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大鼠泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型的建立

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西南国防医药2019年3月第29卷第3期窑301窑王[馨袁王贇袁杨金霞]探讨大鼠泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型的建立方法与效果遥清洁级SD大鼠24只随机分为对照组(n=12袁雌雄各6只)与观察组(n=12袁雌雄各6只)袁观察组经气管插管法注射0.4ml泛耐药铜绿假单胞菌液袁对照组接种0.4ml灭菌生理盐水袁记录大鼠变化情况遥(WBC)尧中性粒细胞(NEUT)尧血清C-反应蛋白(CRP)显著高于对照组袁也高于接种前(<0.05)遥接种1尧3尧7d后袁观察组肺湿干重所有大鼠都顺利完成实验袁无意外死亡情况遥接种24h后袁观察组的外周血白细胞比显著高于对照组(<0.05)遥接种1d后袁观察组肺组织内出血袁有炎症细胞渗出袁间质水肿袁且随着时间延长逐渐加重曰而对照组肺组织均为淡白色袁弹性良好遥接种1尧3尧7d后袁对肺组织培养24h袁观察组均有泛耐药铜绿假单胞菌生长袁菌落扁平湿润袁边缘不整齐袁有典型的金属光泽袁而对照组无菌落出现遥[经气管插管法可建立大鼠泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型袁能有效反映肺炎的病理表现及外周血炎症指标变化袁建模成功率高袁稳定性好遥]气管插管法曰SD大鼠曰泛耐药铜绿假单胞菌曰肺炎模型1004-0188渊2019冤03-0301-03R446Adoi:10.3969/j.issn.1004-0188.2019.03.001WangXin1,WangYun2,YangJinxia3[]Qinghai,810000,China;2.DepartmentofEmergency,TheFourthPeople'sHospitalofQinghaiProvince,Xining,Qinghai,810000,China;3.DepartmentofRespiratoryMedicine,TheFourthPeople'sHospitalofQinghaiProvince,Xining,Qinghai,810000,Chinamodelinrats.recorded.Toexplorethemethodandeffectofestablishingapan-drugresistantsixmalesandsixfemales,respectively).Theobservationgroupwasinjectedwith0.4mlpan-drugresistantAtotalof24cleanSDratswererandomlydividedintoacontrolgroupandanobservationgroup(n=12andpneumonia1.DepartmentofLaboratory,TheFourthPeople'sHospitalofQinghaiProvince,Xining,solutionbymeansoftrachealintubation,andthecontrolgroupwasinoculatedwith0.4mlsterilizedsaline.Thechangesofratswereaftertheinoculation,theperipheralwhitebloodcells(WBC),neutrophils(NEUT)andserumC-reactiveproteinTheexperimentswerecompletedonallratssuccessfully,withoutanyaccidentaldeathofrat.Twenty-fourhours(CRP)intheobservationgroupweresignificantlyhigherthanthoseinthecontrolgroup,andalsohigherthanthosebeforetheinoculation(接种1 d 5.19±0.48① 2.05±0.22

接种3 d 4.67±0.11① 2.57±0.22

接种7 d 5.68±1.00① 3.57±0.51

注:与同时间对照组比较,①P < 0.05

肺组织病理改变观察组接种1d后袁肺组织内出血袁有炎症细胞渗出袁间质水肿袁且随着时间延长逐渐加重曰对照组肺组织均形态正常袁弹性良好遥见图1遥肺组织细菌培养及鉴定在接种1尧3尧7d后袁观察组肺组织培养均阳性袁逐渐形成菌落袁表面扁平湿润袁边缘不整齐袁有典型的金属光泽袁而对照组无菌落出现遥建立泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型的方法比较多袁直接暴露感染是通过易感染动物的呼出气体或身表1 两组接种前后外周血指标比较(n=12)

WBC(×10/L) NEUT(×10/L) CRP(g/L)

组别

接种前 接种24 h 接种前 接种24 h 接种前 接种24 h

①②①②

观察组 6.88±0.44 21.00±1.49 2.18±1.44 15.66±2.88 4.22±1.02 18.29±0.62①② 对照组 6.79±0.34 6.88±0.55① 2.22±1.22 2.33±0.18① 4.19±0.99 4.52±0.41①

