Ｉ牛病防制Ｉ兽医导刊２ｏ１１年第１１期 布鲁氏菌病诊疗过程中被忽视的要点 克劳斯・尼尔森，于伟玲 加拿大渥太华 误诊，比如说犬患布鲁 统，包括心脏和骨骼系统。由于是 氏菌病也可能是猪种布 鲁氏菌引起的。 细胞内寄生菌，所以治疗是困难的， 但早期应用适量的、适当的抗生素 ２．布鲁氏菌是细胞 来治疗是可能治愈，但多数都是被 内的寄生细菌，其中居 误诊为感冒而错过了最佳治疗时期，住在有吞噬作用细胞， 主要是在巨噬细胞内。 他们有能力进入宿主细 胞内，结合在吞噬溶酶 导致感染成为永久性的。永久性感 染结果引发“波状热”，这是由于细 菌在不断的繁殖和释放，没有明显 原因情况下，均会复发。有可能死亡， 体内，被保护“膜”包 临床抑郁症是常见的症状。国外专家在第二届中国兽医大会牛羊瘸专场作报告 一围，这样可避免被宿主 ４．羊种布鲁氏菌是侵入性最强 杀死，所以机体的免疫 的，其次是猪种和牛种，这三种都 ，布鲁氏菌的种类 系统不能识别布鲁氏菌病，这样布 是平滑型的布鲁氏菌。犬种感染人 是少见的，布鲁氏菌绵羊副皋种和 断的释放，当机体的免疫功能不健 沙林鼠种感染尚未有报道，犬种和 绵羊副皋种都是粗糙型的病菌。海 很容易使布鲁氏菌在体内长期的存 洋菌株以及疫苗株Ｓ１９，ＲＢ５１和布 鲁氏菌羊种Ｒｅｖ １疫苗同样感染人。 １．８个陆地物种的布鲁氏菌： 牛 鲁氏菌可以在巨噬细胞内繁殖，不 种一牛， 羊种一小型反刍动物， 猪种一猪， 犬种一狗，绵羊副皋种一 全或者细胞免疫功能很差的情况下， 羊，沙林鼠种一沙漠沙林鼠，另外 还有新发现的感染田鼠的布鲁氏菌 活，这就是为什么布鲁氏菌病是一 和在人工移植的乳腺当中发现的布 鲁氏菌。 ２．几个物种感染海洋哺乳动 物：目前有２种包括＊ｐｉｎｎｅｐｅｄｉａｌｉｓ 种一海豹和＊ｃｅｔｉ种一海豚、鲸。 母表示感染人类 个不容易愈合的长期的疾病。 布鲁氏菌属不会使人流产，由于它 有时布鲁氏菌可以寄生在动物淋 是由动物或产品传染给人的，所以 巴结和生殖器官（对赤藓醇糖有亲和 人被认为是最终宿主，也就是说人 力），所以多数在生殖系统产生病变， 有时也在血液中（吞噬细胞内）传播。 由于布鲁氏菌是细胞内寄生菌， 和人之间是不会传染的。大多数感 染是由奶类制品和职业暴露引起。 ５．在雌性动物中，流产是常见 的，会导致大量细菌的脱落，流产 的液体当中含菌量能达到１０”／ｍｌ， 不断的繁殖释放，在繁殖的过程中， 二．布鲁氏菌的介绍 １．动物布鲁氏菌被认为是比较 细菌长期存在细胞内；有时会长期检 测不到动物发病，即动物的潜伏期比 流产通常会表现在第一胎（见图１），在生殖器官，乳腺，淋巴结及其他 器官中均会有细菌存在，由于细菌 具有物种特异性，像是牛种布鲁氏菌 较长，因此有些患病动物是检测不出 而以后不会流产但也不容易怀孕。 专门感染牛，但是这也是相对而言， 只是部分是正确，因为这几个物种 来的，这样就给诊断带来了困难。 ３．人布鲁氏菌病可能有潜伏期， 有多个宿主，比如猪种布鲁氏菌可 症状不是很特别的，往往症状像流 存活在乳腺当中，所以分泌的牛奶 以感染猪、马、牛、羊，还有犬和人， 感一样，发烧、出汗、关节疼痛是 中就会含有细菌。