果蝇的性别鉴定、形状观察及饲养方法

果蝇的性别鉴定、形状观察及饲养方法

B1组 实验日期：2013.04.16

1．引言

本次实验的目的是观察果蝇的各种性状，识别性别，学习培养基的配制方法，收集处女蝇等。利用显微镜和解剖镜结合数码照相机将果蝇的各种形状拍成照片，学习识别。

2.试验材料

2.1 试验材料

体视显微镜；蓝色塑料板；小毛笔或解剖针；麻醉瓶一个；培养皿一个；

野生型果蝇及突变体原种；滤纸条若干；麻醉剂（装在滴瓶中）；尸体盛留器；

生化培养箱（恒温培养箱）；高压蒸汽灭菌锅；培养瓶；

玉米粉；蔗糖；酵母粉；丙酸；琼脂；水；电磁炉；玻璃棒；小烧杯。

3.实验方法

3.1 果蝇麻醉及观察方法

观察果蝇和选择亲代果蝇进行杂交试验时，都要先把果蝇麻醉，使之处于昏迷状态，便于分拣。具体步骤如下：

（1） 轻拍培养瓶，使果蝇震落到培养基上。

（2） 拔掉培养瓶的塞子，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上，再次轻拍培养瓶，使果蝇调入麻醉瓶内。当有足够数量的果蝇落入麻醉瓶内时，将两瓶迅速分开各自盖好。

（3） 拔出麻醉瓶的瓶塞，向瓶塞中的棉团滴几滴乙醚，重新盖上塞子。片刻，果蝇便会被麻醉，纷纷掉落瓶底。

（4） 将麻醉的果蝇置于体视显微镜下用小毛笔轻轻地拨动观察，将需要的果蝇用毛笔拨入新的培养瓶中，将不需要的果蝇倒入尸体盛留器中。

3.2 雌雄果蝇的辨别

黑腹果蝇的一个优势是雌雄蝇的一些表型特征差别很明显，很容易辨别雌雄：

（1） 大小雌体通常比雄体大。

（2） 形态雌体腹部稍尖，较宽厚呈卵圆形；雄体腹部钝圆，相对窄小呈柱状。

（3） 条纹雌体腹部背面有宽窄相近的5条黑色条纹；雄体腹背只有3条，上部条窄，最后1条宽且延伸至腹部腹面，呈一明显黑斑。

（4） 性梳果蝇胸足跗节共有5个亚节。雄体第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构，称谓“性梳”。雌体没有性梳。

（5） 生殖器雄体外生殖器色深，雌体色浅。

3.3 突变性状的观察

果蝇自发或诱变的数量巨大。基因及染色体的改变引起表型性状的改变。我们主要观察果蝇的颜色，形状，翅的形状，翅脉的形态，刚毛的颜色、形态，平衡棒的大小、形态等方面的形状。辨明各种形状，有利于我们正确选择亲本，准确地识别杂交后代中的不同子蝇的表型。

常用于遗传学研究中的突变体有：黑檀体、残翅、三隐性（白眼、小翅、焦刚毛）。

3.4 果蝇的培养

3.4.1 培养基的制备

1）根据全班同学的数量以及需要的培养基数量确定计算配制培养基所需要的各种原料的量，用于杂交实验的培养基应多配制些许备用。

2）很据上一步的计算结果将相应数量的培养瓶洗净，控干水分，盖上塞子，在高压蒸汽灭菌锅中灭菌15~20分钟。灭菌可以杀死培养瓶中的细菌和残留的幼虫或蛹，以防影响实验结果。

3）培养基的成分：1000mL水，105g玉米粉，75g蔗糖，7.5g琼脂，6.25mL丙酸，20g酵母粉。培养基的制作方法很多，这只是一种方法。

4）配制过程：按配方将500mL水和琼脂加入锅中，使之溶解，搅拌均匀。然后将玉米粉加到剩余的水中，搅拌均匀，沿着锅边慢慢倒入，不断搅拌。继续加热，直至培养基称谓糊状便可离火。此时加入丙酸以及酵母粉，搅匀，分装在各个培养瓶中。

培养基在室温下干燥1~2天，待其表面完全凝固后使用。如有水煮挂在培养瓶壁上，则应将水分排出，好为果蝇幼虫孵化提供一个干燥的场所。

培养基最好在一个星期内使用。

果蝇的生长受温度影响较大，25℃为其最适生长温度。30℃以上可能致其死亡，10℃~20℃环境中生活周期延长，10℃一下可能影响生活力。故原种培养温度为18~20℃，杂交实验需要获得大量群体时将温度设为25℃。

原种培养每2~4周更换一次培养基，同时应检查是否被螨虫感染，如是则将被感染的蝇处死。在各个培养瓶外贴标签，注明各个瓶中蝇种的名称，日期。

3.4.3处女蝇的收集

在杂交试验中，往往需要没有交配过得雌蝇，即处女蝇。具体收集方法是：选择生长良好的含有较多即将羽化的蛹的培养瓶，清楚其中所有的果蝇。因果蝇的成熟时间是8~12小时，故在8~12小时内（最好是8小时）收集，此时的果蝇数目相比最多而且没有交配。将所有的果蝇麻醉，拣出雌蝇收集到另一瓶中，雄蝇按情况处理。如此几次，便可收集到足够多的处女蝇。

4. 实验结果

4.1 果蝇各种形状的观察

五．讨论

在遗传学实验中总是可以看到许多意想不到的现象。比如每种果蝇对麻醉剂的反应不同，有些种蝇瓶内出现了其他性状的果蝇等。我们在试验中发现黑檀体果蝇对麻醉剂的抵抗力最弱，但是查证得知黑檀体的生命力最强，这一点我遇到了点矛盾。另外，在初次麻醉果蝇的时候时间过长，导致几乎所有的果蝇都死亡了，这一点在以后的实验中需要注意。在手机处女蝇的过程中要控制好时间，不能太长了。期间就有一次收集的时候时间过长而导致果蝇存在了已经交配的可能，于是只能放弃这一代果蝇，造成了不必要的麻烦。

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