非小细胞肺癌中GRIM-19和HMGN5的表达及其临床意义

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·临床研究·

非小细胞肺癌中GRIM-19和HMGN5的表达及其临床意义

刘瑞振,孔摇易,张金平,张志鹏,石晓鹏摇(武安市第一人民医院,河北摇武安摇056300)

[摘摇要]摇目的:研究非小细胞肺癌中诱导细胞凋亡相关基因19(geneassociatedwithretinoid/interferoninducedmortality19,GRIM-19)联合高迁移率蛋白5(highmobilitygroupprotein5,HMGN5)的表达及其与临床各病理学特征间的关系。方法:应用免疫组织化学技术检测67例非小细胞肺癌组织和39例远端正常组织(距癌灶>5cm)中GRIM-19、HMGN5的表达情况,并分析其与各临床病理特征之间的可能关系。结果:67例非小细胞肺癌组织中,GRIM-19阳性表达率为53郾7%,低于在远端正常组织中的表达(P<0郾01);HMGN5阳性表达率为59郾7%,高于在远端正常组织中的表达(P<0郾01)。非小细胞肺癌组织中GRIM-19、HMGN5的表达可能有相关性(P<0郾01)。结论:GRIM-19、HMGN5在非小细胞肺癌中有不同程度的表达,可能与非小细胞肺癌发生、发展有关;临床检测非小细胞肺癌中GRIM-19、HMGN5的表达,可能为治疗非小细胞肺癌提供新的理论研究基础和思路。

[关键词]摇非小细胞肺癌;细胞凋亡相关基因19;高迁移率蛋白5

ExpressionofGRIM-19andHMGN5inhumannon-smallcelllungcanceranditsclinicalsignifi鄄cance摇摇LIURui-zheng,KONGYi,ZHANGJin-ping,etal(Thefirstpeople忆sHospitalofWuan,Wuan,056300,China)

Abstract:ObjectiveTostudytheexpressionofgeneassociatedwithretinoid/interferoninducedmortality19(GRIM-19)andhighmobilitygroupprotein(HMGN5)inhumannon-smallcelllungcancerandtheirrelationshipswithclinicalpathologi鄄and39casesofdistalnormaltissues(morethan5cmfromthecancerfocus)weredetectedbyimmunohistochemicaltech鄄calcharacteristicsofthecancer郾MethodTheexpressionofGRIM-19andHMGN5in67casesofnon-smallcelllungcancernique郾Thecorrelationsbetweentheexpressionandtheclinicopathologicalfeaturesofthecancerwereanalyzed郾ResultsThepositiveexpressionrateofGRIM-19in67casesofnon-smallcelllungcancertissueswas53郾7%,theexpressioninnon-smallcelllungcancertissuewerelowerthanexpressioninthedistalnormaltissues(P<0郾01);AndthepositiveexpressionrateofHMGN5was59郾7%,theexpressioninnon-smallcelllungcancertissuewerehigherthanexpressioninthedistalnormaltis鄄19andHMGN5wereexpressedinvariousdegreesinnon-smallcelllungcancer,andmaybeassociatedwiththeprimarymulti鄄providetheoreticalbasisforreasonableindividualchemotherapyscheme郾

KeyWords:Non-smallcelllungcancer;GRIM-19;HMGN5

sues(P<0郾01)郾TherewastherelationshipbetweentheexpressionofGRIM-19andHMGN5(P<0郾01)郾ConclusionGRIM-drugresistanceofthecancer郾TheclinicaldetectionofGRIM-19andHMGN5inhumannon-smallcelllungcancercanhelpto

摇摇肺癌是呼吸系统最常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类健康和生命的一种疾病,发病率及死亡率呈不断上升趋势,治疗效果相对较差,5年生存率低[1]。肺癌中最常见的为非小细胞癌,而它的发生发展是多基因共同的过程,其侵袭以及转移机制可能与多种细胞因子相关[2-3]。本研究采用免疫组化S-P法检测GRIM-19和HMGN5在非小细胞肺癌石蜡组织及远端正常肺组织中的表达情况,分析其组织的表达与临床病理特征间的关联性,为非小细胞肺癌的分子治疗提供新的靶点,也为延长肺癌患者的生存时间提供新的研究理论基础和思路。

1摇资料与方法

1郾1摇一般资料:选取我院2012年6月~2017年6月在胸外科手术切除的标本并经病理确诊为非小细胞肺癌,共67例,男35例,女32例,年龄45~78岁,平均(63郾5依6郾6)岁。癌灶岁,平均(60郾3依5郾5)岁,两组患者在一般资料方面差异无统计学意义(P>0郾05)。患者均为首次发现的肿瘤,且术前均未进行过放疗及化疗。