在雄性动物中，睾丸炎（见图２）、不育是常见的现象， 所以检测时应注意到，可能会导致 常见的症状，但可能涉及所有的系 ３８ ｌ投稿信箱ｓｙｄｋ２００７＠２６３．ｎｅｔ 兽医导刊２ｏ１１年第１１期Ｉ牛病防制Ｉ 水囊瘤（见图３）和脓肿也同样常见。 没有必要，除非是动物有可能暴露 为有用，最常用的测试快速凝集试 生殖失败是常见的，精液可能导致 接触（布病）。 感染。虚弱的后代和潜在感染现象 会出现。 另外说一下￥１９疫苗，一般是给 ３～８个月幼畜免疫全剂量。成年动 验，操作简单、快速，但敏感性稍差。 主要用于筛选：优点是成本低，简 单容易，速度。主要缺点是他们有 物是可以免疫Ｓ１９疫苗的，但是一 眼观误差，准确性较差，并且有前 二．疫苗研究 １．经过８０多年的疫苗研制现状。 定要减少１０倍的剂量。 区现象，会出现假阴性结果。 （１）凝集试验有两种，缓慢和快 理想的布氏杆菌病疫苗是不存在的， 保护率最高能达到９０％～９５％，不 三．诊断 １．一般有两个诊断方法。细菌 速凝集试验。 ①缓慢凝集试验。在一百多年前 能全群保护；在使用中的疫苗都存有 学诊断和血清学诊断来推定证明布 被发明并认为是相当敏感的，但不 一些残余的致病性；没有或有极少的 鲁氏菌病。细菌学诊断可以从组织 是很特异，因为它们检测ＩｇＭ类抗 交叉保护能力，并且对于接种物种以 和或体液中培养细菌，可以培养流 体，其中通常包含引起交叉反应抗 外的动物有致病性；大多数疫苗会干 产的产物、流产Ｈ＃ＪＬ胃容物、肺脏、 体。它被做了许多修改，大多是以增 扰血清学诊断，如何区分接种疫苗和 淋巴结、脾脏，也可以进行血培养。 加特异性消除ＩｇＭ抗体反应性，如 野毒感染成为我们要解决的问题；大 这种类型的诊断是非常耗力的、昂 部分疫苗具有稳定性和相对低廉的 贵、危险和缓慢的，需要在三级实 价格，关于疫苗，国际上都是提供免 验室完成，多数实验室是不能做的。 费的菌种，可以由国家农业部出面来 效率仅为１５％～７０％，敏感性较低， 要各种疫苗的菌种。 如果其它的测试是阳性的，细菌培 ２．一般有４个类型的疫苗。 养阴性结果没有任何意义。 （１）毒力活疫苗：对布鲁氏菌病 ２．分子生物学方法检测细菌。 的控制是没有用的，没有应用。 表明显示细菌核酸存在组织或体液 （２）杀死疫苗：Ｈ３８，ＰＢ，４５／２０， 中，即ＰＣＲ方法。 所有都产生低保护。 虽然它们与少数其他微生物有 （３）减毒活疫苗：牛种Ｓ］９和 交叉反应，但有几个引物相对布鲁 ＲＢ５１，猪Ｓ２，羊种Ｒｅｖ １，对这些 氏菌是比较特异的。此外，还有引 疫苗做了大量工作，结果矛盾不一 物，作为一个混合物用来确定各种 致。一般是最常用的对抗布鲁氏菌 属，包括疫苗株。这种方法操作简单， 病的疫苗。 费用也相对较低。另外，ＰＣＲ还可 （４）新疫苗：标记疫苗，保护力 以进行流行病的追踪，用于鉴定哪 比Ｓ］９要弱。还有ＤＮＡ疫苗是在遗 种生物型，或者通过序列的分析看 传物质中结合“保护”抗原。 看生物型的来源地，这些方法仍然 ３．疫苗控制。疫苗对于控制布 只适用于科研设施，但预计他们将 鲁氏菌病是非常有效的方法，保护 在短期内普及应用。 大多但非所有动物免受感染，群体 经过ＰＣＲ方法检测，发现中国 免疫可以保障足够数量的动物，以 的Ａ １ ９号疫苗与国际中通用的Ｓ１９ 限制蔓延感染。 