pbs配方

另附1N（当量）NaOH溶液的配置方法：

1L溶液中所含溶质的Eq数（或1ml溶液中所含溶质的mEq数）表示的浓度，称为当量浓度。

N = 溶质的质量（g或mg）/ （溶质的当量×配置溶液的体积）

酸的当量 = 分子量 / 酸分子中被金属置换的氢原子数

碱的当量 = 分子量 / 碱分子中氢氧根数

盐的当量 = 分子量 / 盐分子中金属原子数的金属总价

例：配1 Eq/L NaOH水溶液100ml（即0.1L）

NaOH 分子量40

NaOH 当量为40 / 1 = 40

设需要NaOH质量为X

有：1 = X / （40×0.1）

X = 4 g

称取4g NaOH溶解于100ml双蒸水中，NaOH浓度即为1个当量

0.1M PBS：1000ml蒸馏水中加

NaCl 9g

Na2HPO4.12H2O 6g

NaH2PO4 .2H2O 0.4g

PH：7.2

为博士德配方

分子克隆上的PBS配方：

NaCl: 8.00g

KCl: 0.20g

Na2HPO4*H2O: 1.56g

KH2PO4: 0.20g

1. 0.01mPBS (PH7.4)

Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）

3.473g

NaH2PO4•12H2O（磷酸二氢钠） 0.226g

Nacl 0.9g

三蒸水 1000ml

2. 加氯化钠的称PBS，加氯化钾、氯化钠的称KPBS。不加氯化钠、氯化钾的称PB。

关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制PH5.7～8.0的PB缓冲溶液。S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。最好能现配现用。母液4℃可以保持1～2周，影响不大。

0.01M PBS （PH 7.2）（g/ L）

NaCl 8.0

KCl 0.2

KH2PO4 0.2

Na2HPO4.12H2O 2.9

用1N的NaOH调节PH 值至7.2

ddH2O定容至1000ml，高压灭菌

0.01PBS液：

NaH2PO4.2H2O 0.5g

Na2HPO4.12H2O 5.9g

NaCl 9g

加双蒸水至1000ml差不多刚好pH7.4

PBS的配制

称取NaCl 8.00g KCl 0.20g KH2PO4 0.20g Na2HPO4•H2O 1.56g，加入蒸馏水至总体积为1000ml，溶解后过滤除菌待用。

0.01mol/L，pH7.4的PBS

0.2mol/L Na2HPO4 81ml

0.2mol/L NaH2PO4 19ml

氯化钠 17g

蒸馏水加到 2000ml

其实道理是一样。

0.1M的PB（不加氯化钠）配方：

1.储备A液，磷酸氢二钠35.6克，加重蒸水溶解至1000ml。

储备B液，磷酸二氢钠13.8克，加重蒸水溶解至500ml。

2.工作液（0.1M），PH A液（ml） B液（ml） 重蒸水（ml）

7.0 30.5 19.5 50

7.4 40.5 9.5 50

8.0 47.35 2.65 50

0.1M的PBS配方：

储备A液： 1M的氯化钠溶液（氯化钠5.844克，加重蒸水至100ml ）

储备B液：0.2M磷酸氢二钠（Na2HPO4 5.678克加重蒸水至200ml 或Na2HPO4•12H2O14.32克加重蒸水至200ml ；

储备C液：0.2M 的磷酸二氢纳（NaH2PO4）2.76克加水至100ml或（NaH2PO4•12H2O）3.12克加重蒸水至100ml；

工作液：A液 12.5ml 62.5ml 12.5ml

B液 8.1ml 40.5ml 81ml

C液 1.9ml 9.5ml 19ml

加重蒸水至 100ml 500ml 1000ml

（在工作液中 磷酸缓冲液浓度为0.1M,L氯化钠浓度为0.125M,PH为7.3—7.4，于4度冰箱中克保存三月）

我纯化蛋白用的PBS：1.37 mM 的 NaCl 8g，2.7 mM的 KCl 0.2g，10 mM 的 Na2HPO4·12H2O 3.58g，2 mM的KH2PO4 0.27g，然后加NaOH 用PH计调PH值8.0。

从美国来的配方，我们实验室一直用的这个，很好使的！我们科在临床上做了很多免疫组化，结果很漂亮。

是工作浓度，根据自己的要求配浓缩液

Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠） 13.42g

NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠） 1.95g

Nacl 42.5g

三蒸水 5000ml

关键是pH，一定要调在7.4左右，其实配方都差不多，关键是pH。

可以用NaOH和盐酸调。

(1)0.2M Na2HPO4: Na2HPO4·12H2O 71.64g加蒸馏水至1000ml;

(2)0.2M NaH2PO4: NaH2PO4·2H2O 35.6g加蒸馏水至1000ml。

按81.0ml(1)+19.0ml(2)比例，再加17gNaCl和1900ml蒸馏水，即为0.01MPBS

加入蒸馏水时不要全部加完，最后剩余100ml不要加，用NaOH或Hcl调节pH之后，再将蒸馏水补足。

“0.01M到底是指的什么？”

指的是H2PO4或HPO4的浓度。0.2M的H2PO4或HPO4取100ml，稀释20倍成2000ml。此时的浓度为0.2/20=0.01M。

一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）

NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl

用于细胞培养的PBS需含有氯化钾

我们实验室的配方：

A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：

磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。

B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：c

酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。

或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。

pH －－ A液 （ml） －－ B液（ml）

5.60 －－ 9.50 －－ 0.25

5.91 －－ 9.00 －－ 1.00

6.24 －－ 8.00 －－ 2.00

6.47 －－ 7.00 －－ 3.00

6.64 －－ 6.00 －－ 4.00

6.81 －－ 5.00 －－ 5.00

6.98 －－ 4.00 －－ 6.00

7.17 －－ 3.00 －－ 7.00

7.38 －－ 2.00 －－ 8.00

7.40--1.9--8.1

7.73 －－ 1.00 －－ 9.00

8.04 －－ 0.50 －－ 9.50

PBS缓冲液的配制

2011-07-08 21:31:51来源： 浏览次数：13630网友评论 0 条

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结： 母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol... PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是总结：

母液的配制：

0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水

0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水

各种浓度PB(pH=7.4)的配制：

先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：

0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。

另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：

pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）

5.7 93.5 6.5

5.8 92 8

5.9 90 10

6.0 87.7 12.3

6.1 85 15

6.2 81.5 18.5

6.3 77.5 22.5

6.4 73.5 26.5

6.5 68.5 31.5

6.6 62.5 37.5

6.7 56.5 43.5

6.8 51 49

6.9 45 55

7.0 38 62

7.1 33 67

7.2 28 72

7.3 23 77

7.4 19ml 81ml

7.5 16 84

7.6 13 87

7.7 10.5 0.5

7.8 8.5 91.5

7.9 7 93

8.0 5.3 94.7