维普资讯 http://www.cqvip.com 中国组织工程研究与临床康复身＂着身２ｏ０｜Ｉｏ５＿出７， ２０ ０７ ＶｏＬ１ １ ， ＮＯ．Ｚ Ｉ ｉｎｅｅｒｉｎａ ｒｃｈＭａ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｖｅＴｉｓｓｕｅＥｇＲｅｓｅｙ２ ｎｇ基础医学 ２。４，６一三硝基苯磺酸诱导小鼠炎症性肠病模型的建立★ 陈佳奇 ，陈村龙’，王继德’，唐建军 ，姬宏莉’ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ２，４，６・ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｍｉｃｅ Ａｂｓｔｒａｃｔ ’Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， ２Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌ０ｇ ｙ＇ Ｎａｎｆａｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ＡｆｆｉＩｉａｔｅｄ ｔｏ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ＡＩＭ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ２．４．６－ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｎｉｃ ａｃｉｄ（ＴＮＢＳ）ｌｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｏｎｉｔｉｓ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｎｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｉｔｓ ｄｏｓａｇｅ ｅｆｆｅｃｔ． ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓ时， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｔ ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ． Ｎａｎｆａｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆｒ０ｍ Ｍａｙ ｔｏ Ｃｈｅｎ Ｊｉａ－ｑｉ★． Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２Ｏ０６．Ｔｏｔａｌｌｙ ５０ ＳＰＦ－ｇｒａｄｅ ｆｅｍａｌｅ Ｂａｌｂ／ｃ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ５ ｇｒｏｕｐｓ ｂｙ ｒａｎｄｏｍ ｄｉｇｉｔｓ ｔａｂｌｅ．１０ ｍｉｃｅ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｉｎｓｔｉｌｌｅｄ ｔｈｅ ３００ ｇ／Ｌ ｅｔｈａｎｏｌ ｏｎｃｅ．Ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｉｎｓｔｉｌｌｅｄ ｂｙ ２５ ｍｇ／ｋｇ，５０ ｍｇ／ｋｇ，１００ ｍｇ／ｋｇ．１５Ｏ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ３００ ｇ／Ｌ ｅｔｈａｎｏｌ ｉｎｔｏ ｃｏｌｏｎ．Ｏｎｅ ｍｏｕｓｅ ｗａｓ ｋｉｌｌｅｄ ａｔ ｄａｙｓ ３．７，２１ ａｎｄ ２８ ａｆｔｅｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ｍｏｄｅｌｓ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｌ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｏｎ．２１ ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｓｔｕｄｙｉｎｇ ｆｏｒ ｍａｓｔｅｒ＇ｓ ｄｅｇｒｅｅ，Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ， ｌｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， Ｎａｎｆａｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａ币ｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｍｏｄｅｌｓ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｓｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃｏｌｏｎ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ． Ｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＭＰＯ） ａｃｔｉｖ［ｔｙ ｏｆ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｉｃ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ． ＲＥＳＵＬＴＳ：Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ２。