疫苗存在巨大差异，因为Ａ］９疫苗 （１）在高流行地区，应广泛使用 没有ｅｒｉ基因（赤藓醇糖基因）的缺失。 疫苗。 ３．最常用的方法是血清学诊断。 （２）在低流行地区，应选择性地 在体液中证明有抗体是推断接触过 使用疫苗。 细菌的证据。目前有３０多种测试抗 （３）在无布病地区，接种疫苗是 体的检测，一些方法较其他试验更 投稿信箱ｓｙｄｋ２００７＠２６３．ｎｅｔ ｌ３９ ｌ牛病防制ｌ兽医导刊２０１１￣ｇ１１Ｎ 添加２一巯基乙醇，ｒｉｖａｎｏｌ，ＤＴＴ， ＥＤＴＡ。 糙型脂多糖来包被，把平滑型和粗 糙型２种布鲁氏菌都筛选出来。 但是处于潜伏期感染的动物，会给 诊断带来困难，需要我们密切注意 ②快速凝集试验。常用虎红平 板试验和ＢＰＡＴ，这种反应是在酸 性（ｐＨ３．６５）环境下，目的就是要 用酸化抗原破坏ＩｇＭ，提高特异性。 它使用高浓度的细菌抗原直接与未 稀释的血清发生结合反应，在４至８ 分钟就可以看到结果，敏感性很好， 但不是很准确。主要用于测试牛， 不是用于其他物种。 竞争ＥＬＩＳＡ的特异性高，可以 和需要我们进行检测的。 用来确诊。用平滑型脂多糖来包被 ２．清除和隔离受感染的动物。 的竞争ＥＬＩＳＡ，选择的是特异性的 动物表现出被感染必须保持远离其 单克隆抗体，单克隆抗体的亲和力 他易感动物，以避免进一步蔓延。 介于疫苗免疫和野毒感染之间，比 受感染动物通过流产材料及体液， 疫苗免疫的高，比野毒感染的低， 可以用来区分。竞争的抗体，通常 是单克隆抗体，具体为一个抗共同 抗原表位的抗体，然后加入抗特异 性单克隆抗体的酶标抗体，以亲和 力为基础选择竞争用的单克隆抗体。 一如牛奶传播扩散感染。感染动物的 牛奶如果煮开或巴氏消毒牛奶是可 以消费的，感染动物的肉如果彻底 煮熟，肉类可以消费，但是屠宰工 人处于危险中，要加强保护，对于 阳性动物只切割外面的肉，不要消 费内脏也不要开膛。 ３．控制动物移动迁移。这是在 （２）补体结合试验。准确性和特 异性很高，但是非常繁琐，昂贵和 缓慢，难以执行。 包括众多的试剂：细菌抗原，测 定要仔细选择单抗以维持敏感性， 而不丧失特异性。 试血清，豚鼠血清（补体）绵羊红细 需要标准化试剂，所以使用很少。 （３）沉淀反应试验。是有问题的， 并主要用于诊断绵羊副皋种和犬种， （５）荧光偏振法（ＦＰＡ）：是一种 控制布鲁氏菌病中最重要的。阳性 动物坚决不应卖给其他农民或异地 出售。任何动物进入正常的牧群都 要进行检测，确保没有病的情况下 胞和兔抗绵羊红细胞抗体，每一天都 均相法不需要除去未反应试剂，不 用洗板，反应较快，２分钟之内就可 完成。 基本结合实验需要相对昂贵的设 才可以迁进或迁出。动物表现出被 个现代的、切合时宜的、起作用的 操作简单，但缓慢而繁琐，敏感性 备，这些设备使数据处理更容易，所 感染，必须限制移动迁移。需要一 和特异性低。它是第一个来区分￥１９ 疫苗和野毒感染的试验。 （４）基本结合实验。国际上现 行的方法，包括ＥＬＩＳＡ反应和ＦＰＡ 试验。基本结合实验可以操纵来取得 理想的敏感性和特异性的特点。由于 敏感性和特异性是可以调节的，如果 我们想进行大规模的检测，我们在一 开始的时候就要选择一个敏感性最 高的试验，确保把所用感染的动物都 筛选出来，间接ＥＬＩＳＡ就是一种敏 感性最好的试验，这样提高敏感性 了，特异性就低了，那我们确诊的时 以基本结合实验是更适合的控制、消 灭计划以及监视布病。