壶哈，尔医堂蓝学报２０１４年第３５卷第２０期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｉｑｉｈａｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，Ｖ０１．３５，Ｎ０．２０ ・２９６９・ ．论著． 老年高血压患者ＡＣＥＩ／Ｄ基因多态性与ＡＣＥ抑制剂 疗效的相关性 梁冰胡丙清刘绪和 【摘要】 目的探讨老年高血压患者ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性与血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）疗效 的相关性。方法选取１０８例老年高血压未经降压治疗的患者；应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测其 ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性，有三种表现形式：ＩＩ型、ＤＤ型和ＩＤ型，根据其基因多态性分为三组，对所有高血压 患者均给予卡托普利口服６周。治疗前后及治疗过程中对患者的血压进行监测。结果 （１）１０８例高血 压患者中ＩＩ基因型频率为２７％；ＩＤ型为３３％；ＤＤ型为４０％；（２）ＩＩ组显著有效４例，有效ｌ４例，总有效率 ６ｌ％；ＩＤ组显著有效８例，有效ｌ８例，总有效率７３％；ＤＤ组显著有效２９例，有效１１例，总有效率９３％。 卡托普利对ＤＤ组疗效最好（Ｐ＜０．０５），ＩＤ组次之，ＩＩ组较差。结论ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性可做为老年高 血压病人选用ＡＣＥＩ时的参考指标之一。 【关键词】 老年高血压； ＡＣＥ基因多态性； 血管紧张素转化酶抑制剂 Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ＡＣＥＩ／Ｄ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｉｎ ｅｌｄｅｒｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ＨＡＮＤ Ｂｉｎｇ． Ｇｅｒｉａｔｒｉｃｓ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｔｈｅ Ｆｉｎｔ Ａｆｉｆｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｂｅｎｇｂｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇｂｕ，Ａｎｈｕｉ ２３３００４，Ｃｈｉｎａ． 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ＡＣＥ ｇｅｎｅｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ（Ｉ／Ｄ） ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｕｒａｄｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ—ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（ＡＣＥＩ）ｉｎ ｅｌｄｅｒｌｙ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＡＣＥ Ｉ／Ｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ １０８ ｓｕｂｊｅｃｔｓ ｏｆ ｅｌｄｅｒｌｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｎｏ ｔｈｅｒａｐｙ ｅｖｅｒ，ａｎｄ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｃｌａｓｓｉｉｆｅｄ ａｓ ＩＩ．ＩＤ ａｎｄ ＤＤ ｇｅｎｏｔｙｐｅ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ ｃａｐｔｏｐｒｉｌ ｗａｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｆｏｒ ６ ｗｅｅｋｓ ｔｏ ａｌｌ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｏｆ ａｌｌ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｐｏｓｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ￣ｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ＩＩ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｗａｓ ２７％， ｔｈｅ ＩＤ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｗａｓ ３３％ａｎｄ ｔｈｅ ＤＤ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｗａｓ ４０％．４ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ＩＩ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ １４ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ６１％．Ｉｎ ＩＤ ｇｒｏｕｐ，８ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ １８ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ７３％．Ｉｎ ＤＤ ｇｒｏｕｐ ２９ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，１ １ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ９３％．Ｃｕｒａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃａｐｔｏｐｒｉｌｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ＤＤ ｇｒｏｕｐ ｔｈａｎ ｉｎ ＩＤ ａｎｄ ＩＩ ｇｒｏｕｐ（尸＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＡＣＥ Ｉ／Ｄ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅ ａｓ ｏｎｅ ｏｆ ａ￣ｕｎｃｄｖｅ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｏｆｒ ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｓｉｎｇ ＡＣＥＩ ｉｎｅｌｄｅｒｌｙ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｙｐｅ￣ｅｎｓｉｏｎ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｅｌｄｅｒｌｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ； ＡＣＥ ｇｅｎｅ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ； Ａｎ西ｏｔｅｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ 血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）是一类在临床经常使 （２０１０年修订版）》诊断标准，连续３次非同日安静状态下测 用的降压药，尤其在老年高血压伴有冠心病、心功能不全的患 量收缩压在１４０～１５９ ｍｍＨｇ和或舒张压９Ｏ～９９ ｍｍＨｇ的１ 者应用广泛，但不同的人降压效果个体差异较大，原因一直不 级高血压病人，并排除继发性高血压以及自身免疫性疾病、高 很清楚。肾素一血管紧张素一醛固酮系统（ＲＡＡＳ）在原发性高 血钾、肾功能不全、肾动脉狭窄等不适合服用ＡＣＥＩ类降压药 血压的发生发展中有着重要作用，ＲＡＡＳ基因是公认的原发 的患者。该研究已获得医学伦理道德委员会批准，所有患者 性高血压的候选基因 ，目前对ＲＡＡＳ基因中的ＡＣＥ基因 签署知情同意书。 研究最多，其基因多态性对某些降压药在个体间的疗效有预 ２．方法：（１）ＤＮＡ的提取：采取清晨空腹外周静脉全血 测作用，关于这方面的研究较多，但结果不一，本实验旨在研 ５ ｍｌ，２％ＥＤＴＡ抗凝，其中１ ｍｌ按照离心柱型ＤＮＡ提取试剂 究老年高血压人群中ＡＣＥ基因的多态性与血管紧张素转化 盒说明方法提取ＤＮＡ（北京天根生化科技有限公司，目录号： 酶抑制剂卡托普利降压疗效的关系。如能通过基因分型预测 ＤＰ３１８），提取的ＤＮＡ一２０℃低温保存。（２）基因型检测：由 卡托普利的临床疗效，将是老年高血压患者今后个体化治疗 上海生工提供ＰＣＲ试剂盒及引物序列，引物序列上游５＂－ＣＴＧ 的一个新尝试。 ＧＡＧ ＡＣＣ ＡＣＴ ＣＣＣ ＡＴＣ ＣＴＹ ＴＣＴ一３ 下游５＝ＧＡＴ ＧＴＧ ＧＣＣ 资料与方法 ＡＴＣ ＡＣＡ ＴＹＣ ＧＴＣ ＡＧＡ Ｔ一３ ＰＣＲ反应体系总体积５０ ｕ１，其 中ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（２ｘ）２５ｕｌ，Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ ２ｕｌ，Ｒｅｖｅｒｓｅ １．临床资料：随机选取我院２０１２年５月至２０１３年５月 ｐｒｉｍｅｒ２ｕｌ，Ｔｅｍｐｌａｔｅ ＤＮＡ４ｕｌ，Ｗａｔｅｒ（ｎｕｃｌｅａｓｅ—ｆｒｅｅ）１７ ｕｌ ｏ应用 门诊及住院的老年高血压患者１０８例，其中男性５８例，女性 ＰＣＲ仪（广州达安，型号：ＤＡ７６００）进行扩增，扩增条件参数： ５０例，年龄均在６０岁以上。