３ ａｎｄ ３ ｍｉｅ ｗｅｒｃｅ ｄｉｅｄ ｉｎ ５０，１００，１５Ｏ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｌＯＳ ｄｕｒｉｎｇ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓ时， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ ①ｇｅｎｅｒａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ：Ｏｎｃｅ ｍｅｃｈａｎｉａｌｃ ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｈｅｍａｆｅｃｉａ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ２５ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｐ．ｂｕｔ ｔｈｅ ｓｙｍｐｔｏｍ ｂｅｇａｎ ｔｏ ｒｅｌｉｅｖｅ ３—７ ｄａｙｓ ｌａｔｅｒ．Ｈｅｍａｆｅｃｉａ ａｎｄ ｄｉａｒｒｈｅａ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ５０—１ ５Ｏ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｐｓ．② ＧｅｎｅｒａＩ ｆｏｒｍ ａｎｄ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａＩ ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｏｆ ｐａｔｈｏｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｎｏ ａｄｈｅｓｉｏｎ，ＩｏｃａＩ ｃｏｎｇｅｓｔｉｏｎ．ｎｏ ｔｈｉｃｋｅｎｉｎｇ ｏｆ ｃｏｌｏｎ ｗａｌＩ ａｎｄ ｎｏ ｕｌｅｒ ｃｗｅｒｅ ｓｅｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｒｉｄ ２５ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｐ ａｔ ｄａｙ ７．Ｔｈｅ ｌｏｃａｌ ｃｏｎｇｅｓｔｉｏｎ ｂｅｃａｍｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉａｌｃ ｓｅｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｍｏｓｔｌｙ ｎｏｒｍａＩ ａｔ ｗｅｅｋ ３．Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ．ｉｎｃｒａｓｓａｔｉｏｎ．ｈｙｐｅｒｅｍｉａ．ｄｒｏｐｓｙ，ｕｌｃｅｒａｔｉｏｎ．ｔｈｉｃｋｅｎｉｎｇ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａＩ ｔｒａｃｔ． ａｎｄ ｕｎｄｅｒｌａｙｅｒ ｏｆ ｍｕｃｏｓａ ｗａｓ ｈｙｄｒｏｐｓｉａ． ｉｎｆｉａｍｍａｔｏｒｙ ｃｅｌＩｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｕｎｉａ ｐｒｃｏｐｒｉａ， ａｎｄ ａｂｏｖｅ－ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ ｐｈｅｎｏｍｅｎａ ｂｅｃａｍｅ ｒｅｌｉｅｖｅｄ ｆｒ０ｍ ｔｈｅ ４ ｗｅｅｋ ａｆｔｅｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ｍｏｄｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ５Ｏ一１ ５Ｏ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｔｊｊｃｊｑ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ ｃｎ Ｃｏｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ ｔｏ：ｒ Ｃｈｅｎ Ｍａｓｔｅｒ。ｌｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｕｒｔ－ｌｏｎｇ， Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ， ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ。 Ｎａｎｆａｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０５１５ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｈｅ ｐｅａｋ ｉｎ １ ００ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｐ．③ＭＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｉｃ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ：Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｙ ｔｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ５０．１００．１５Ｏ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｇｒｏｕｐｓ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ【（１４．１７．３．３３． １８．５０．２．３３．１８．１７．１．５０．４．８３．２．００）ｎｋａｔ，Ｌ，（Ｐ＜０．０１）】． Ｃ０ＮＣＬＵＳＩＯＮ：３００ ｇ／Ｌ ａｌｃｏｈｏＩ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ １ ＯＯ ｍｇ／ｋｇ ＴＮＢＳ ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｏｕｓｅ ｃｏｌｏｎｉｔｉｓ ｉｓ ａｎ ｉｄｅａＩ ｍｅｔｈｏｄ． Ｃｈｅｎ ＪＱ， Ｂ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０Ｏ６－１ｏ－２７ Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２００７－０１－１０ Ｃｈｅｎ ＣＬ， Ｗａｎｇ ＪＤ，Ｔａｎｇ ＪＪ， Ｊｉ ＨＬ．Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ２，４ 【ｗｗｗ．ｚｇＩｃｋｆ ｉｃａｃｉｄｉｎｍｉｃｅ．ＺｈｏｎｇｇｕｏＺｕｚｈｉＧｏｎｇｃｈｅｎｇＹａｎｊｉｕ ｙｕ ＬｉｎｃｈｕａｎｇＫａｎｇｆｕ ２００７；１１（２１）：４１７４－４１７７（Ｃｈｉｎａ） ｅｓ／０７－２１１２１ｋ－４１７４（ｐｓ）．ｐｄｑ 摘要 目的：建立２．４．６一三硝基苯磺酸诱导的结肠炎动物模型，并分析其剂量效应。 方法：实验于２００６—０５／０９在南方医院消化内科研究所完成，选用ＳＰＦ级雌性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠５Ｏ只．按随机数字表法分为５组． 每组１Ｏ只，对照组予以３００ ｇ／Ｌ乙醇溶液灌肠１次；其他４组分别给予含２５ ｍｇ／ｋｇ，５０ ｍｇ／ｋｇ，１００ ｍｇ／ｋｇ，１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４， ６一三硝基苯磺酸的３００ ｇ／Ｌ乙醇溶液灌肠１次。各组于造模后３，７，２１，２８ ｄ各处死１只小鼠，观察结肠的大体形态。造模后 ２１ ｄ观察各组小鼠结肠的病理组织切片，并检测中性粒细胞的髓过氧化物酶活性。 ‘ 结果：造模过程中５Ｏ，１ＯＯ，１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组各死亡２，３，３只小鼠。 各组小鼠造模后的一般情况：对照组 及２５ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组小鼠发生一过性的结肠机械损伤表现，出现便血等现象，但３－７ ｄ后开始缓解；而 ５０卜－１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组小鼠出现便血，腹泻。②各组小鼠结肠的大体形态及病理组织学观察结果：对照组和 南方医科大学附属 南方医院．’消化内 科研究所， 麻醉科， 广东省广州市 ５１０５１５ ２５ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组小鼠肠道在第７天时表现为无粘连，局部充血，肠壁不增厚，未见溃疡，于第３周时局部充血 已好转；结肠病理切片大致正常。５Ｏ一１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组小鼠肠道肉眼可见粘连，肠腔增大，充血水肿，溃疡形 成，出现肠道增厚，病理切片见黏膜下层水肿，固有层炎症细胞浸润等现象，以上现象于造模４周后开始缓解。