１２４ ２．７．３ 相对生物利用度 相对生物利用度为Ｆｒ９／５一 ＡＵＣ自制／ＡＵＣ，￣＝３６．４３／３５．５８×１００ 一１０２．３９ 。 由数据可知，自制凝胶骨架片的生物利用度与市 售缓释凝胶骨架片相当，体内平均滞留时间也相当， 具有较好的缓释作用。 ３ 结论 滑石粉用量的较小变化对药物溶出的影响较小， 而硬脂酸镁用量的较小变化对药物的溶出影响很大， 随着用量的增加溶出降低。因此，在处方筛选时最好 大部分用滑石粉作润滑剂，加入少量硬脂酸镁。 磷酸氢钙虽不是致孑Ｌ剂，但这里所起作用与致孔 剂相当，其用量的多少会影响水分的渗入速度，也就 影响ＨＰＭＣ的从溶涨到溶解的速度。因此处方中就 没有再加入致孔剂，为便于考察各因素的影响，在制 软材时磷酸氢钙的用量应控制在合适的范围内。 参考文献： －Ｉ１］中国药典２００５年版ＩＳ］．二部．附录：１７９． ［２］陈新谦，金有豫．新编药物学［Ｍ］．１４版．北京：人民卫 生出版社，２００１． Ｅ３］Ａｇｇａｒｗａｌ Ｓ，Ｒａｎｉ Ｍ，Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ ＡＫ，ｅｔ ａ１．．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｇｌｉｃｌａｚｉｄｅ １３－ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｔａｂｌｅｔｓ［Ｊ￣．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌｅｔ— ｔｅｒｓ，２００１，１１（２），７８—８２． ［４］庄越，曹宝成，萧瑞祥．实用药物制剂技术［Ｍ］．北京：人 民卫生出版社，１９９９． （收稿日期：２００８—１２－０８） 芍药苷在大鼠体内的药动学和生物 利用度研究 丁光超，王芳芳，叶肖栗（浙江大学医学院附属儿童医院药 剂科，浙江杭州３１０００３） 摘要：目的建立血浆中芍药苷（ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ，ＰＦ）的ＨＰＩ Ｃ 检测方法；研究ＰＦ在大鼠灌胃和静注给药的药动学和绝对生 物利用度。方法 采用阿魏酸作为内标，流动相为乙腈一０．５ 甲酸水溶液（３０：７０），流速０．８ ｍＬ・ｍｉｎ＿。，检测波长芍药苷 ２３２ ｎｍ，内标３２２ ｎｍ，色谱柱Ｄｉａｍｏｎｓｉ１ Ｃ１８（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５“ｍ）。结果以ＰＦ浓度和与内标的峰高比进行回归， 回归方程：Ｙ一０．１８２ ５Ｘ一０．０２５ ６， ＝０．９９７ ４，最低检出 量为２Ｏ ｇ・Ｉ 一 。ＰＦ绝对回收率８３．４１ ～９Ｏ．７４ ，日间和 日内精密度ＲＳＤ 均小于５ ，ＰＦ大鼠灌胃给药的绝对生物 利用度为（２１．１１土７．９２） 。结论建立了ＰＦ血浆浓度检测 方法，此方法可用于测定ＰＦ在人或其它动物血浆中的浓度。 关键词：芍药苷；药动学；生物利用度；ＨＰＬＣ 中图分类号：Ｒ９４３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４－２４０７（２００９）０２－０１２４－０２ 芍药苷（ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ，ＰＦ）是白芍、赤芍等药材 的主要有效成分，同时也是多种传统中药方剂如四逆 散、芎芍制剂、四物汤等的主要有效成分之一，具有扩 西北药学杂志２００９年４月 第２４卷第２期 张冠状动脉，对抗急性心肌缺血，抑制血小板聚集， 增加冠脉流量，降低血压和对抗ＫＡ所致兴奋性神经 损伤等药理作用 。