1郾2摇试剂与方法:鼠抗人HMGN5单克隆抗体、鼠抗人GRIM>10cm的远端正常组织39例,男22例,女17例,年龄49~71

基金项目:邯郸市科技技术支撑项目[项目编号:1623208122ZC]通讯作者:石晓鹏

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-19单克隆抗体和DAB显色剂购于北京中杉金桥生物技术有

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2郾2摇HMGN5、GRIM-19非小细胞肺癌中的表达与临床病理特征间的关系:非小细胞肺癌中HMGN5的表达与分化程度相关,高、中分化组阳性表达率为48郾9%(22/45),低分化组阳性表达率为81郾8%(18/22),两组比较差异有统计学意义(P<0郾05)。非小细胞肺癌中GRIM-19的表达与临床分期相关,玉~域期组的阳性表达率为65郾1%(28/43),芋~郁期组的阳性表达率为33郾13%(8/24),两组比较差异有统计学意义(P<胞肺癌患者性别、年龄、肿瘤大小、病理类型均无关。见表2。0郾05)。非小细胞肺癌中HMGN5、GRIM-19的表达与非小细

限公司。采用免疫组化S-P法,所有检测标本均经10%中性溶液固定,石蜡包埋,3滋m常规黏附切片,操作步骤

按试剂盒说明常规进行。其中,HMGN5单抗浓度为1颐100,GRIM-19单抗浓度为1颐60,均经0郾01mol/LpH值6郾0的枸椽酸修复液直接高压加热修复抗原2min。阳性对照为非小细胞肺癌的阳性切片,阴性对照用PBS缓冲液替代一抗。1郾3摇结果判断:在表达部位出现粗细均匀一致的黄色或棕黄色颗粒为阳性结果。其中HMGN5蛋白的阳性表达于细胞质;GRIM-19阳性表达主要定位于细胞核,少量定位于细胞质。每张切片随机在显微镜下(10伊20)选取10个视野进行观表1摇非小细胞肺癌组织和远端正常组织中GRIM-19和HMGN5的察,计数其中肿瘤细胞染色情况,按阳性细胞所占比例及染色强度分级:阳性细胞数<10%,细胞染色无黄色为阴性(-);阳性细胞数占10%~25%,细胞染色淡黄色为弱阳性(+);阳性细胞数占25%~75%,细胞染色黄色为阳性(++);阳性细胞数>75%,细胞染色为棕黄色或褐色,为强阳性(+++),所有结果由两位高年资的病理医师双盲读片判定。

1郾4摇统计学方法:采用SPSS16郾0统计软件进行数据分析。计数资料采用字2检验,相关性采用Spearman相关分析,以P<0郾05为差异有统计学意义。2摇结果

2郾1摇HMGN5、GRIM-19在非小细胞肺癌组织和远端正常组织中的表达:67例非小细胞肺癌组织中,HMGN5表达阳性有40例表达为强阳性例,其中10例表达为弱阳性(+++),阳性表达率为(+),21例表达为阳性59郾7%;高于(39++),9例远端正常组织中HMGN5的阳性表达率20郾5%(8/39),差异有统计学意义(P<0郾01)。67例非小细胞肺癌组织中,GRIM-19表达阳性有36例,其中11例表达为弱阳性(+),18例表达为阳性(++),7例表达为强阳性(+++),阳性表达率为53郾7%;低于39例远端正常组织中GRIM-19的阳性表达率郾7%(35/39),差异有统计学意义(P<0郾01)。见表1、图1。