注:与本组接种前比较,①P < 0.05;接种24 h后与对照组比较,②P < 0.05

9

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西南国防医药2019年3月第29卷第3期体接触方式传播病原体袁使未感染动物达到接种感染目的遥但是袁其成模率不高袁有很大的随机性[6]染会造成肺部感染袁不需要把整个动物暴露在充满遥吸入感接种物的空间中袁应用也比较方便袁但是该方法不能完全确保建模成功[7]较高袁但是对机体创伤大遥[8]气管切开法虽然成模率比起动物死亡[9]遥呼吸道袁实验操作简便可行遥气管插管法把接种物直接送进动物经皮气管穿刺法容易引袁安全性也比较好[10]此袁本研究利用气管插管法建立泛耐药铜绿假单胞遥因菌肺炎模型袁进一步证实其稳定性与可行性遥本研究所有大鼠都顺利完成实验袁无意外死亡情况袁说明气管插管法建模成功率高袁对大鼠致死率低CRP袁稳定性好袁染的情况是主要的炎性指标有助于后续的研究遥WBC尧NEUT和WBC尧NEUT尧CRP[11]遥本研究结果显示袁在一定程度能反映肺部感袁接种24h后袁观察组说明观察组大鼠肺部被感染显著高于对照组遥肺组织病理结果显袁也高于接种前袁示袁接种1d后袁观察组肺组织内出血袁有炎症细胞渗出袁间质水肿袁且随着时间延长逐渐加重袁而且观察组肺炎症性损伤量化指标要要要湿干重比也持续升高[12]且持续加重袁提示观察组大鼠肺组织出现了炎症性损伤遥肺组织细菌培养鉴定结果发现袁观察袁组肺组织培养均阳性袁逐渐形成菌落袁其扁平湿润袁边缘不整齐袁有典型金属光泽袁符合泛耐药铜绿假单胞菌菌落袁证实肺部发生泛耐药铜绿假单胞菌感染遥上述结果均说明观察组大鼠已经成功感染袁气管插管法成功建立了具有稳定性与可行性的泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型袁此模型可有效反映肺炎的病理表现与外周血炎症指标变化遥窑303窑综上所述袁经气管插管法建立的大鼠泛耐药铜绿假单胞菌肺炎模型可有效反映肺炎的病理表现与外周血炎症指标变化袁具有很好的稳定性与可行性袁可用于后续的实验研究遥[1]王玉春国际检验医学杂志.泛耐药铜绿假单胞菌的感染现状及危险因素分析,2016,37(9):1168-1169.[J].[2]黄飞燕对儿童肺炎支原体肺炎的诊断价值,刘春艳,朱红枫.基于血清细胞因子的[J].实用医学杂志PLS,-DA2018,模型34[3](1):王彤87报,2018,,-苏鑫89,92.34(1):,艾新法169.-172.肺炎动物模型研究[J].长春中医药大学学[4]窦懿[5][J].解岚岚中华烧伤杂志,张勤.9年间烧伤患者病原菌分布特点及耐药情况分析,炎模型的新方法,王惠琴,2018,34(3):153-159.[J].薛佩妮徐州医学院学报.探索建立SD,2018(1):17大鼠铜绿假单胞菌肺-20.[6]邓世群原体感染,赵世元BALB/c,张帮献小鼠体内表达及相关机制.黏附分子CD44和[J].ICAM现代检验医学-1在肺炎支杂志,2018,33(1):91-94.[7]cellJiangD,LiuY,JiangH,etal.Anovelscreen-printedmastquorum-basedelectrochemicalsensorforacyldetecting-homoserinespoilage-lactones)bacterialfreshwatersignalingfish[J].BiosensmoleculesBioelectron,(N-2018,15(102):396-402.in[8]andKumariimmunoR,Kumar-modulatoryS,KumarpropertiesA,etal.inAntibacterial,extractsofantioxidantlupulinaLindl[J].BMCComplementAlternMed,2017,Barleria484-495.17(1):[9]徐娟菌的危险因素评估模型,殷勇,赵丽霞,等.[J].社区获得性肺炎患儿感染多重耐药医学综述,2018,24(4):804-811.[10]AlhaririandbacterianegativelyM,MajrashiandbiofilmchargedMA,liposomeBahkali-loadedAH,et[J].Intgentamicinal.EfficacyJNanomedicine,onplanktonicofneutral18(12):6949-6961.communities2017,[11]刘艳丽床价值[J]..PCT尧hs解剖学研究-CRP尧WBC,2017,39(1):54及NEUT-57.在肺部感染诊断中的临[12]雷志强肺炎模型的建立,张丁,杨琼秀[J].中华微生物学和免疫学杂志,等.肺炎克雷伯菌ST23型流行株小鼠,2018,38(3):205-210.渊收稿日期院2018-09-29冤

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