研究芍药苷在机体内的药代动 力学和生物利用度，有助于指导复方临床应用以及芍 药苷在全方发挥药理作用中的地位和机制。对芍药 苷的测定多采用反相高效液相法（ＲＰ—ＨＰＬＣ），本研 究测定了口服和静注后的大鼠血浆药物浓度，计算了 芍药苷的绝对生物利用度。 １材料 １．１仪器ＬＣ一１０ＡＴｖｐ高效液相色谱仪，１０一ＡＤｖｐ 紫外检测器（日本岛津公司）；Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ 。色谱柱 （１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５肚ｍ，北京迪马公司）；Ｃｌａｓｓ－ ｖｐ色谱工作站（日本岛津公司）；ＫＱ２２００型超声波 清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ＸＷ一８０Ａ旋涡 混合器（上海医科大学仪器厂）；Ａｎｋｅ ＴＧＬ一１６Ｃ高 速离心机（上海安亭科学仪器厂）。 １．２ 动物 雄性ＳＤ大鼠１２只，体质量（２８０±２０） ｇ，周龄１６～１７，５只用于灌胃给药，５只用于静注给 药，２只取空白血浆做方法学验证。 １．３ 药品与试剂 芍药苷对照品和内标阿魏酸均购 自中国药物生物制品检定所；色谱纯乙腈购自德国默 克；色谱纯甲酸购自美国天地；分析纯甲醇购自天津 化学试剂厂；自制超纯水。 ２方法 ２．１溶液的制备芍药苷标准溶液：精密称取芍药 苷对照品５．０ ｍｇ于１Ｏ ｍＬ量瓶中，用甲醇溶解并稀释 至刻度，配制成０．５ ｇ・Ｌ 的标准储备溶液，并稀释 至１０ ｍｇ・Ｌ 备用；用乙腈配制成为０．５ ｇ・Ｌ 的 内标储备液，稀释至１００ ｇ・Ｌ 备用。取芍药苷５ ｍｇ均匀混悬于１．０ ｍＬ ０．５ ９／６ ＣＭＣ－Ｎａ溶液中作为灌 胃用药，芍药苷１ ｍｇ溶于１．０ ｍＬ生理盐水（含５ 吐 温８ｏ）中作为静注用药。 ２．２ 色谱条件Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃｌ。色谱柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５，ｕｎｒ），流动相为乙腈一０．５ ９／６甲酸水溶液（３０： ７０），流速０．８ ｍＬ・ｒａｉｎ～，双波长检测：芍药苷２３２ ｎｍ，内标３２２ ｎｍ，进样量１Ｏ Ｌ。 ２．３动物试验禁食不禁水１２ ｈ后将大鼠乙醚麻醉 后固定，股动脉插管，取空白血样后灌胃或者尾静脉注 射，给药剂量为灌胃２０ ｍｇ・ｋｇ＿。，静注５ ｍｇ・ｋｇ＿。， 分别在给药后５，１Ｏ，１５，３Ｏ，４５，６０，１２０，３６０，７２０和 １ ４４０ ｍｉｎ取血各０．２５ ｍＬ至０．５ ｍＬ肝素化离心管 中，振摇后离心（３ ０００ ｒ・ｍｉｎ ），分离出血浆。 ２．４ 血浆样品处理方法 在０．５ ｍＬ的离心管中准 确加入大鼠血浆１００ Ｌ，加入４００ Ｌ内标的乙腈溶 液，涡旋６０ Ｓ，离心５ ｍｉｎ（１２ ０００ ｒ・ｍｉｎ ），转移上清 液至１．５ ｍＬ离心管中，氮气流常温下吹干，加入流动 西北药学杂志２００９年４月 第２４卷第２期 相１００ Ｌ，涡旋６０ Ｓ，离心５ ｍｉｎ（１２ ０００ ｒ・ｍｉｎ ），取 测得低、中、高质量浓度的绝对回收率分别为（８３．４１± ４．３４） ，（８９．６３±３．２２） 和（９０．７４±２．９８） 。 上清液１ｏ Ｌ进行色谱分析。 ２．５方法确证 ２．６ 药动学及绝对生物利用度数据计算 本实验对 ２．５．１ ＨＰＬＣ分析方法的专属性在本实验的色谱 ５只雄性ＳＤ大鼠进行口服和尾静脉注射芍药苷溶液 的药动学研究，所得数据用３ｐ９７药动学软件拟和，结 条件下，芍药苷（ＰＦ）的保留时间为１０．８ ｍｉｎ，内标的 保留时间为１３．９ ｍｉｎ。