基本结合试验 诊断程序和严格的法律限制动物移 有商品化的试剂盒，价格不等，但质 量相差不大，有中国自己制造的试剂 盒，测试评估清楚地表明了他们有很 好的质量和价格便宜。 动迁移。赔偿杀死的动物最为有效， 无论是金钱或更换动物均可。 ４．教育。这是非常重要的，要去 教育所有的处于可能潜在受动物感染 的人，必须告诉如何保护自己，如何 四，控制 控制布病取决于四个方面：（１） 保护他人，如何保护其他动物，以及 如何用一个更合适的方式养殖动物。 疫苗接种，保护易感动物。（２）清 并且告诉牧民如何消毒，如何处理动 除和隔离受感染的动物。（３）限制 物是很重要的，另外人类的住宿场所 动物移动迁移。（４）教育人们重视、 防护和控制。 １．疫苗接种，保护易感动物以 与动物应保持有一段距离，提高认识 了，才有利于消除布鲁氏菌病。 对中国来说，有效地利用区域办 法来控制布病是最有可能的，首先 选择一个低流行地区，最好有良好 候就要选择特异性高的试验来确诊， 如竞争ＥＬＩＳＡ来确诊，这是最好的， 防止蔓延感染。疫苗接种易感动物 是必要的，在保护动物上，疫苗接 最适合中国实际的方法。 间接ＥＬＩＳＡ方法是一个很好的 种一般是９０％以上有效，但要注意 的地理环境，测试这个地区的动物， 筛选试验，可用于检测大多数动物 免疫要针对疫苗的特异性动物。未 先进行净化清除，确定无感染再继 种属对多种布鲁氏菌的抗体，有多 种不同的抗原可用于间接ＥＬＩＳＡ， 最常见的是脂多糖，用平滑型和粗 免疫的动物一旦感染将会导致流产 续储备动物，逐步净化。 风暴，感染传播很快。免疫过疫苗 阴性的易感动物都应接种疫苗， 的动物可能会有少数的动物感染。 成年动物（非怀孕）应（下转４６页） ４０ ｌ投稿信箱ｓｙｄｋ２００７＠２６３．ｎｅｔ Ｉ牛病防制Ｉ兽医导刊２ｏ１１年第１１期 后平均９５ ｄ受孕。 每天ｌ剂，连服４天：同时用０．１％ 免疫、预防感染。 １．保证牛体健康，提高抗病能 力。饲料营养要全面，尤其注意饲 料中维生素Ａ、Ｄ、Ｅ及Ｓｅ、Ｍｎ、 （三）中西医结合疗法 １．中西药复方灌注剂。 高锰酸钾溶液冲洗子宫２次、５％温 盐水冲洗２次、糖苏盐溶液（红糖 清官液：由益母草、红花、桃 ９０ ｇ、小苏打１ ｇ、食盐１ ｇ、蒸馏水 仁、病菌净等组成（中国农科院中兽 加至１ ０００ｍ１）冲洗２次，最后子宫 医研究所）。子宫灌注，治疗ｌ ４１４ 灌注青霉素１６０万单位、链霉素２００ 例，治愈率为８７．８４％，有效率为 ９４．５５％。 Ｃｏ等微量元素的含量和Ｃａ、Ｐ等矿 物质的比例。研究发现，在奶牛产 前２～３周添加阴离子盐可以有效 万单位，隔日处理１次，连续３次。 治疗２８例，治愈２６例。 当归６０ ｇ，川芎３０ ｇ、桃仁 ３０ ｇ，炮姜２０ ｇ、赤芍３０ ｇ、红 降低奶牛产后瘫痪、胎衣不下、酮病、 中西药混合灌注剂：由益母草 浸膏１０ｍｌ（每毫升含原药３ ｇ），氯 子宫内膜炎、乳房炎和真胃移位等 疾病的发生，提高产奶量和情期受 胎率。注意加强围产期管理，适当 运动。 ２．保持环境卫生，减少感染机 霉素１．