符合《中国高血压防治指南 预变性９５ ｏＣ，１８０ ｓ，循环１次；变性９５℃，３０ ｓ；退火６０℃， ３０ ｓ；延伸７２℃，３０ ｓ；以上循环３０次。总延伸７２ ｏＣ，６００ ｓ，循 作者单位：２３３００４蚌埠医学院第一附属医院老年病科，安徽 环１次。取５ ｕｌ ＰＣＲ产物及１ ｕｌ上样缓冲液在含有溴化乙锭 ・２９７０・ 医学院学报２０１４年第３５卷第２Ｏ期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｑｉｑｉｈａｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４：Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．２０ 的２％琼脂糖凝胶上电泳（电压ＩＯＯＶ，时间３０ｒａｉｎ），以ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ作为参照，紫外线灯下观察并判断基因类型。（３）服 讨 论 用卡托普利：根据ＡＣＥＩ／Ｄ基因检测结果，将患者分为Ｉ１组， ＩＤ组及ＤＤ组三组。三组问在年龄、性别无显著差异。对所 有人选患者实验前测非同日坐位血压３次，每次测２遍，取其 原发性高血压是遗传与环境因素共同作用所导致的多基 因疾病，是心脑血管疾病的重要危险因素，严重危害人类健 康。在临床工作中发现同样高血压水平的患者，服用同样的 平均值作为实验前的血压。对所有患者采用卡托普利ｌ２．５ ｍ ３次／日作为治疗量。总疗程共４周，每周一、四、日早晨８点 随访，测量坐位血压２次，取平均值。（４）降压疗效评定：根 据《中国高血压防治指南（２０１０年修订版）》及卫生部“药物 临床研究指导原则”降压药疗效标准评定。显著有效：舒张 压下降＞１０ ｍｍＨｇ，并降至正常或下降２０ ｍｍＨｇ以上；有效： 舒张压下降未达１０ ｍｍＨｇ但已降至正常或下降１０～ １９ ｍｍＨｇ；无效：血压下降未达上述标准者。 ３．统计学分析：应用ＳＰＳＳ １６．０统计软件进行数据分析， 计量资料以（孟±ｓ）表示，组间比较采用独立样本ｔ检验或单 因素方差分析；计数资料采用）（ 检验，Ｐ≤０．０５有统计学意 义 结 果 １．三组基因型患者治疗前后血压变化：见表１。 表１卡托普利治疗前后收缩压及舒张压变化 ２．不同基因型对卡托普利的有效性反应：见表２。 表２三组有效率比较 ３．ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性的检测结果，见图１。仅有４９０ ｂｐ 条带者为插入纯合子，ＩＩ型；同时有４９０ ｂｐ和１９０ ｂｐ的为插 Ａ／缺失杂合子，ＩＤ型；仅有１９０ ｂｐ为缺失纯合子，ＤＤ型。 自左至右共１２列，其中ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ（Ｌａｎｅｓ５）：ＡＧＥ ＩＩ （Ｌａｎｓｌ２）：ＡＣＥ ＩＤ（Ｌａｎｅｓ６、７、８）：ＡＣＥ ＤＤ（Ｌａｎｅｓｌ、 ２、３、４、９、１０、１１）。 图１ ＡＣＥ Ｉ／Ｄ多态性检测的电泳结果 降压药及相同的剂量，但降压效果却存在明显的个体差异 性 ３ｊ。其原因尚不清楚。近年来随着分子生物学的高速发 展，高血压的相关基因研究及基于基因的高血压的个体化治 疗成为国内外学者的研究热点 Ｊ。 肾素一血管紧张素一醛固酮系统（ＲＡＡＳ）在原发性高血压 的发生发展及血压调节中起着非常重要的作用，而血管紧张 素转换酶（ＡＣＥ）是该系统中的一个关键酶。目前原发性高血 压的基因治疗大都集中在针对ＲＡＳＳ各个成分上，其中ＡＣＥ 基因是最重要的基因之一，ＡＣＥ合成受控于ＡＣＥ基因 ，血 管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）是抑制血管紧张素转换酶活 性，故ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性可能是不同高血压病人对降压药 尤其是ＡＣＥＩ类药物反应不同的原因。人类的ＡＣＥ基因位于 染色体１７ｑ２１上，其长度为２１Ｋｈ，包含２６个外显子和２５个内 含子，其第１６个内含子上有一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ插入片段，使 ＡＣＥ基因呈现插入（Ｉ）、缺失（Ｄ）多态性，表现为Ⅱ、ＩＤ、ＤＤ三 种基因型 。 有关ＡＣＥ基因多态性与降压药疗效的相关的研究，近年 来有不少国内外的学者进行了报道，但结果不尽相同，有的报 道有关，有的却报道无关。而且未见有专门针对老年高血压 患者进行的相关研究。本研究通过予１０８例老年１级高血压 患者进行ＡＣＥＩ药物口服，结果发现ＤＤ基因型组降压效果最 好，ＩＤ组次之，Ⅱ组较差。说明ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性与ＡＣＥ 抑制剂降压有关。基因变异及其多态性可能是影响药物个体 反应差异的主要因素之一 。ＡＣＥ Ｉ／Ｄ基因多态性影响ＡＣＥ 的血浆水平，研究表明ＤＤ型ＡＣＥ浓度和活性最高，Ⅱ型最 低，ＩＤ型居中。