一、实验目的和要求
学习水样的采取和水样中细菌总数测定的方法;了解和掌握平板菌落计数的原则。 二、实验原理
水中细菌学检查,包括检查水中细菌的数量与种类。实际应用中较普通的是:水中细菌总数检测与大肠菌群检测,用于标志水被污染的程度。
细菌总数是指1g或1ml检样,经过处理,在一定条件下作细菌培养后,所得细菌菌落总数。我国饮用水的卫生指标规定:细菌总数小于100个/mL。本次实验用倾注平板法测定水样中细菌总数。 三、实验用具
检样、营养琼脂培养基,灭菌三角烧瓶,灭菌培养皿,灭菌试管,灭菌移液管、高压灭菌器、电热板、恒温培养箱、电子天平等。 四、实验步骤
1、水样的采取
(1)自来水 水龙头用火焰烧3min,打开水龙头,水流3min后,无菌烧瓶接水样。 (2)池水、河水或湖水 距岸5m处,用无菌空瓶取距水面10~15cm的深层水样,取样后立即检验,如2h内不能检查,放入冰箱保存。
2、测定
(1)按无菌操作法,将水样作10倍系列稀释
(2)根据对水样污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,吸取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度作3个重复。
(3)将熔化后保温在50℃左右的营养琼脂培养基倒平皿,并混匀。 (4)37℃恒温箱,倒置培养24h,进行菌落计数。 3、菌落计数方法
细菌总数(个/ml)= 稀释倍数×菌落数 五、注意事项
稀释水样时,注意无菌操作,移液管不要混用。 六、实验结果及分析
根据实验记录结果,并评价是否合乎饮用水标准?对结果作分析讨论.
稀释度 检样 10的检样
-1
平均菌落数(个)
自来水的细菌总数(个/ml)
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