图1摇HMGN5和GRIM-19在非小细胞肺癌组织中的表达(SP伊200):A:HMGN阳性表达;D:GRIM-195阳性表达阴性表达

;B:HMGN5阴性表达;C:GRIM-19表达指标组织例数染色结果阴性阳性阳性率(%)字2值

P值

GRIM-19癌组织67313653郾714郾455<0郾01

远端正常组织39

435郾7HMGN5

癌组织

67

274059郾715郾279<0郾01远端正常组织39

31

8

20郾5

表2摇非小细胞肺癌中GRIM-19、HMGN5的表达与临床病理特征间的关系(例)相关因素例数

阴性

GRIM-19阳性

P值

阴性

HMGN5阳性

P值

性别摇摇男女3532

1615

1917

>0郾05

96

2626

>0郾05

年龄摇摇<60逸60岁岁4225

1912

2313

>0郾05

105

3220

>0郾05

肿瘤大小摇摇>5臆5cmcm1948

1120

288

>0郾05

69

1339

>0郾05

分化程度摇摇高低、、中4522

1813

279

>0郾05

114

3418

>0郾05

病理类型摇摇鳞癌腺癌3235

1417

1818

>0郾05

78

2527

>0郾05

临床分期摇摇玉芋~~域郁期期4324

1516

288

<0郾05

96

3418

>0郾05

淋巴结转移摇摇无有

3730

169

2121

>0郾05

283

279

<0郾05

2郾3摇HMGN5、GRIM-19在非小细胞肺癌组织中表达的相关

吉林医学2019年10月第40卷第10期

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诱导的细胞凋亡蛋白GRIM-19的过度表达可激活细胞的凋亡,其表达降低或位点突变可导致细胞的异常增殖和恶性转化。GRIM-19蛋白在多种正常组织均有表达,参与RA/IFN诱导的肿瘤细胞凋亡[12]。目前研究[13]推测GRIM-19很可能是抑癌基因;有些报告亦指出,在一些肿瘤组织中能够发现GRIM-19蛋白表达受抑制、表达异常或突变的情况下,肿瘤细胞却可持续增殖。有实验提示[14]:与癌旁组织相比较,表达或缺失可能是导致乳腺肿瘤发生的重要原因。本研究结果显示,67例非小细胞肺癌中GRIM-19阳性表达率为53郾7%,低于39例远端正常组织中GRIM-19的阳性表达率GRIM-19在乳腺癌组织中呈低表达,提示GRIM-19蛋白的低

性:HMGN5、GRIM-19在非小细胞肺癌中的表达呈正相关(rs=0郾534,P<0郾01),说明HMGN5、GRIM-19可能具有协同作用。见表3。

表3摇非小细胞肺癌组织中GRIM-19和HMGN5表达的相关性(例)GRIM-19-+++

-111+HMGN5

++833

+++2362合计3111187129411

+++10合计

15

15

24

13

67

摇注:rs=0郾534,P<0郾01

3摇讨论

70%摇摇肺癌的发生率不断升高,其中非小细胞肺癌约占肺癌的

有关,,其发生可能与本身肿瘤细胞的凋亡调节紊乱有一定的并且与细胞的分化、细胞的异常增殖有关,凋亡通路紊乱、表达的失控都可能导致非小细胞肺癌的形成,成为其重要发生机制之一[4]表达可能与非小细胞肺癌发生发展有关。近年研究提示,HMGN。

5、GRIM-19的过度摇HMGN摇HMG和多数脊1、HMGN蛋白是椎动物2、HMGN一类高迁的细胞核3中和移率可HMGN蛋白[5],其家族成员包括见广泛5等蛋白的HMGN,在哺乳动物蛋白的表达[6]胞质,。而细胞的分布可能与细胞周期或细胞的新陈代谢有关HMGN5具有组织特异性的HMGN蛋白,其定位于细。HMGN裂。最近5能够促使细胞从,在Yan等的研究表明G1期进入[7]S期,从而加速细胞的分转移与浸润,提示其在肿瘤的发生及发展中有起到非常重要HMGN5可能参与肿瘤的的作用。已有研究表明,HMGN5表达水平与肺癌发生发展有密切关系,但作用机制不详[8]肺癌石蜡组织中的表达及其临床病理特征的相关研究报道甚,而HMGN5蛋白在非小细胞少,而其功能在非小细胞肺癌发生、发展过程中所起的作用也不是很清楚。在有关的研究中发现,肺癌组织的HMGN5阳性表达率与肿瘤组织学分化、肿瘤直径及TNM分期相关[9-11]阳性表达为,本研究结果显示40例,表达率高达,67例非小细胞肺癌中59郾7%,而在39例远端正常组HMGN5蛋白织中HMGN5的阳性表达为8例,表达率20郾5%,差异有统计学意义(P<0郾01),说明HMGN5在非小细胞肺癌中表现为过表达。提示HMGN5可能是引起非小细胞肺癌发生的原因之一。本研究还发现,非小细胞肺癌中HMGN5的高、中分化组阳性表达率为48郾9%,低分化组阳性表达率为81郾8%,两组比较差异有统计学意义(P<0郾05),此结果提示肿瘤细胞的增殖速度可能在分化越差的非小细胞肺癌中越快,临床检测非小细胞肺癌中HMGN5的表达情况,对预后判断有很大意义。摇个氨基酸残基的蛋白质摇GRIM-19基因定位在,分子量约为19p13郾2,其编码的产物为含有16kD,GRIM-19基因是144真核细胞进化中的保守基因,其诱导的靶基因产物即RA/IFN郾表达率与肺癌患者的临床分期显著相关7%,差异有统计学意义(P<0郾01)。GRIM-19,玉-域期组的阳性表蛋白的阳性达率为65郾1%,芋~郁期组的阳性表达率为33郾3%,两组比较差异有统计学意义(P<0郾05),提示非小细胞肺癌组织中GRIM-19至有可能出现缺失蛋白的表达随肿瘤恶性程度的升高而显著下降;但与非小细胞肺癌的肿瘤大小、病理类、甚型、有无区域淋巴结转移、分化程度以及患者的性别、年龄均无关(P>0郾05);此外,研究还发现GRIM-19蛋白在正常肺组织中的阳性定位以细胞质为主,而在非小细胞肺癌组织中的阳性定位以细胞核为主,可能提示在非小细胞肺癌的发生过程中,GRIM-19蛋白的分布由细胞质向细胞核转入。

