单细胞转录组测序文库的构建方法及其应用

（12）发明专利申请

（21）申请号 CN201410601383.8 （22）申请日 2014.10.30

（71）申请人 北京诺禾致源生物信息科技有限公司

地址 100085 北京市昌平区回龙观镇生命园路29号创新大厦B258室

（10）申请公布号 CN104389026A

（43）申请公布日 2015.03.04

（72）发明人 王大伟;王苗英;蒋智;李明洲;朱海浩;刘运超 （74）专利代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司

代理人 吴贵明

（51）Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

（54）发明名称

单细胞转录组测序文库的构建方法及其应用

（57）摘要

本发明公开了一种单细胞转录组测序文库

的构建方法及其应用。该构建方法包括以下步骤：对单细胞中的RNA进行反转录得到cDNA；用扩增引物对cDNA进行预扩增，得到扩增cDNA；对扩增cDNA进行片段化文库构建，得到单细胞的转录组测序文库；其中，扩增引物中的dTTP替换为dUTP。本发明的上述构建方法，通过将预扩增引物中的dTTP替换为dUTP，使得在接头连接之后的酶消化步骤能将带接头片段中含有预扩增引

物的片段打断，并在后续高温预变性及变性步骤中去除，进而减少了带预扩增引物的片段的扩增，使得产出的测序数据中带有预扩增引物污染的数据比例也大大下降，从而大大提高了产出数据的有效数据量。

法律状态

法律状态公告日

2015-03-04 2015-04-01 2017-06-30

法律状态信息

公开

实质审查的生效

发明专利申请公布后的驳回法律状态

公开

实质审查的生效

发明专利申请公布后的驳回

权利要求说明书

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说明书

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