸馏水（自制）；油酸（威海市孜稀化工厂， ２０ ｍｉｎ，测定粒径。 ０８０４０５６）；雷公藤提取物（菏泽市生物制品有限公司，０８０７３）； ２．２结果 雷公藤甲素对照品（国家药品检验所，２２２５６９ ｏ ３种方法测定雷公藤提取物的溶解能力依次为：沉淀法： ２方法与结果 甘油＜水＜ＩＰＭ＜油酸＜异丙醇＜无水乙醇。指标成分溶 解量法：甘油＜水＜ＩＰＭ＜油酸＜异丙醇＜无水乙醇。粒 ２．１ 方法 径测定法：异丙醇＜无水乙醇＜油酸＜ＩＰＭ（水和甘油仪器 ２．１．１ 沉淀法利用沉淀反应，将被测组分转化为难溶物，以 不能测出）。３种测定方法表达的药物溶解性能变化趋势基 沉淀形式从溶液中分离出来，并转化为称量形式，最后称定其 重量进行测定的方法。操作步骤：取样一溶解一加沉淀剂使其 本相同。 沉淀一过滤一洗涤一千燥至恒重一称量一计算。计算公式为： ３讨论 若称量形式与测定组分相同，称量形式的称量值为ｗ，样品重 沉淀法是在中药提取液中加人一些试剂或溶剂，使某些成 为ｓ，则含量百分率的计算式为：含量（％）＝Ｗ／Ｓ×１００％。具体 分的溶解度降低而沉淀，进而将所要成分与杂质分离的方法。 方法：将雷公藤的提取物分别称重Ｏ．５、０．６、０．６、０．７、０．８、０．７ ｇ， 根据不同的实验试剂可以有以下几种方法：水醇沉淀法、醇提 分别放人６ ｍＬ的水、无水乙醇、异丙醇、油酸、ＩＰＭ、甘油，３０％ 水沉法和铅盐沉淀法。中性醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基和 超声溶解２５ ｍｉｎ，放至常温后滤过离心，沉淀物烘干达到恒重 羧基的成分；碱式醋酸铅的沉淀范围较广，可沉淀含酚羟基和 的水平。 羧基及中性皂苷等。酸碱沉淀法：酸提取碱沉淀用于生物碱的 ２．１．２指标成分溶解量法 雷公藤甲素是雷公藤提取物中的 提取分离；碱提取酸沉淀用于酚、酸类成分和内酯类成分的提 主要有效成分，以此为指标物质分析测量在不同的溶剂中的溶 取、分离。专属试剂沉淀法：某些试剂能选择性地沉淀某类成 剂性能，提取物为雷公藤作为实验物质。（１）色ｌ谱条件：色谱柱： 分，称为专属试剂沉淀法。如雷氏铵盐能与水溶性生物碱类生 Ｅ１７１５１１ １０不锈钢柱（５ ｎｌ，４．６ ｍｍ ｘ ２５０ ｍｍ，大连依利特 （下转第１０５页） ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＰＨＡＲＭＡＣＹ十一‘药舛荸１０３ ２０１２￣－３月第２卷第５期 ・药品鉴定・ 表２ 白芍原植物各居群根横切面特征 ２．２根部解剖特征 原植物的居群花色及根形态解剖进行研究，得出其产地、居群 对白芍根切片的显微镜观察结果进行分析，并比较不同的 花色与植物根形态解剖之间的关系，为今后药物的鉴别及相关 居群。其基本属性如下，原植物根的横切面属类圆形，木栓细 研究提供了鉴定方法和参考数据。 胞数列，呈长方形，排列紧密且呈切向延长。植物的皮层有大 【参考文献】 量的薄壁细胞组成；形成层镜下呈微波状环或波状环；维管束 ［１］周学刚，张丽萍，王艳芳，等．白芍原植物的传粉特性研究【ＪＪ．中国农学通 属于外韧维管束，薄壁细胞组成次生韧皮部。薄壁细胞中含有 报，２０１０，２６（１４）：３２２—３２３． 大量的淀粉粒和草酸钙簇晶ｌ ５ｌ。 ［２］李雪莲，来平凡．白芍品种的本草学研究及现代实验研究【Ｊ１．