图１为空白血浆、及给药后 大鼠血浆样品色谱图，空白血浆中的内源性物质对芍 果表明，药一时曲线符合二室开放模型，求得主要药动 学参数如表２所示，绝对生物利用度的计算公式为： 药苷和内标的测定无干扰。 ｌ０ ２０ ｔ／ｒａｉｎ Ｂ 图１ ＨＰＬＣ图 Ａ一波长２３２ ｎｍ空白血浆；Ｂ－波长３２２ ｎｍ空白血浆； Ｃ＿波长２３２ ｎｍ样品；Ｄ－波长３２２ ａｍ样品；Ｉ－芍药苷；２－内标 ２．５．２标准曲线 取适量芍药苷标准溶液，用甲醇 稀释至质量浓度分别为０．０５，１．５，３，６和９ ｍｇ・Ｌ～， 各取１００ ＦＬ至１．５ ｍＬ离心管中，氮气流吹干后加入 大鼠空白血浆１００ Ｌ涡旋混合６０ Ｓ后同２．４项下血 浆样品的处理方法，以芍药苷峰面积与内标阿魏酸的 比值为纵坐标（ｙ），以芍药苷质量浓度为横坐标（Ｘ） 进行线性回归，回归方程Ｙ一０．１８２ ５Ｘ一０．０２５ ６， ｒ。一０．９９７ ４。芍药苷在５０～９ ０００ ｇ・Ｌ 范围内 线性关系良好。 ２．５．３精密度、相对回收率与检测限取适量芍药 苷标准溶液，用甲醇稀释至质量浓度分别为１．５，６ 和９ ｍｇ・Ｌ～，各取１００ Ｌ至１．５ ｍＬ离心管中，氮 气流吹干后加入空白血浆１００ Ｌ，配制成含芍药苷 １．５，６和９ ｍｇ・Ｌ 的血浆样品，同２．４项下操作， 进行方法的精密度和相对回收率试验，结果见表１。 最低检测限（Ｓ／Ｎ≥３）为２０Ⅱｇ・Ｌ 表ｌ精密度和相对回收率 ２．５．４绝对回收率同２．４．３项下方法配制芍药苷质 量浓度为１．５，６和９ ｎａｇ・Ｌ 的血浆样品，用４００ Ｌ 乙腈替代内标乙腈溶液沉淀蛋白后同２．４项下操作， ＡＢ一百ＡＵＧｏｒａｌ× ×ｉ００ ＡＵ １ｖ ｏｒａｌ ｄｏＳｅ ＡＢ为绝对生物利用度，ＡＵＣｏｒａｌ为灌胃给药的药 时曲线下面积，ＡＵＣｉｖ为静注给药的药时曲线下面积ｉｖ ｄｏｓｅ为静注剂量，ｏｒａｌ ｄｏｓｅ为口服剂量。芍药苷在大鼠 体内的口服绝对生物利用度为（２１．１１±７．９２） 。 表２芍药苷灌胃给药（２０ ｍｇ／ｋｇ。，ｌ＝５）和静注给药 （４ ｍｇ／ｋｇ，，ｌ＝５）后的药代动力学参数 ３讨论 在以往文献中，流动相多为甲醇和缓冲液的混合 体系，在试验中发现甲醇体系的色谱图中杂质峰不能 和芍药苷很好的分离，柱效也没有乙腈体系高，所以 实验中采用了乙腈一甲酸水溶液的混合体系，能够在 较短的时间内完成杂质、芍药苷和内标的分离，并得 到较好的谱图，并有效减少系统误差。由于ｌＯ—ＡＤ— ｖｐ紫外检测器能够同时在两个波长下检测，实验中 采用不同的波长（最大吸收波长）检测芍药苷和内标 的色谱峰，进一步减少了系统误差。 本实验对５只大鼠尾静脉注射芍药苷，发现其体 内分布符合二室模型，静注和灌胃给药后在大鼠体内 的分布迅速，吸收和消除速率较快，与以往的文献报 道相吻合，维持有效血药浓度的时间较短，在实验条 件下芍药苷的绝对生物利用度为（２１．１１士７．９２） ， 可能受首过效应的影响。 参考文献： ’ ［１］王朝虹，闵知大．芍药化学成分及药理研究［Ｊ］．时珍国 医国药，１９９９，１０（７）：５４４—５４６． ［２１ Ｙｅ Ｊｉｎｆｅｎｇ，Ｄｕａｎ Ｈｕｉｌｏｎｇ，Ｙａｎｇ Ｘｉａｏｍｉｎｇ，ｅｔ ａ１． Ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ：Ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｉｎ ａ ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ［Ｊ］，２００１，６７（８）：７６６—７６８． ［３］吴玉梅，徐汉鹏，王春婷，等．芍药苷对培养小鼠皮层神 经元的保护作用．中国药理学与毒理学杂志，２００２，１６ （３） ：１７２—１７５． （收稿日期：２００８—０９—２７）