其中当２，４，６一 三硝基苯磺酸剂量为１００ ｍｇ／ｋｇ时作用达到高峰。③各组小鼠的中性粒细胞髓过氧化物酶活性比较：５０，１００，１５０ ｍｇ／ｋｇ ２， ４，６一三硝基苯磺酸组均显著高于对照组【（１４．１７＊３．３３，１８．５０．２．３３，１８．１７．１．５０，４．８３．２．００）ｎｋａＵＬ，（Ｐ＜０．０１）】。 结论：应用含１００ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸的３００ ｇ／Ｌ乙醇溶液灌肠是诱导小鼠结肠炎较为理想的方法。 陈佳奇★，女，１９８０ 年生，湖南省南县 人，汉族，南方医科 大学在读硕士，医 师，主要从事炎症，生 】肠痛发病夏其治疗 方面的研究。 ｔｉＩｃｉｑ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ 关键词：结肠炎；疾病模型，动物；过氧化物酶 陈佳奇，陈村龙，王继德，唐建军，姬宏莉．２，４，６－－－硝基苯磺酸诱导小鼠炎症性肠病模型的建立【＿Ｊ】．中国组织工程研究与临床康复，２００７，１１（２１）： ４１７４－４１７７ 【ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍ／ｚｇｌｃｋｆ／ｅｊｏｕｍａｌ／ｕｐｆｉｌｅｓ／０７－２１／２ｌｋ－４１７４（ｐｓ）．ｐａｌｆ］ 一通讯作者：陈村龙， 硕士，教授，南方医 科大学附属南方医 院消化内科研究所， 广东省广州市 ５１０５１５ 中圈分类号：Ｒ５７４．６２ 文越标识码：Ｂ 文章编号：１６７３．８２２５ 步认识炎症性肠病的发病机制，合适的动 ０引言 物模型是必不可少的。有报道称葡聚糖硫酸 钠诱导的炎症性肠病模型更趋向于溃疡性结 炎症性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩 肠炎，引发的是以Ｔｈ２型为主的免疫反应【１们， 病，属于非特异性炎症。炎症性肠病的发病因 而用２，４，６一三硝基苯磺酸诱导的炎症性肠 （２００７）２１－ｏ４１７４－０４ 收稿日期：２００６－１０－２７ 素包括环境微生物因素、遗传因素和免疫因 病则更趋向于克罗恩病，引发以Ｔｈｌ型为主 素【１＿引，但具体病因仍不十分明确，近年来对 的免疫反应【１ 。葡聚糖硫酸钠诱导的炎症性 炎症性肠病的研究已经有较大进展。为了进 肠病模型在本实验室已成功制作【 ，本实验 Ｐ．ｏ．Ｂｏｘ １２００．Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０００４ ｋｆ２３３８５０８３Ｇｓｉｎａ．ｃｏｒｎ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｒｎ 修回日期：２００７＿０１－１０ （０６－５０－１０－７７６３／Ｇ・Ｑ） ４１７４ 维普资讯 http://www.cqvip.com 加 ∞ ｋｆｎａｃｏｍ ２３ ３８ ５ ０８ ３＠ｓｉ。。。假陈佳奇，等２，４，等，，６一三硝摹苯磋酸诱导小鼠炎症性肠病模型的建立 ６一三硝摹苯磋酸清导小鼠炎牲性肠瓶模型刚建ｕ ２８ ｄ处 则重点探索以２，４．６一 三硝基苯磺酸建立炎 法选择１只小鼠，于造模后３，７，２１，症性肠病模型的剂量和时间，并在此基础上 死．取各组小鼠肛门至回盲部结肠，沿肠系膜 为炎症性畅病的免疫病因学研究做准备 课题背景：炎症 ｝生肠病包括溃疡 一一｝生结肠炎和克罗 纵行剖开．观察大体形态改变 根据粘连、溃 疡形成及炎症的程度不同进行评分［１５】。具体 恩病，葡聚糖硫 酸钠诱导的炎症 性肠病模型更趋 向于溃疡性结肠 １材料和方法 评分标准见表２。 设计：随机分组设计，对照动物实验 大体形态表现 记分 单位：南方医科大学附属南方医院消化 内科研究昕 粘连 无 ０ 材料：实验于２００６—０５／２００６—０９在南方 轻度（结肠与其他组织剥离教易） １ 重度 ２ 医院消化内科研究所完成。选用ＳＰＦ级雌性 溃疡形成及炎症 无 ０ Ｂａｌｂ／ｃ小鼠５０只，体质量１ ８～２２ ｇ，购于南 局部充血，无溃疡 １ １处溃疡不伴充血和肠壁增厚 ２ 方医科大学实验动物中心（许可证号： １处溃疡伴炎症 ３ ＞２处溃疡伴炎症４ ２００２—００９，２００６Ｂ００８，２００５Ａ０４６）。药品与试 ＞２处溃疡伴炎症 ５ 溃疡和，或炎症２ Ｃ．４１ｒ１，病变范围每增加１ Ｃ．４１ｒ１，积分加１ ６￣８ 剂：２，４，６一ｊ硝基苯磺酸，５０ ｇ／Ｌ溶液， Ｓｉｇｍａ公司产品 仪器：ＵＶ一２００型紫外分光 病理组织学观察：造模２１ ｄ时各组小鼠 光度计 结肠取病变明显处用体积分数为０．１的中性 设计、实施、评估者：实验设计为第一作 甲醛溶液固定，经脱水，石蜡包埋，常规切片， 者，实施为全部作者，评估为第二作者，评估 苏木精一伊红染色后根据Ｅｋｓｔｒｏｍ【侣】的标准 者经过ｌ【卜规培训，未采用盲法评估 进行病理检查。 方法： 中性粒细胞髓过氧化物酶活性测定：髓 动物分组：根据文献【１３，１４】将５０只小鼠 过氧化物酶储藏于中性粒细胞的嗜天青颗粒 按随机数字表法分为５组，每组１０只，对照组 中，是中性粒细胞杀菌系统中的主要成分，在 予以３００ ｇ／Ｌ乙醇溶液灌肠１次；其他４组分 许多炎症反应中，髓过氧化物酶被释放到细 别给予含２５ ｍｇ／ｋｇ，５０ ｍｇ／ｋｇ，１００ ｍｇ／ｋｇ， 胞外，作为反映中性粒细胞活性的一个指标。 １５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸的３００ ｇ／Ｌ 取远端结肠组织，每２００ ｍｇ加入０．２ ｇ／Ｌ十六 乙醇溶液灌肠１次。 烷基三甲基溴化铵１ ｍＬ，匀浆，冻溶３次，离 结肠炎模型制作：所有小鼠灌肠前均禁食 心（１０ ｍｉｎ，２ ０００ ｒ／ｍｉｎ）取上清液０．１ ｍＬ， ２４ ｈ 让小鼠前爪自由抓住笼面，抓取小鼠尾 以四甲基联苯胺为底物，用ＵＶ一２００型紫外 部，使小鼠倒立一从肛门插入直径为１．５ ｍｍ的 分光光度计于波长６５５ ｎｍ处测定５ ｍｉｎ内 硅胶管，深度为３．０～４．０ ｃｍ，缓缓注入药液 吸光度变化均值，每分钟吸光度值变化１．０为 ０．１～０．２ ｍＬ，拔管 继续保持倒立姿势，让药 一个酶活性单位。 液在肠道中停留３０ ｓ。３ ｄ后根据小鼠大便性 主要观察指标：各组小鼠的疾病活动度 状、、大便潜血以及体质量的下降情况予以判 指数、大体形态损伤评分、病理组织学观察结 断小鼠是否造模成功。 果及中性粒细胞髓过氧化物酶活性。 疾病活动度指数：由体质量减轻率分数 统计学分析：由第一作者使用ＳＰＳＳ 和大便隐血程度分数相加而得，评分标准见 １０．０软件进行配对资料的ｆ检验，尸＜０．０５ 表１ 为差异有显著性意义。 ２结果 ２．１ 实验动物数量分析 纳入５０只小鼠， 分为５组，其中５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯 磺酸组死亡２只，１００ ｍｇ／ｋｇ及１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组各死亡３只，此模型 大体形态损伤评分：每组按随机数字表 制作过程中小鼠死亡率为１６％。 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ ｃｏｒｎ ｆｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍ 炎，而２，４，６一三 硝基苯磺酸诱导 的炎症性肠病则 更趋向于克罗恩 病 葡聚糖硫酸 钠诱导的炎症性 肠病模型在本实 验室已成功制 作 虽然炎症性 肠病发生的确切 病因目前仍不清 楚，但越来越多 的研究提示其发 生与免疫异常密 切相关 ４１７５ 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com ＩＳＳＮ １６７３—８２２５ ＣＮ ２１—１５３９／Ｒ 陈佳奇，等．２，４，６一三硝基苯磺酸诱导小鼠炎症性肠病模型的建立 １９’ 和研发 ２．６各组小鼠的中性粒细胞髓过氧化物酶活性比较 可作为研究人类炎症性肠病的免疫机制【对照组、２５ ｍｇ／ｋｇ，５０ ｍｇ／ｋｇ，１００ ｍｇ／ｋｇ及１５０ ｍｇ／ｋｇ 抗炎新药的理想模型。 ２，４，６一三硝基苯磺酸组小鼠的中性粒细胞髓过氧化 物酶活性分别为（４．８３±２．ＯＯ，３．８３±１．３３，１４．１７±３．３３，１８．５０＋２．３３，１８．１７±１．５０）ｎｋａｔ］Ｌ，对照组与 ２５ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯磺酸组差异无显著性意义 ４ 参考文献 ’ Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ ＤＪ．Ｓａｎｄｌｅｒ ＲＳ．Ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ Ｃｒｏｈｎ．ｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ａ ｃｄｔｉｃａＩ ａｐｐｒａｉｓａＩ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ Ｉｉｔｅｒａｔｕｒｅ．Ｉｎｆｌａｍｍ ＢｏｗｅＩ Ｄｉｓ ２００１：７（１）：５１—５７ ｓｕｂｓｐ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｆｎＤｍ ｂｒｅａｓｔ ｍｉｌｋ ｏｆ Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ａｍ ＳＡ，Ｓｃｈｗａｒｔｚ Ｄ．Ｓｈａｆｒａｎ Ｉ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｄｕｍ ａｖｉｕｍ （Ｐ＞０．０５），而５０，１００，１５０ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三硝基苯 ２ Ｎａｓｅｒ磺酸组均显著高于对照组（尸＜０．０１）。 ３ Ｊ ＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏＩ ２０００：９５（４）：１０９４—１０９５ Ｏｏｓｔｅｎｂｒｕｇ ＬＥ．ｖａｎ Ｄｕｌｌｅｍｅｎ ＨＭ．