５ ｇ，呋喃西林１ ｇ，豆油 花３０ｇ、没药２５ｇ、益母草ｌＯＯｇ、 ２０ｍｌ组成。有效率９３．１％，受胎率 ７２．４％。 炙甘草３０ ｇ、荷叶３张，或党参 ５０ ｇ、茯苓５０ ｇ、陈皮３０ ｇ、当归 ６０ｇ、川芎３０ｇ、桃仁３０ｇ、荆三棱 连翘、黄柏、金银花各２０ ｇ，苦参、 淫羊藿、红花各１５ ｇ，大青叶、蛇 床子、甘草各１０ｇ，环丙沙星２ｇ， 制成乳剂，子宫灌注。 会。注意牛舍及产房的清洁卫生， 人工助产、胎衣剥离、配种等所用 的器械及操作人员手臂要严格消毒， 防止将致病菌带入子宫。操作规范， 减少生殖道损伤。 ３．定期健康检查，控制病情发 ３０ｇ、红花３０ｇ、黄芪３０ｇ、益母草 ｌＯ０ ｇ、炙甘草３０ ｇ、荷叶５张，水 煎服，每天ｌ剂，连服５ ｄ：同时静 脉输注葡萄糖盐水，用温清水、０．１％ 高锰酸钾溶液冲洗子宫后投放青霉 连翘、大黄、益母草、红花等， 提取精制成每毫升含生药２ ｇ，取 ８０ ｍｌ，加入１％的乳酸环丙沙星溶 素粉。治疗多头病牛，均于１０ ｄ内 痊愈。 展。尤其关注产后期牛体健康，尽 液１０ｍｌ、纯化水１０ｍｌ，高压灭菌， 子宫灌注。 ２．中西药合用。用中药补气养 血、活血化瘀，用西药抗菌消炎。 如：党参５０ ｇ、黄芪５０ ｇ、茯 早发现和治疗原发病和继发病，避 免错过理想的治疗时机。 此外，有人建议，奶牛子宫内 膜炎的发生与季节有一定关系，可 通过控制奶牛配种受孕季节，避免 ６～９月高温季节分娩，在一定程度 分析以上措施。中西医结合疗 法更符合奶牛子宫内膜炎的治疗原 则，具有扬长避短、相得益彰的效果， 因此建议采用中西医结合疗法。 苓３５ ｇ、陈皮４０ ｇ、当归３５ ｇ、川 芎３０ ｇ、桃仁３０ ｇ、赤芍３０ ｇ、红 花３０ｇ、没药１５ｇ、益母草１００ｇ、 炮姜２０ｇ、炙甘草２０ｇ，水煎服， 三．奶牛子富内膜炎强防 根据子宫内膜炎发病机理，奶牛 子宫内膜炎的预防原则主要是增强 上可降低子宫内膜炎的发生。 参考文献（略） （上接４Ｏ页）减少１０倍剂量，少于 要使用牛奶。 ８个月龄动物，应给予全剂量。所有 成熟的动物，应定期测试，如果没 行的血清学调查，获取患病率和分 布的基线，对控制策略不是一成不 变的，要根据实际中的检测情况随 时调整控制方法；建立社区意识和 风险沟通；协调方法和结果；动物 ②经常洗手，可能的话戴塑料手套。 ③如果皮肤被打破，必须戴手套， 这很重要。 有阳性的动物，建议每年两次测试， 如果有阳性动物，每隔６０～９０天 测试一次，如果连续３次以上检测 都是阴性的，就可以说是正常的牧 群。任何近分娩的动物，应予隔离， ④避免被喷上粘液，牛奶。 ⑤任何流产物质都应非常小心处 标识是必要的；使用现有的最佳工 理，不应当作狗食。 具，疫苗和诊断检测，可能会稍微 昂贵些，可能值得花这些额外的钱； ⑥任何肉类必须煮熟后食用。 避免与其它接触，有利于控制疾病。 在处理阳性的动物，牧民应采取 预防措施，包括： ⑦流产胎儿要与消毒剂一起掩埋 要有花大量的时间和金钱的准备。或焚烧。 制定控制程序的工作，人医和兽 控制和消除布鲁氏菌病是一项非常 艰巨的任务，是可以做到的。口 ①除非煮开或巴氏消毒，否则不 医携手合作，这是十分重要的。执 ４６ Ｉ投稿信箱ｓｙｄｋ２００７＠２６３．ｎｅｔ