ＤＤ基因型血清ＡＣＥ浓度约为ＩＩ基因型的 ２倍 Ｊ。故推测Ｄ等位基因活化ＡＣＥ基因的表达，Ｉ等位基 因抑制其表达。ＤＤ基因型患者循环中的ＡＣＥ浓度高，ＡＣＥ 抑制剂可以充分发挥其降压作用，是其疗效好的可能原因。 而ＩＩ、ＩＤ基因型ＡＣＥ浓度低，活性差，ＡＣＥＩ的疗效就差。因 此在临床上对已经确诊的原发性高血压患者，有条件的情况 下尽早行ＡＣＥ基因型检测，对ＤＤ基因型的高血压患者，可 首选ＡＣＥＩ，提高高血压患者的血压达标率。 虽然本研究发现老年原发性高血压的ＡＣＥＩ／Ｄ基因多态 性与卡托普利的降压疗效相关，但高血压的相关基因还有很 多 …，比如血管紧张素Ⅱ一Ｉ受体基因（Ａ１１６６Ｃ）、ＧＮＢ 基因 （Ｃ８２５Ｔ）、ａ—ａｄｄｕｃｉｎ基因、ｐｌ肾上腺素受体Ａｒｇ３８９Ｇｌｙ基因 等。这些相关基因是不是均与相应的降压药物疗效相关，还 需要以后进一步研究，最终真正实现高血压的个体化治疗。 参考文献 ［１］Ｄｕｒａｎｔｅ Ａ１，Ｐｅｒｅ￣ｏ Ｇ，Ｅａｒｉｃｃｈｉａ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｎｉｎ— ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ—ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ａｔｈｅｍｓｃｌｅｒｏｓｉｓ【Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ，２０１２，１８（７）：９８１—１００４． ［２］Ｂｒｕｇｔｓ ＪＪ，Ｉｓａａｃｓ Ａ，ｄｅ Ｍａａｔ ＭＰ，ｅｔ ａ１．Ａ ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ａｎｄ ｂｌｏｏｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ—ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ【Ｊ］．Ｊ Ｈｙｐｅ￣ｅｎｓ，２０１ ｌ，２９ （３）：５０９６１９． ［３］Ｏｍｂｏｎｉ Ｓ，Ｍａｌａｃｃｏ Ｅ，Ｍａｌｌｉｏｎ ＪＭ，ｅｔ ａ１．Ｔｗｅｎｔｙ—ｆｏｕｒ ｈｏｕｒ ａｎｄ ｅａｒｌｙ ｍｏｒｎｉｎｇ ｂｌｏｏｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｏｌｍｅｓａｒｔａｎ ｖｓ．ｒａｍｉｐｒｉｌ ｉｎ ｅｌｄｅｒｌｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ：ｐｏ０ｌｅｄｉｎｄｉｖｉｄｕ ａＪ ｄａｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｗｏ 齐齐哈尔医学院学报２０１４年第３５卷第２Ｏ期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＯｉｑｉｈａｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，Ｖｏ１．３５，Ｎｏ．２０ ・２９７１・ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｄｏｕｂｌｅ—ｂｌｉｎｄ，ｐａｒａｌｌｅｌ—ｇｒｏｕｐ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｈｙｐｅ￣ｅｎｓ， ［Ｊ］．Ｊ Ｒｅｎｉｎ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅ Ｓｙｓｔ，２０１２，１３（４）：４５５— ２０１２，３０（７）：１４６８—１４７７． ４６ｏ． ［４］ Ｙａｎ ＳＨ，Ｚｈａｏ ＮＷ，Ｚｈｕ ＸＸ，ｅｔ ａ１．Ｂｅｎａｚｅｐｆｉｌ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ＮＦ—ＫＢ ［８］ Ｒｏｓｅｎｈａｇｅｎ ＭＣ，Ｕｈｒ Ｍ．Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ＡＢＣＢ１ ａｎｄ ＴＧＦ一１３ｎｅｔｗｏｒｋｉｎｇ ｏｎ ＬＶ ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｌｅｔｔ，２０１３，１５２（２）：１２６—１３４． Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ，２０１１，１７（２６）：２８４３－２８５１． ［５］Ｄｅｖｉｃ Ｐａｖｌｉｃ Ｓ，Ｒｉｓｔｉｃ Ｓ，Ｆｌｅｇｏ Ｖ，ｅｔ ａ１．Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ—ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ［９］ Ｄｅｖｉｃ Ｐａｖｌｉｃ Ｓ，Ｒｉｓｔｉｃ Ｓ，Ｆｌｅｇｏ Ｖ，ｅｔ ａ１．Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ—ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｇｅｎｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔ Ｔｅｓｔ Ｍｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ，２０１２，１６（７）：７２２－７２５． ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｒａｄ￣ｃｉｃ Ｂａｄｏｖｉｎａｃ Ａ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔ Ｔｅｓｔ Ｍｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ， 『６］ Ｃｏｒｒｅａ—Ｎｏｒｏｎｈａ ＳＡ，Ｎｏｒｏｎｈａ ＳＭ，Ａｌｅｃｒｉｍ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ２０１２，１６（７）：７２２－５． ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－ｃｏｎｖｅａｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ Ｉ ｇｅｎｅ Ｉ／Ｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｗｉｔｈ ［１０］ Ｋｖｅｈａｕｇｅｎ ＡＳ，Ｍｅｌｉｅｎ Ｏ，Ｈｏｌｍｅｎ ＯＬ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｎｇｌｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｂｕｔ ｎｏｔ ｗｉｈｔ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｇｙｎｅｃｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ， ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ ｇｅｎｅｓｉｎ ２０１２，２８（１１）：８８９－８９１． ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ［Ｊ］．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，２０１３，６１（３）：６５５－６６１． ［７］Ｇａｐ Ｍ，Ｗａｎｇ Ｙ，Ｓｈｉ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｒｅｅ ｗｅｌｌ— ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｒｉｓｋ：ａ ｅａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ ａｎｄ ａ ｍｅｔａ—ａｎａｌｙｓｉｓ （收稿日期：２０１４－０５－２９） 银杏叶提取物阻断Ｎ一亚硝基化合物合成的研究 束莉 闫泽华 王力 张玉媛 申玲 【摘要】 目的探讨银杏叶提取物阻断小鼠体内Ｎ－亚硝基化合物合成的作用，为银杏叶提取物的抗 氧化能力和免疫抑制作用提供实验依据。方法灌胃给予小鼠生理盐水、亚硝酸钠、亚硝酸钠＋低浓度 ＥＧｂ、亚硝酸钠＋中浓度ＥＧｂ、亚硝酸钠＋高浓度ＥＧｂ，所有小鼠分笼饲养，２周实验后提取各组小鼠血清 和肝脏，一２０℃保存，检测小鼠ＭＤＡ、ＳＯＤ及ＧＳＨ等指标。结果ＮａＮＯ：组的平均肝重及肝／体重比均明 显高于对照组（Ｐ＜０．Ｏ１）；Ｌｏｗ ＥＧｂ、Ｍｉｄｄｌｅ ＥＧｂ组的平均肝重及肝／体重比高于对照组，差异有统计学意 义（Ｐ＜０．０５）；Ｈｉｇｈ ＥＧＢ组的平均肝重及肝／体重比略高于对照组，无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结 论ＥＧＢｆｌ￣，降低小鼠血清ＭＤＡ含量，同时能提高血清ＳＯＤ和ＧＳＨ活性，提高机体抗氧化能力。 【关键词】银杏叶提取物；亚硝酸钠；阻断 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ＥＧＢ ｅｘｔｒａｃｔ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｓＨＵ Ｌ／．ｅｔ ａ１． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｎｇｂｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇｂｕ，Ａｎｈｕ ，２３３０３０， ｉｎａ． 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＥＧＢ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｎ ｃｏｍｐｏｓｉｎｇ ｏｆ Ｎ—ｎｉｔｒｏｓｏ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｍｉｃｅ．ａｎｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ａｌｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ＥＧＢ ｅｘｔｒａｃｔ ｓ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｓａｌｉｎｅ．ＮａＮＯ２．ＮａＮ０２ ４－ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢ．ＮａＮＯ２＋ｍｉｄｄｌｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢ，ＮａＮ０２＋ｈｉｇｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢ．Ａ１１ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｈｏｕｓｅｄ ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ ｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｏｌｉｄ ｓｔａｔｅ．Ａｆｔｅｒ ２ ｗｅｅｋｓ．ｗｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＤＡ．Ｓ０Ｄ ａｎｄ ＧＳＨ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ／ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｒａｔｉｏ ｉｎ ＮａＮ０２ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）． ｅ ｌｉｖｅｒ ｗｅｉ ｇｈｔ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ／ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｒａｔｉｏｏｆ ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢ ａｎｄ ｍｉｄｄｌｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｈｔａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ／ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｒａｔｉｏｏｆ ｈｉｇｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ＥＧＢｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｂｕｔ ｐｒｅｓｅｎｔ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＞０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＥＧＢ ｃｎａ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＤＡ ｉｎ ｓｅｒｕｍ．ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＳＯＤ ａｎｄ ＧＳＨ．ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ ｅｘｔｒａｃｔ； ＮａＮＯ２； Ｂｌｏｃｋｉｎｇ 近年来，国内外许多科技工作者对银杏叶提取物（Ｇｉｎｋｇｏ 究很多，但主要局限于体外模拟胃酸环境下和食品中对亚硝 Ｂｉｌｏｂａ Ｅｘｔｒａｃｔ，ＥＧｂ）的化学成分、药理作用和临床医药等方面 基化反应的阻断的研究，运用动物实验对体内亚硝基化合物 进行了广泛的研究，取得了不少成果。这些研究表明，银杏叶 合成阻断的研究很少见。本研究试图通过动物实验，探讨银 提取物含有丰富的黄酮类活性物质和萜内酯等药效成分，具 杏叶提取物对小鼠体内阻断亚硝胺合成的机制，为银杏叶提 有扩张血管、改善血管机能、消除自由基、保护机体组织等作 取物在改善亚硝胺造成的机体抗氧化能力下降和免疫抑制的 用，对动物和人体无副作用，对防治高血压、心脏病等疾病具 应用方面提供参考，也为银杏叶提取物的开发利用提供理论 有显著的效果…。目前对亚硝胺体内外合成阻断作用的研 依据。 基金项目：蚌埠医学院自然科学研究项目（Ｂｙｋｙｌ２０２），安徽省预 材料与方法 防医学特色专业皖教２０１１（５） １．实验动物：取５０只健康的雄雌各半的昆明种小白鼠为 作者单位：２３３０３０安徽蚌埠医学院预防医学系（束莉，王力，张玉 实验对象，８周龄，体重２３—２８ ｇ，由蚌埠医学院实验动物室提 媛，申玲）；４６７０００河南质量工程职业学院（闫泽华）