ｔｅ Ｍｅｅｒｍａｎ ＧＪ，ｅｔ ａ１．ＩＢＤ ａｎｄ ３讨论 ４ ２，４，６一三硝基苯磺酸是一种半抗原，当它与肠道 的高分子组织蛋白相结合，转变成抗原。诱发机体产 生免疫反应，引发结肠炎【１７】。本实验发现经过不同剂 量２，４，６一三硝基苯磺酸灌肠处理后，各组小鼠的疾 病活动度均有增加，而对照组和２５ ｍｇ／ｋｇ ２，４，６一三 ５ ６ ７ 硝基苯磺酸组在造模１周后炎症消失，认为所产生的 炎症应属于机械损伤和化学刺激引起。而剂量在 ５０ ｍｇ／ｋｇ或以上时开始出现持续时间较长的慢性炎 症，当剂量为１００ ｍｇ／ｋｇ时作用达到高峰，结肠大体 形态可见粘连、充血，肠壁增厚，肠腔增大或形成溃 疡。纵向比较组内发现，在１周内各组均有不同程度 的肠道炎症【１ 。在对照组及２５ ｍｇ／ｋｇ组中，炎症、便 血于造模后第１天开始出现，而在１周后上述情况开 始好转，于第３周时炎症已经消失，病理切片未见异 常，因而考虑为灌肠时机械损伤和化学刺激引起。而 在５０—１５０ ｍｇ／ｋｇ组中，炎症、便血持续存在，于第３ 周时炎症趋于平稳，病理切片可见肠道全层增厚，腺 管扭曲、杯状细胞丢失，固有层增厚、有大量中性粒细 胞，淋巴细胞浸润，黏膜下层水肿。至第４周后炎症开 始缓解，此过程考虑为２，４，６一三硝基苯磺酸作为抗 原引发机体免疫反应而引起。 综上所述，２，４，６一三硝基苯磺酸法是制作炎症性 肠病较理想的方法，它周期短，方法简便，重复性好， 沈阳１２００邮政信箱１１０００４ ｋｆ２３３８５０８３＠ｓｉｎａ ｃｏｍ ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ，ｃｏｍ ｇｅｎｅｔｉｃｓ：ｎｅｗ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓ￣ｏｅｎｔｅｒｏＩ ２００３；２３９（ＳｕｐｐＩ）： ６３Ｊ６８ Ｈａｉｆｖａｒｓｏｎ Ｊ．Ｂｏｄｉｎ Ｌ．Ｔｙｓｋ Ｃ．ｅｔ ａ１．Ｉｌｆｎａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅＩ ｄｉｓｅａｓｅ ｌｎ ａ Ｓｗｅｄｉｓｈ ｔｗｉｎ ｃｏｈｏｒｔ：ａ Ｉｏｎｇ—ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ．－ｕｐ ｏｆ ｃｏｎｃｏｒｄａＲＣＳ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａＩ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｓｃ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００３；１２４（７）：１７６７—１７７３ Ｎｅｗｍａｎ Ｂ，Ｓｉｌｖｅｒｂｅｒｇ ＭＳ．Ｇｕ Ｘ．ｅｔ ａ１．ＣＡＲＤ１５ ａｎｄ ＨＬＡ ＤＲＢ１ ａｌｌｅｌｅｓ ｉｎｆｌｕｅｎｓｅ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｔＩ￣ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｌｏｃａｔｌｚａｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｒｏｈｎ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｍ Ｊ ＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏＩ ２００４；９９（２）：３０昏３１５ Ｈａｌｍｅ Ｌ，Ｐａａｖｏｌａ－Ｓａｋｋｉ Ｐ．Ｔｕｒｕｎｅｎ Ｕ．ｅｔ ａ１．Ｆａｍｉｌｙ ａｎｄ ｔｗｉｎ ｓｔｕｄｉｅｓ Ｉｎ ｉｌｆｎａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅＩ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｗｏｄｄ Ｊ ＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏＩ ２００６；１２（２３）： ３６６８．３６７２ Ｄｕｃｈｍａｎｎ Ｒ．Ｋａｉｓｅｒ １． Ｈｅｒｍａｎｎ Ｅ．ｅｔ ａｔ．Ｔｏｔｅｒａｎｃｅ ｅｘｉｓｔｓ ｔ ｗａｒｄｓ ｒｅｓｉ８ ｄｅｎｔ９ ｌｎｔｅｓｔｉ竹 ｎａＩ ｆ” ｌｏｒａ ｂｕｔ ｉ侣 ｓ ｂｒｏｋｅｎ ｌ¨ ！。 ｎ ａｃｔ侣 ｉｖｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔ仃 ｏｒｙ ｂｏｗｅＩ侣 伸 ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ ＩｍｍｕｎｏＩ １９９５；１０２（３）：４４８－４５５ Ｃｏｂｄｎ ＧＭ．Ａｂｒａｕ ＭＴ．Ｄｅｆｅｃｔｓ ｌｎ ｍｕｃｏｓａｌｉｍｍｕ ｎｉｔｙ Ｉｅａｄｉｎｇ ｔｏ Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．