亚太传统医 白芍的１０个居群原植物的横切面的显微镜观察结果显示， 药，２００８，４（０５）：３６—３７． １０个居群的镜检结果主要区别在于木质部的排列形式上，原植 ［３］查良平，杨俊，彭华胜，等．四大产地白芍的种质调查咖．中药材，２０１１，７ 物为芍药的６个居群基本上呈现两个不相连的扇形中央导管 （９）：２１２—２１３． 群，且呈狭长连续排布到木质部。各居群的特点具体分布情况 【４］程周旺，方建新．安徽黄山市野生毛茛科中草药植物资源与开发利用【Ｊ】． 见表２。 现代中药研究与实践，２００６，２０（１）：３２１—３２２． ［５】杭悦宇，陈丙銮，黄春洪，等．传统中药白芍原植物分类鉴定及根形态解剖 ３讨论 研究ｆＪ１．热带亚热带植物学报，２００４，１２（３）：２２１—２２５． 白芍是我国的传统药材，其原植物的产地及属性对其药用 ［６］吴晓明，何伯伟，胡红强．影响白芍芍药苷含量的几个关键因子初探［Ｊ］． 效果有很大的影响１６１。由于中药材的产地和原植物存在着很 浙江农业科学，２００８，４：４２５—４２６． 大的差异，即便是一种药材，其产地和原植物也不尽相同。这 ［７］关媛媛，刘念，张凌．白芍及其炮制品中ｌ２种元素次级形态分析研究［Ｊ１． 些因素势必对药物的属性及疗效有一定的影响 １。药物的鉴 江西中医学院学报，２０１０，２２（３）：１４５—１４６． 别对于药物的临床应用具有十分重要的意义。本资料从药材 （收稿日期：２０１２—０２—１３） （上接第１０３页） 此有必要采用一定的方法取样 。为使取样具有代表性，应当 成沉淀，可用于分离水溶性生物碱与其他生物碱；胆甾醇能和 有适当的取样量。该法相对繁琐，需要对连续相黏度、分散相 甾体皂苷沉淀，可使其与三萜皂苷分离；明胶能沉淀鞣质，可用 的折射率等参数进行查阅或考察。 于分离或除去鞣质等。盐析法：于中药水提取液中加入某些无 本研究运用３种方法测定雷公藤提取物的溶解性能，结 机盐至一定浓度或达到饱和状态，可使某些成分由于溶解度降 果基本一致，表明运用沉淀法、指标成分溶解量法及粒径法 低而沉淀析出。常用的无机盐有ＮａＣ１、Ｎａ ＳＯ 等１２１。指标成 对中药提取物的溶解性能测定均具有一定的代表性。 分溶解法精密度高，是常用的含量测定方法，主要通过测定提 【参考文献］ 取物中的指标成分的在不同溶剂中的溶解量间接反映其在不 【１】曹伟平，杨更亮，张红，等．雷公藤有效成分制备的研究进展【Ｊ】．中草药研 同溶剂中的溶解性能。粒径测定法主要是通过向一定量各溶 究，２０１０，３３（２）：８７． 剂中加入等量溶质使溶解，再进行混悬液的粒径测定，根据混 【２】郑黎可，刘顺成，何洪涛，等．雷公藤饮片中雷公藤内酯醇的含量的实验方 悬液粒径分布间接反映溶质在不同溶剂中的分散情况，即溶解 法探讨ＩＪ１＿中国生物技术，２０１０，２７（１０）：６８６—６８７． 特性。测定粒子大小时要注意对粒子大小进行分析前对样品 【３】董建考，何书涛．柴胡注射液提取过程控制与操作事务分析【Ｊ】．中国医院 的合理选择和处理是得出正确结论的基础。在选取样品时，由 管理，２０１０，３７（４）：２７． 于粉体因储存条件的变化或转移可能导致粒子的分布不均，因 （收稿日期：２０１２—０２—０９） ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＰＨＡＲＭＡＣＹ十一仨药斜等１ ０５