氨基酸态氮测定

1 仪器

a) 酸度计：附磁力搅拌器； b) 碱式滴定管：25mL； c) 移液管。 2 试剂

a) 甲醛溶液：37％～40％；

b) 0.05mol/L氢氧化钠标准滴定溶液：按GB/T 601规定的方法配制和标定，如下： 氢氧化钠标准滴定溶液 1）配 制

称取110 g氢氧化钠，溶于100 ml无二氧化碳的水中，摇匀，注人聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。按表1的规定，用塑料管量取上层清液，用无二氧化碳的水稀释至1 000mL，摇匀。

表1

氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c(NaOH)]/( mol/L) 氢氧化钠溶液的体积V/mL

1 54 0. 5 27 0.1 5.4

2）标定

按表2的规定称取于105℃--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾，加无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液(10 g/L)，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30 s。同时做空白试验。

表 2

氢氧化钠标准滴定溶液的 工作 基 准 试 剂 无二氧化碳水的体积V/mL 浓度[c(NaOH)]/(mol/l.) 邻苯二甲酸氢钾的质量，m/g

1 7.5 80 0.5 3.6 80 0.1 0.75 50

氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c(NaOH)]，数值以摩尔每升(mol/ L)表示，按式(1)计算:

c(NaOH)=m×1 000/(V1-V2)M …….………………… (1)

式 中 :

m— 邻 苯二甲酸氢钾的质量的准确数值，单位为克(g); V1— 氢 氧化钠溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);

V2-一 空 白试验氢氧化钠溶液的体积的数值，单位为毫升(mL);

M一 邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)[M(KHC8H404)= 204.22 ]。

3 分析步骤

吸取5.0mL样品，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL，置于200mL烧杯中，加水60mL水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=0.05mol/L]滴定至酸度计指示pH＝8.2[记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）的毫升数，可计算总酸含量]。

加入10.0mL甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）继续滴定至 pH＝9.2, 记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）的毫升数。

同时取80mL水，先用氢氧化钠溶液（0.05mol/L）调节pH为8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05mol/L）滴定至pH=9.2，同时做试剂空白试验。

4 计算

X4=[(V4-V3)×C3×0.014] ×100/V5×(5/100)

式中：

X4—— 样品中氨基酸态氮的含量（以氮计），g/100mL;

V4—— 滴定样品稀释液消耗0.05mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL; V3 —— 空白试验消耗0.05 mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体, mL;

C3—— 氢氧化钠标准滴定溶液浓度，mol/L;

V5—20ml

0.014 —— 1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)＝1.000mol/L] 相当于氮的质量，g。

5 允许差

同一样品平行试验的测定差不得超过0.03g/100mL