ＩｍｍｕｎｏＩ Ｒｅｖ ２００５；２０６ ｆ６）：２７７ Ｓｔｒｏｂｅｒ Ｗ，Ｆｕｓｓ Ｕ．Ｂｔｕｍｂｅｒｇ ＲＳ．Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍｕｃｏｓａｔ ｍｏｄｅｔｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ ＩｍｍｕｎｏＩ ２００２；２０：４９５－５４９ 李岩．王江冰．炎症性肠病动物模型分类及其与发病机制关系的研究进展【Ｊ】． 国外医学：消化系统疾病分册．２００３，２３（５）：２６７－２７０ 王旭丹．袁学勤．Ｔ淋巴细胞与炎症性肠病【Ｊ】．细胞与分子免疫学杂志．２００５， ２１（ｚ１）：９５．１ｏ０ 王群英，陈村龙，王继德葡聚糖硫酸纳致小鼠溃疡性结肠炎模型的建立【Ｊ】． 第一军医大学学报，２００２．２２（７）：６０８—６１０ Ｚｈｅｎｇ Ｌ．Ｇａｏ ＺＱ．Ｗａｎｇ ＳＸ．Ａ ｃｈｒｏｎｉｃ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ ｍｏｄｅＩｉｎ ｒａｔｓ． Ｗｏｄｄ Ｊ ＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏＩ ２０００；６（１１：１５０－１５２ 袁学勤．王旭丹．谢鸣，等．三硝基苯磺酸诱导Ｂａｔｂ／ｃ小鼠结肠炎的实验研究 【Ｊ】．中国药理学通报。２００５．２１（６）：７５６－７５９ Ｂｕｔｚｎｅｒ ＪＤ．Ｐａｒｍａｒ Ｒ．ＢｅｌＩ ＣＪ．ｅｔ ａ１．Ｂｕｔｙｒａｔｅ ｅｎｅｍａ ｔｈｅｒａｐｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｍｕｃｏｓａＩ ｒｅｐａｉｒ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ．Ｇｕｔ １９９６：３８（４）：５６８－５７３ Ｅｋｓｔｒｏｍ ＣＭ．Ｏｘａｚｏｌｏｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｂｕｄｅｓｏｎｉｄｅ， ｃｙｄｓｐｏｄｎ Ａ．ａｎｄ ５－ａｍｉｎｏｓａｔ ｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８； ３３：１７４＿１７９ Ｆｉｄｌｅｒ ＪＭ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈａｐｔｅｎ—ｓｐｅｃｉｉｆｃ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｌｎ Ｂ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ＶＩＩ． ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅＩｖｖｅＩｅｎ ａｃｉｄ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．ｓｅｒｕｍ ｔｒｉｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ ｃｏｎｔｅｎｔ． ａｎｄ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．ＣｅｌＩｌｍｍｕｎ ｏＩ １９８５；９４（１、：２８孓２９１ Ｄａｖｉｄ Ａ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ Ｍｕｃｏｓａｌｌｎｉｕｒｙ．Ｊ ＮａｔＩ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ Ｍｏｎｏｇｒ ２００１；２９：２６－３０ Ｏｂｅｒｍｅｉｅｒ Ｆ．Ｄｕｎｇｅｒ Ｎ．Ｓｔｒａｕｃｈ ＵＧ．ｅｔ ａ１．ＣＰＧ ｍｏｔｆｉｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａＩ ＤＮＡ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕ【ｅ【０ ｔｈｅ ｐｅｒｐｅｔｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｎｔｅｓｔｉｎａＩ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００５；１２９（３）：９１３．９刃 Ｈａｒｔ Ａ，Ｈａｓｓｌ ＨＯ．Ｒｉｇｂｙ ＲＪ．ｅｔ ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｆｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａＩ ｄｅｎｔｈｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅＩ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｇｏｙ ２００５；１２９（１１：５Ｏ与５ ４１７７