摇HMGN摇在本研究HMGN5、GRIM-19表达的相互关系发性(P<0郾5、GRIM-1901),提示两者在非小细胞肺癌发生在非小细胞肺癌中两者的表达呈正相关现、发展起协同的作用,也可能是单因素,或者多因素共同存在的结果,且之间可能发生相互作用。

摇过度表达摇综上所述,两者均可能是参与非小细胞肺癌的发生,HMGN5和GRIM-19在非小细胞肺癌中均有,且二者间存在协同作用。通过联合检测非小细胞肺癌中HMGN5和GRIM-19疗的新靶点的表达,为提高患者的生存率提供参考指标,有助于临床上寻找非小细胞肺癌的基因治,也为治疗肺癌提供新的研究理论基础和思路。4摇参考文献

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PCDH10在肾癌组织中表达的临床意义

2郾徐州市肿瘤医院(江苏大学附属徐州医院)科教科,江苏摇徐州摇221005]

林英立1,李艳丽2,梁摇杰1,赵摇炎1摇[1郾徐州市肿瘤医院(江苏大学附属徐州医院)泌尿外科,江苏摇徐州摇221005;

[摘摇要]摇目的:探讨PCDH10在肾癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法检测PC鄄DH10在78例肾癌组织和38例癌旁组织中的表达情况,并结合患者的临床病理资料及随访结果进行统计学分析。结果:PCDH10在肾癌组织中的表达明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0郾001);PCDH10表达减少与较高的肿瘤分期、分级和淋巴结转移密切相关;Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验结果表明,PCDH10表达减少与患者总生存率降低密切相关(P=0郾014)。结论:PCDH10表达减少与肾癌的发生、发展和患者的预后不良密切相关。

[关键词]摇肾癌;PCDH10;分子标志物

ClinicalsignificanceofPCDH10expressioninrenalcellcarcinoma摇摇LINGYing-li1,LIYan-li2,LIANGJie1,

etal

[1DepartmentofUrology,XuzhouCancerHospital(AffiliatedXuzhouHospitalofJiangsuUniversity),Xuzhou221005China;2DepartmentofScienceandEducation,XuzhouCancerHospital(AffiliatedXuzhouHospitalofJiangsuUniversity),Xuzhou221005China]

Abstract:ObjectiveTheaimofthisstudywastoinvestigatetheexpressionofPCDH10inrenalcellcarcinomaanditsclin鄄icalsignificance郾MethodTheexpressionofPCDH10in78casesofrenalcellcarcinomaand38casesofadjacenttissueswasde鄄tectedbyimmunohistochemicalstaining,andthen,therelationshipbetweenPCDH10expressionandtheclinicpathologicaldataandfollow-upresultswasanalyzed郾ResultsTheexpressionofPCDH10inrenalcellcarcinomawassignificantlylowerthanthatinadjacenttissues(P<0郾001)郾ThedecreasedexpressionofPCDH10wascloselyrelatedtohigherstage,gradeandlymphnodemetastasis郾Kaplan-Meiersurvivalanalysisandlog-ranktestshowedthatthedecreasedPCDH10expressionwascloselyrelatedtodevelopmentandpoorprognosisofrenalcellcarcinoma郾

theworseoverallsurvival(P=0郾014)郾ConclusionThedecreasedexpressionofPCDH10wascloselyrelatedtotheoccurrence,

KeyWords:Renalcellcarcinoma;PCDH10;Biomarker

基金项目:江苏省青年医学人才项目[项目编号:QNRC2016395];江苏省卫生计生委科研课题[项目编号:Z2017015];江苏省第五期“333工程冶科

研资助立项项目[项目编号:BRA2017296];徐州市医学青年后备人才项目[项目编号:2014007];江苏大学临床科技发展基金项目[项目编号:JLY201600];徐州市科技计划项目[项目编号:KC17200]